PCR热循环仪支持 – 故障排除

PCR不是完美的。PCR循环的每一个步骤都应该针对不同模板和引物对的特异的组合来优化。对于所有PCR反应来说，最重要的考虑因素是：

• PCR酶——酶的选择可影响PCR产物的得率和特异性。点击获取有关如何为您的应用选择正确的PCR酶的基本知识。
• 引物设计——使用我们的引物定制工具，优化您的引物设计。
• 镁离子浓度——应根据经验，为每种引物和模板组合确定合适的镁浓度；请查看PCR优化网络研讨会，帮助您确定镁浓度。
• 退火温度合适的退火温度取决于引物Tm值的计算；请观看关于精准控温的视频，优化退火温度。

热循环仪的热盖经过设计可保证对微孔板施加合适的压力，以获得高效的PCR反应。使用PCR反应管时，热盖对反应管过大的压力可导致反应管变形。为避免出现这种情况，我们建议使用下述托盘/固定装置：

• 货号4381850，用于Veriti™系统的MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置——这一托盘适用于Veriti™热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统，用于支持和固定MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL）。
• 货号403081，MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置——这一托盘适用于7000系统、2720热循环仪和GeneAmp™ 9700型PCR系统，用于支持和固定MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL）。
• 货号4379983，用于VeriFlex™模块的MicroAmp™ 96孔托盘——这一托盘适用于Veriti™热循环仪、Veriti™快速热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统，用于支持和固定MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL）。

请参考该指南 ，以恢复校准值。

热循环仪的热盖经过设计可保证对微孔板施加合适的压力，以获得高效的PCR反应。使用PCR反应管时，热盖对反应管的压力过大可导致反应管变形。为避免出现这种情况，我们建议使用下述托盘/固定装置：

• 货号4381850，用于Veriti™系统的MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置——这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），和Veriti™热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统兼容。
• 货号403081，MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置——这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于7000系统、2720热循环仪和GeneAmp™ 9700型PCR系统。
• 货号4379983，用于VeriFlex™模块的MicroAmp™ 96孔托盘——这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于Veriti™热循环仪、Veriti™快速热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统。

首先，应确认您使用的是最新版固件。新版固件更正了许多无线和移动应用程序问题。点击这里可查看固件更新。

为创建ProFlex™ PCR仪的无线连接，请遵循下述步骤：

1. 打开ProFlex™仪器电源，在主界面选择“设置”。
2. 在“设置”界面选择“设备设置”。
3. 在“设备设置”界面选择“网络连接”。在“网络连接类型”界面选择“无线连接”。

   将出现“搜索无线网络”界面，无线符号将变为激活状态。选择“取消”退出界面。
   注意：初始设置时，如果在“网络连接类型”界面选择“有线连接”选项，当您选择了“静态IP”有线连接选项，您将需要输入您的IP地址；当您选择了“动态IP”有线连接选项，则IP地址会自动填充。

4. 检测到无线连接后，在“选择网络”界面下将出现可用网络列表。点击您选择的网络名称或点击“加入其他网络”。
5. 在“查找和加入网络”界面，输入网络的名称和安全类型。

   注意： 当您选中“网络名称”输入框时，会出现键盘协助您填写。

6. 在“安全类型”下拉菜单中，点击选择安全类型并在界面中输入相关信息

   注意： 请联系您的IT系统管理员，获取安全类型信息。

   • WEP
   • WPA个人
   • WPA2个人
   • WPA企业
   • WPA2企业

7. 选择“加入”或“取消”，以继续或退出“查找和加入网络”界面。
8. 根据您选择的安全类型，输入正确的密码并选择“加入”。

   若您输入了正确信息，将出现“网络连接完成”界面，可点击“OK”继续。若您输入了错误信息，将出现“网络连接失败”界面，您将需要回到安全类型界面解决问题。点击“OK”继续。

请遵循关于如何将ProFlex™ PCR系统连接到移动设备的指南。

1. 使用无线或有线连接，将您的ProFlex™ PCR仪连接到网络。

   注意：参见第2章的“如何创建ProFlex™系统的无线连接”进行无线连接设置，或参考ProFlex™ PCR系统用户指南来设置ProFlex™ PCR系统的有线连接。

