微球支持 - 入门

在含有疏水染料（专用于特定的FluoSpheres™产品）的溶液中，聚苯乙烯微球会在膨胀。之后，此染料能够扩散到聚苯乙烯基质中。然后微球从溶剂中移除并透析进入到水相环境，反相膨胀并将染料嵌入聚苯乙烯。染料嵌入聚苯乙烯后，会与外界环境妥善地隔离。标记的具体实验方案和疏水性染料的成分是我们的专利技术。

我们没有测定过每个微球中染料分子的具体数目。染料分子数目是一个与微粒直径和染料性质相关的变量。

微球浓度和表面电荷一般可以在特定批次的分析证书（Certificate of Analysis）中找到。大部分分析证书都可以在产品网页上找到。如需网页上未列出的分析证书，请点此处。

我们建议使用500,000 MWCO截留分子量透析的方法从含有微球的缓冲液中除去叠氮化钠。

其在醇类或水/醇类混合物中的稳定性取决于醇类的链长。微珠在40%的甲醇中相当稳定，但是它们在长链醇类中会更容易溶解。微珠在含有醇类的溶剂中长时间储存会导致染料的溶出。

FluoSpheres™微球可能含有微量的表面活性剂。仅仅直径> 100 nm 的IDC Latex微球完全不含表面活性剂。

我们建议使用ProLong™产品或其他水相封片剂，应该避免有机成分封固剂，如基于二甲苯的封片剂。

点扩散函数需要高分辨率微球，我们有两种可用于此用途的高分辨率微球。TetraSpeck™微球，0.1 µm（货号T7279）是单一的高分辨率微球，同时带有蓝、绿、橙和暗红染料。PS-Speck™ Microscope Point Source Kit（货号P7220）则包含单独染色的蓝、绿、橙和暗红荧光微球，直径约175 nm。

我们提供多种专用于血流量测定的FluoSphere™ 微球和试剂盒；如果我们提供的颜色和/或粒径不符合您的需求，我们建议在血流量测定过程中使用羧基修饰的珠子。我们在用于示踪研究的FluoSpheres™ 荧光微球产品手册中提供了一些基本的使用指南。另外，西雅图的华盛顿大学的荧光微球资源中心（FMRC）网站上提供有使用荧光微球评估局部血流量的详细应用手册和参考文献。

TransFluoSpheres™ 产品使用精心挑选的两种或多种荧光素，支持激发态能量传递，从而产生大斯托克斯位移的荧光微球。每个微球含有一种染料，其激发峰与一个常用激发源光谱最大重叠（例如，488 nm 光谱线）。由于这些TransFluoSpheres™微球所发荧光的波长远大于激发波长，它们的信号在含有雷利、拉曼散射或内源性荧光物质（例如后胆色素类、黄素和某些药品）的样品中能够被检测到。

我们的铕和铂发冷光的FluoSpheres™等 时间分辨的发冷光试剂，可用于在非特异性信号和自发荧光中检测低含量靶标蛋白或DNA。FluoSpheres™铕珠含有Eu3+协同复合体，其半衰期时间>600 微秒，大大长于普通荧光素和自发荧光<50 纳秒的半衰期。FluoSpheres™铂发冷光微球中的Pt2+金属螯合物发冷光的半衰期>40 微秒。因此，使用这些微球的时间控制荧光检测可避免来自自发荧光的信号。另外，铕发冷光微球拥有长波长发射（610–650 nm）的特点，这可以与他们的激发峰（340–390 nm）很好地隔开。这些铂发冷光微球最大能够在390 nm处激发且发射峰狭窄，最大在650 nm左右。由于这些非常大的斯托克斯位移，利于选择滤光片组合以有效分离需要的冷光信号。窄发射光谱区间、不同的荧光寿命，让同时使用铕和铂发冷光的微球示踪成为可能。

直径>1 µm的微球可以在1,300 rpm下离心。离心并不是收集较小的微球的有效方法；对于直径<1 µm的微珠，我们建议用错流过滤或500 kDa MWCO截留分子量透析方法洗涤。

我们建议在下列pH范围内使用表面修饰的微球：

注：聚苯乙烯微球能兼容的最高pH为13，但此pH下微球会过度聚集，给操作带来困难。