Search Thermo Fisher Scientific
Having difficulties with your experiment?
We are dedicated to your success. Get back on track. View our expert recommendations for commonly encountered problem scenarios.
View the relevant questions below:
Beginning your experiment?
Visit our
一些可能的原因及补救措施如下:
如果以上均不适用,转化后克隆数低或没有克隆可能是由于DNA插入片段在感受态细胞中不稳定造成的。此种情况下,Stbl2™、Stbl3™、或Stbl4™等大肠杆菌菌种对于有多片段重复的DNA、反转录病毒序列、及高GC含量的DNA扩增的效果优于其它菌种。
这可能是由于插入DNA在TOP10大肠杆菌中不稳定造成的。此种情况下,Stbl2™、Stbl4™等大肠杆菌菌种对于有正向重复的DNA、反转录病毒序列、及高GC含量的DNA扩增的效果优于其它菌种。
其中一个原因是可能与插入片段的毒性有关。这种毒性不能影响在固体培养基上缓慢生长的细胞,但是在快速生长条件(如液体培养基中)下,其毒性更强。建议:
如果插入片段对于宿主细胞有潜在毒性,您可以尝试以下建议:
这些小的克隆很有可能是由于氨苄活性降低产生的。这些克隆是生长在氨苄活性降低的LB培养板上的未转化细胞。为了避免这种情况,你可以尝试:
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.