蛋白质凝胶1D电泳支持 - 入门

我们的预制蛋白质凝胶不含SDS，但在使用合适的变性电泳缓冲液时，可在变性条件下电泳。请查看以下表格，确定各种凝胶对应的缓冲液：

注意：NuPAGE™ Bis-Tris凝胶、Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶和Thermo Scientific™ Precise™ Tris-HEPES凝胶不可在非变性条件下电泳；这些凝胶只能用于变性条件下。

对于不同上样孔规格或不同凝胶，每个泳道的推荐样品上样体积和蛋白质上样量如下所示：

• Novex™ Tris-甘氨酸和Novex™Tricine小型凝胶：Novex™预制胶电泳指南，第8页
• NuPAGE™ Tris-Acetate和NuPAGE™ Bis-Tris小型凝胶：NuPAGE™技术指南，第10页
• Bolt™ Bis-Tris Plus小型凝胶：点击此处查看
• Thermo Scientific™ Precise Tris-HEPES凝胶：Precise Tris-HEPES凝胶使用手册，第1页
• 中型凝胶（Novex™ Tris-甘氨酸、NuPAGE™ Bis-Tris和NuPAGE™ Tris-Acetate）：Novex™中型凝胶系统使用手册，第4页
• Thermo Scientific™ Precise Tris-甘氨酸凝胶：Precise Tris-甘氨酸凝胶使用手册，第1页

我们的Novex™预制蛋白质凝胶包含长度约为8-9 mm的浓缩胶（正好到达凝胶塑料卡第一嵴线的上方）。使用的生产方法使浓缩胶和分离胶之间形成了一个肉眼无法看到的界面。

在包括Bolt™ Bis-TrisPlus凝胶在内的大部分凝胶中，浓缩胶为4%。NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶含3.2%浓缩胶。

请参见以下信息：

我们不推荐长期保存还原型蛋白质样品，即使是冷冻保存。因为，样品在保存期间可能发生再氧化，使结果不一致。

我们不推荐在同一块凝胶上同时跑还原型和非还原型蛋白质样品，特别是在相邻的泳道中。因为，还原剂可能对距离很近的非还原型样品产生后遗效应。

我们推荐使用NativeMark™非预染蛋白质标准品，货号LC0725。

不需要，2块胶会在相同的恒定电压下电泳，但电流会加倍。

我们所有的Novex™蛋白质凝胶都具有小型规格。某些化学成分的凝胶（NuPAGE™ Bis-Tris、NuPAGE™ Tris-Acetate和Novex™ Tris-甘氨酸凝胶）还具有较宽的中型规格。应注意，Bolt™ Bis-Tris凝胶无中型规格。我们的Thermo Scientific™ Precise™预制胶只有小型规格。

我们所有的Novex™预制蛋白质凝胶（Novex™凝胶、NuPAGE™凝胶和Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶）都具有小型规格（凝胶塑料卡：10 cm x 10 cm；凝胶：8 cm x 8 cm）。请注意，老款Bolt™ Bis-Tris Plus小型凝胶（2014年12月31日起停产）的尺寸略有不同（凝胶塑料卡：10 cm x 10.5 cm；凝胶：8 cm x 8.3 cm）。

我们的NuPAGE™ Bis-Tris、NuPAGE™ Tris-Acetate和Novex™ Tris-甘氨酸凝胶也具有较宽的中型规格。注意，Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶无中型规格。

我们的Thermo Scientific™ Precise™预制胶只有小型规格。

不同化学成分凝胶小型和中型规格的尺寸见下表：

*我们的老款Blot™ Bis-Tris Plus凝胶已于2014年12月31起停产。

我们的传统Bolt™ Bis-Tris Plus小型凝胶（货号BGxxxxxBOX，2014年12月31日起停产）只能使用Bolt™小型凝胶电泳槽（2014年12月31日起停产，将在库存售尽后停止供应）。

我们的新型Bolt™Bis-Tris Plus小型凝胶（货号NWxxxxxBOX）以及Novex™小型凝胶和NuPAGE™小型凝胶，可使用小型凝胶电泳槽或XCellSureLock™ Mini-Cell。若这些凝胶使用Bolt™小型凝胶电泳槽（2014年12月31日起停产）电泳，则有必要升级电泳槽，可将黑色10.5 cm凝胶塑料卡凸轮型夹更换为灰色10 cm凝胶塑料卡凸轮型夹（货号A26732）。凝胶凸轮型夹更换说明见使用手册第20页或视频。

