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这条信息出现可能有几个原因。请在您的仪器上检查如下事项:
如果出现这种情况,在“查看标准品”或"查看校准"下查看标准品和样本的原始荧光值。确认样本的荧光值落在标准品的荧光值之间(或稍稍高于最高的标准品)。如果不是,那么样本已经超过了检测的精确范围。Qubit荧光计的屏幕会显示“超出检测范围”。
稀释你的样本,或者使用较小体积的样本,重新检测。此外,如果你使用的是Qubit DNA HS检测试剂盒或Qubit RNA HS检测试剂盒,可以试试Qubit DNA BR检测试剂盒或Qubit RNA BR检测试剂盒,因为它们的灵敏度更低。
如果可能,你可以试试使用较大体积的样本(最多20µL)。此外,如果你使用的是Qubit DNA BR检测试剂盒或Qubit RNA BR检测试剂盒,可以试试Qubit DNA HS检测试剂盒或Qubit RNA HS检测试剂盒,因为它们的灵敏度更高。
最可能的原因是,样本被其它在260nm有吸光值的分子污染了。NanoDrop分光光度计读取这些污染物,但是 Qubit荧光计不会读取这些污染物。要确定样本的准确组成,可以对同一样本进行Qubit dsDNA检测, Qubit RNA HS检测, 和Qubit Protein检测。查看Qubit检测试剂盒产品手册,获取可能影响检测的污染物列表。进一步稀释或纯化样本以降低污染物浓度。将工作溶液和加入其中的样本充分混匀。
请看我们的下列建议:
请参看下列可能性:
从500 µg/mL lambda噬菌体DNA储存液稀释至25, 50, 100, 300, 400, and 500 µg/mL制备2 μL体积的标准品。10 μL体积的标准品来自于2 μL标准品的5倍稀释。20 μL体积的标准品来自于10 μL标准品的2倍稀释。注意使用2 µL最高浓度的lambda DNA标准品时,检测得到的荧光值小于预期。
这里有一些建议:
对于Qubit 1.0仪器,如果它和电脑相联,那么将它和电脑的连接解除,拔掉电源,等待至少10秒,然后重新插上电源。
对于Qubit 2.0仪器,如果可能,关闭电源或拔掉电源,等待至少10秒,然后重新插上电源。在固件升级过程中,请不要将仪器电源拔掉或将USB闪存拔掉。
请从我们的网站下载并安装最新版本的Qubit固件。
对于序列号小于1104004846的Qubit 2.0 荧光计,请根据本页的说明使用Windows操作系统升级您的Qubit 2.0荧光计。如果您没有PC,请通过lifescience-CNTS@thermofisher.com联系技术支持以获取更多指导。
点击下列的合适链接以安装需要的固件升级:
Qubit 2.0 固件升级
Qubit 1.0 固件升级 (参见本页右下角)
分光光度计不能区分完整核酸、小片段、降解样本,以及单核苷酸。试剂盒中的染料仅检测长度超过20mer左右的完整核酸链。试剂盒仅识别完整DNA或RNA,而忽略降解样本。
负的荧光值物理上是不可能的。它是由于软件自动扣除背景信号而造成的假象。这意味着你的荧光计检测到背景信号并将其扣除从而牺牲了真实数据。务必做一个仅有缓冲液的对照并评估信号的类型。你可能需要换用另外一块板。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.