克隆库支持 – 问题排查

预制克隆是以甘油菌形式于-80度的条件下运输。我们建议您收货后尽快制备一份新鲜的克隆甘油菌。以下是一些额外的建议：

• 确定培养预制克隆时所采用的抗生素是否正确。
  • 通过查看载体图谱以确定克隆所携带的抗性基因
  • 检查预制克隆甘油菌的管盖颜色，并通过下面信息确定该克隆应使用哪种抗生素：
    • 黄色盖子：Zeocin
    • 紫色盖子：氯霉素
    • 红色盖子：羧苄青霉素或氨苄青霉素
    • 绿色盖子：卡那霉素

序列信息有误可能由以下原因造成：

• 数据库信息错误 – GenBank里的cDNA克隆有大约12.5%的错误率，这表明GenBank数据库的序列与您获得的预制克隆序列可能不完全匹配。
• 生产实验室挑克隆有误 - 这些预制克隆储存在96孔板中（BACs一般保存于384孔板中），因此在挑克隆的过程中可能会出现人为失误。如果是这种情况，更换一次可能会有帮助。Ultimate™ ORF预制克隆不是储存在孔板上而是储存在单独的管中，因此出现这种可能的几率很小。
• 板内预制克隆交叉污染 - 与第二条原因相似，这些孔间可能会产生交叉污染。因此，我们始终建议对任何特定培养物都进行多个克隆分析。

注意：除了Ultimate™ORF克隆，其它预制克隆并不能保证与GenBank序列完全匹配，并且由于等位突变及异构突变，可能存在一个或多个碱基的差异。

• 我们过去可能有这个克隆，但是因为它不能正常生长，可能已经从预制克隆库中删除了。
• 如果这是一个最近构建的新克隆，我们可能需要一些时间来储存它。我们只提供6个月到1年前进入到NCBI数据库中的克隆。
• 请查看ATTC( www.attc.org )或Open Biosystems (www.openbiosystems.com)是否有此克隆。