我们的中型凝胶可使用XCell4 SureLock™ Midi-Cell。

Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶无中型规格。

中型凝胶比小型凝胶更宽，因此，每块凝胶的上样孔更多，可容纳更多的样品。在小型凝胶上开展的实验可轻松放大到相同化学成分的中型凝胶上。请在下表中查看不同化学成分Novex™小型和中型凝胶的尺寸：

*我们的老款Blot™ Bis-Tris Plus凝胶已于2014年12月31起停产。

我们不推荐回收凝胶塑料卡，因为凝胶塑料卡的化学涂层在融化时会产生有毒烟雾，并可能导致污染。

凝胶塑料卡的材料是苯乙烯共聚物。

所有Novex™蛋白质凝胶都含有蔗糖。蔗糖是一种密度调节剂，可促进凝胶的灌制。在Novex™凝胶电泳上的蛋白质样品会被大量蔗糖污染。因此，不推荐将Novex™凝胶用于此应用。

所有去污剂，甚至是细胞提取物中的磷脂，都会与SDS形成混合胶团并向下迁移到凝胶中。它们还会干扰SDS与蛋白质的结合平衡。大部分非离子洗涤剂，包括NP-40，是SDS-PAGE最严重的干扰物质。使这种不良影响最小化的经验方法是，将SDS与脂质或其他去污剂的比例保持在10:1或更大。

中型凝胶可使用以下方法转印：

• iBlot™干转系统，结合使用Transfer Stacks转印膜组
• Novex™半干转仪，最多同时转印2块中型凝胶
• Thermo Scientific™ Pierce™ Power Blotter，最多同时转印2块中型凝胶
• Thermo Scientific™ Pierce™ G2Fast Blotter（将于当前库存售尽后停止供应）

使用Bolt™小型凝胶电泳槽跑10 cm凝胶塑料卡的小型凝胶（不将电泳槽的10.5 cm凝胶凸轮型夹更换为10 cm凝胶凸轮型夹），请参见使用手册第22页的使用说明。

注意：为得到最佳结果，使用Bolt™小型凝胶电泳槽跑10 cm凝胶塑料卡的小型凝胶时，应将Bolt™小型凝胶电泳槽上的黑色10.5 cm凝胶凸轮型夹更换为灰色10 cm凝胶凸轮型夹（货号A26732）。凝胶凸轮型夹更换说明见使用手册第20页或视频。点击此处，可获取更多资源。

TCEP, Tris Carboxy Ethyl Phosphene is an alternative sulfhydryl reducing agent for protein samples. It is an extremely potent and effective reducing agent for particularly 'difficult' proteins. It is compatible with the Tris-Glycine gels and NuPAGE™ gels. It should be added to the sample buffer for these systems. 20mM final (maximum) concentration is sufficient for samples. You may add alkylating agents (e.g. Iodine, to prevent re-forming of S-S bonds) but it is not necessary (50mM Iodoacetic Acid). Do not heat because this will hydrolyze much of your sample. Instead let the sample sit for several minutes at RT and then load.

No, CTAB will not work with any of our gels except for the NuPAGE™ Tris-Acetate gels. To use CTAB, you would need to use a running buffer of 50mM acetic acid and 50mM beta-alanine in equal concentrations. You would also need to switch the electrodes. Since CTAB is a cationic detergent, this would establish conditions for running a basic protein towards the anode (into the gel).

There shouldn't be any negative effects unless the percentage of acetonitrile reaches 40 or 50% of the sample size. At this point, there is the possibility of the acetonitrile affecting the binding of SDS to the protein, which in turns affects the migration of the protein.

Phenol red was originally included in the Novex™ sample buffers as a true ion-front tracking dye for the very small pore-sized gels, especially Tricine gels. Phenol red is smaller than Serva Blue G250. In high percentage gels, molecules in this size range are resolved on the basis of size, such that phenol red runs with the ion front while G250 can run as much as 2 cm behind the ion front. Conversely, in larger-pored gels, there is no size-based resolution in the size range of these dyes, and the dyes resolve on the basis of charge density, with G250 running at the ion front and phenol red migrating more slowly. Phenol red is not particularly useful in the NuPAGE™ system, even though it is included in the NuPAGE™ sample buffer for the sake of consistency, especially with the Novex™ standards, which all contain phenol red.

Using constant voltage allows the current and power to decrease during the run, providing a safety margin in case of a break in the system. Having lower power is a safety benefit and will also decrease the chances of experiencing an overheating of the gel. Further, the constant voltage setting does not need adjustment to account for differences in number or thickness of gels being run.