2. 记录仪器序列号和UUID号。
• 在主界面选择“设置”，打开“设置”界面。
• 在“设置”界面，选择“关于仪器”。
• 在“关于仪器”界面，选择“关于仪器”。
• 记录仪器序列号和UUID。
3. 打开Life Technologies™服务器连接。
   • 在主界面选择“设置”，打开“设置”界面。
   • 在“设置”界面，选择“设备设置”。
   • 在“设备设置”界面，选择“远程服务”。
   • 使用“开-关”切换按钮，开启“远程服务”。点击“OK”。

为设置移动设备的移动连接，请遵循以下步骤：

1. 在您的手机中下载“PCR Essentials移动应用程序”。
• a. iPad或iPhone从iTunes音乐商店下载应用程序。
• Android™设备从Google Play Store下载应用程序。
2. 在应用程序中，选择“我的ProFlex”选项。
3. 输入您的Lifetechnologies.com的用户名和密码。

   注意： 如果您尚无Lifetechnologies.com的用户名和密码，可以使用手机应用上的链接进行注册。

4. 输入ProFlex™仪器的序列号，可按您的意愿添加一个仪器别名。
   选择“添加设备”。
5. 当您把仪器保存在您的账户中之后，下次登录时，该仪器将出现在“MYPROFLEXES”界面中。
6. 您也可选择“添加设备”选项并重复步骤4和步骤5，在您的列表中添加更多仪器。

热循环仪的热盖经过设计可保证对微孔板施加合适的压力，以获得高效的PCR反应。使用PCR反应管时，热盖对反应管的压力过大可导致反应管变形。为避免出现这种情况，我们建议使用下述托盘/固定装置：

• 货号4381850，用于Veriti™系统的MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置——这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可兼容Veriti™热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统。
• 货号403081，MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置——这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于7000系统、2720热循环仪和GeneAmp 9700 型 PCR 系统。
• 货号4379983，用于VeriFlex™模块的MicroAmp™ 96孔托盘——这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于Veriti™热循环仪、Veriti™快速热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统。

应确认您使用的是最新版固件，因为新版固件解决了许多锁屏问题。可点击这里下载最新版固件。如果您无法进入主菜单，可尝试关闭仪器，等待1分钟，然后在无任何附加模块的情况下重启仪器。

如果测试失败：

1. 应确认：
   • TVK校准是最新的。
   • 探头无破裂或损坏。
2. 在棉签上滴2-3滴矿物油。用棉签在每个探头的圆锥表面涂上薄薄一层油，改善热量传递。
3. 重复多探头温度验证试剂盒使用指南里“运行96孔仪器测试之前”的步骤。
4. 应确认：
   • 探头牢固固定在合适的检测孔里。
   • 电缆与端口牢固连接。
   • 带状电缆平放在热熔保险器下方并且无折叠。
   • 加热盖关闭并锁住。
5. 重复多探头温度验证试剂盒使用指南里“运行测试”步骤。

请注意，如果检测再次失败，请发送邮件至lifescience-CNTS@thermofisher.com联系Life Technologies。

热循环仪的热盖经过设计可保证对微孔板施加合适的压力，以获得高效的PCR反应。使用PCR反应管时，热盖对反应管的压力过大可导致反应管变形。为避免出现这种情况，我们建议使用下述托盘/固定装置：

• 货号4381850，用于Veriti™系统的MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置——这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于Veriti™热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统。
• 货号403081，MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置——这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于7000系统、2720热循环仪和GeneAmpTM 9700 型 PCR 系统。
• 货号4379983，用于VeriFlex™模块的MicroAmp™ 96孔托盘—这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于Veriti™热循环仪、Veriti™快速热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统。

点击这里，可查看GeneAmp 9700型PCR系统的丢失校准文件替换指南。

热循环仪的热盖经过设计可保证对微孔板施加合适的压力，以获得高效的PCR反应。使用PCR反应管时，热盖对反应管的压力过大可导致反应管变形。为避免出现这种情况，我们建议使用下述托盘/固定装置：

• 货号4381850，用于Veriti™系统的MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置—这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于Veriti™热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统。
• 货号403081，MicroAmp™ 96孔托盘/固定装置—这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于7000系统、2720热循环仪和GeneAmp™ PCR9700型系统。
• 货号4379983，用于VeriFlex™模块的MicroAmp™ 96孔托盘—这一托盘适用于MicroAmp联管（或MicroAmp无盖反应管，0.2 mL），可用于Veriti™热循环仪、Veriti™快速热循环仪、SimpliAmp™热循环仪和Proflex™ PCR系统。