If you are running the gels at constant voltage, you do not need to increase the voltage regardless of the number of gels. However, the resulting current and wattage observed will multiply linearly with the number of gels. Keep in mind that the expected total current for your gels should not exceed the current limit of the power supply, or else the current will plateau and the run will slow down. (For example: Recommended constant voltage for running a NuPAGE™ Bis-Tris gel with MES Buffer is 200 V, with a starting current of 110-125 mA/gel and end current of 70-80 mA/gel. If the power supply has a current limit of 500 mA, the maximum number of NuPAGE™ Bis-Tris gels that can be run at one time with full power is 500 mA/125 mA = 4 gels. Any additional gels will decrease the current per gel and increase the run time.

If you are running the gel at constant voltage, you do not need to increase the voltage regardless of the thickness of the gel.

This is not really recommended, but it is always possible to increase run time by lowering the voltage of the run. In general, the relationships are linear – i.e. decreasing voltage by half will double the run time.

We do not recommend using gels past their expiration date because over time, the polyacrylamide hydrolyzes to acrylic acid and ammonia and this will affect the resolution of the proteins. Breakdown of polyacrylamide matrix is identified by:

- Ghost bands and doublets, seen first in the high molecular weight proteins

- Smiling of dye front across the gel, with bands in outer lanes becoming very slanted - proteins run slower there due to change in pH and pore size over time.

Having everything at room temperature means not having to thaw reagents, thus saving time in gel casting.

Yes, SureCast Glass Plates can be reused. They are up to 22 times more durable than Bio-Rad glass plates.

The SureCast Handcast System and reagents are available both as a package or as standalones.

尽管它们都是Bis-Tris凝胶，但化学成分却相当不同。Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶专为优化蛋白质免疫印迹性能而设计，可带来良好分离、清晰可辨的平直条带，其楔形孔设计还增加了上样量。

Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶具有独特的丙烯酰胺/双丙烯酰胺配方，该配方基于NuPAGE™ Bis-Tris凝胶的化学成分但又与之不同。

While they are both Bis-Tris based gels, the chemistries are quite different. Bolt™ Bis-Tris Plus gels are designed for optimized western blot performance. They deliver well-resolved, sharp, straight bands with higher band volume enabled by their wedge well design.

我们推荐将其保存于4–25°C。不可冷冻。

Bolt™ Bis-Tris Plus可在4-25°C下保存16个月。

Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶含4%浓缩胶。

我们的老款Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶（货号BGxxxxxBOX，2014年12月31日起停产）电泳不适合使用XCell SureLock™ Mini-Cell，而应使用Bolt™小型凝胶电泳槽（2014年12月31日起停产）。我们的新型Bolt™ Bis-Tris Plus小型凝胶（货号NWxxxxxBOX）可使用XCell SureLock™ Mini-Cell（或小型凝胶电泳槽，货号A25977）。若这些凝胶使用Bolt™小型凝胶电泳槽（2014年12月31日起停产）电泳，则有必要升级 电泳槽，可将黑色10.5 cm凝胶凸轮型夹更换为灰色10 cm凝胶凸轮型夹（货号A26732）。凸轮型夹更换说明见使用手册第20页或视频。

请注意，Bolt™小型凝胶电泳槽已于2014年12月31日起停产，库存售尽后将不再供应。小型凝胶电泳槽是Bolt™小型凝胶电泳槽的改良版本，其设计有所改进：

• 通用性——兼容Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶、NuPAGE™小型凝胶和Novex™小型凝胶
• 方便上样——具有上样孔朝前的构造
• 节省电泳缓冲液——具有2个独立的电泳槽，分别加入缓冲液至标记填充线即可
• 同时观察2块凝胶——具有改进的并行式电泳槽结构
• 简化对预染标记物的观察——具有新型白色电泳槽托架

请观看视频，了解小型凝胶电泳槽的操作方法。

Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶的厚度为1 mm。

新型Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶（货号）尺寸如下：

• 凝胶塑料卡：10 cm x 10 cm
• 凝胶：8 cm x 8 cm

老款Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶（货号BGxxxxxBOX，2014年12月31日期停产）的尺寸略有不同：

• 凝胶塑料卡：10 cm x 10.5 cm
• 凝胶：8 cm x 8.3 cm

主要区别在于凝胶尺寸不同。新型Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶（货号NWxxxxxBOX）尺寸如下：

• 凝胶塑料卡：10 cm x 10 cm
• 凝胶：8 cm x 8 cm

新型Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶电泳可使用新型小型凝胶电泳槽（货号A25977）或XCell SureLock™ Mini-Cell。若这些凝胶使用Bolt™小型凝胶电泳槽（2014年12月31日起停产），则有必要升级 电泳槽，可将黑色10.5 cm凝胶凸轮型夹更换为灰色10 cm凝胶凸轮型夹（货号A26732）。凸轮夹更换说明见使用手册第20页或视频。

老款Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶（货号BGxxxxxBOX，2014年12月31日起停产）的尺寸略有不同：

• 凝胶塑料卡：10 cm x 10.5 cm
• 凝胶：8 cm x 8.3 cm

老款Bolt™ Bis-Tris Plus小型凝胶电泳只能使用Bolt™小型凝胶电泳槽（2014年12月31日起停产，将在库存售尽后停止供应）。

在Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶上跑还原型蛋白质样品时，没有必要使用抗氧化剂，但使用抗氧化剂也不会造成损害。

No. We only offer one size of 10 gels per box.

Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶无中型规格。

SeeBlue™预染标准品、SeeBlue™ Plus 2预染标准品和Novex™ Sharp预染标准品可与与Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶兼容。它们的迁移与在NuPAGE™凝胶中（使用相应的缓冲液）相同。

为升级Bolt™小型凝胶电泳槽以用于新型Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶的电泳，应将黑色10.5 cm凝胶凸轮型夹更换为灰色10 cm凝胶凸轮型夹（货号A26732）。凸轮夹更换说明见使用手册第20页或视频。点击此处，可获取更多资源。

尽管NuPAGE™ Bis-Tris凝胶不含SDS，但也只能用于变性凝胶电泳条件下，因为NuPAGE™ MOPS SDS和NuPAGE™ MES SDS电泳缓冲液都含有SDS。

尽管NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶不含SDS，但在与NuPAGE™ Tris-Acetate SDS电泳缓冲液和NuPAGE™ LDS样品缓冲液配合使用时，可用于变性凝胶电泳。与Novex™ Tris-甘氨酸非变性电泳缓冲液和Novex™ Tris-甘氨酸非变性样品缓冲液配合使用时，可用于非变性凝胶电泳。

The composition of the NuPAGE™ Antioxidant is proprietary.

NuPAGE™抗氧化剂低温保存时（4℃），有沉淀倾向。若温和加热，可重新溶解。

我们推荐将其保存在4-25℃。避免冻存。

我们推荐将其保存在4-25℃。避免冻存。

NuPAGE™样品还原剂和NuPAGE™抗氧化剂应保存在4℃。

NuPAGE™缓冲液应保存在4–25℃。

NuPAGE™样品还原剂（10X）含有0.5M DTT（二硫苏糖醇）和独特的稳定剂。

NuPAGE™ 4X样品缓冲液的pH比普通Laemmli样品缓冲液高很多，它们的pH分别为8.5和6.8。在pH 8.5时，加入4X缓冲液所需浓度的SDS，会产生沉淀。此外，LDS（十二烷磺酸锂）更稳定，用于变性同样有效。

可以煮沸蛋白质样品，因为煮沸不会损害缓冲液中的任何成分。我们之所以推荐将样品在70℃加热10分钟，而非煮沸样品，是因为较低的温度可减少蛋白质水解。

我们推荐将NuPAGE™抗氧化剂加到上样缓冲区的电泳缓冲液里，从而维持样品在电泳过程中的还原状态和条带的最大清晰度。NuPAGE™凝胶处于中性pH时，还原剂会停留在孔的顶部，不会完全迁移通过凝胶。抗氧化剂随蛋白质完全迁移并在电泳过程中维持蛋白质的还原状态，可弥补还原剂的不足。我们推荐在200mL电泳缓冲液中加入0.5mL抗氧化剂（400X稀释），并将其加到上样缓冲区中。

注意：抗氧化剂本身不足以完全还原蛋白质。为达到完全还原，必须在上样前使用还原剂处理样品。

NuPAGE™抗氧化剂低温保存时（4℃），有可能沉淀。若温和加热，可重新溶解。

NuPAGE™凝胶比Novex™ Tris-甘氨酸凝胶具有以下优势：

• 稳定性更高，保质期更长：
  • NuPAGE™ Bis-Tris凝胶和NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶的操作pH（NuPAGE™ Bis-Tris凝胶为pH 7，NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶为pH 8.1）比Novex™ Tris-甘氨酸凝胶（pH 9.5）更低。在碱性pH下，聚丙烯酰胺水解为聚丙烯酸和氨，而中性pH可减少这种水解的发生。因此，NuPAGE™凝胶比Novex™ Tris-甘氨酸凝胶的稳定性更高，保质期更长（NuPAGE™ Bis-Tris凝胶可在4-25℃保存12个月，NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶可在4℃保存8个月，而Tris-甘氨酸凝胶在4℃只能保存4-8周）。
• 蛋白质分辨率更高，因为：
  • 意外的化学修饰减少：在碱性pH（8.5-9.0）下，游离的丙烯酰胺可使蛋白质烷基化。其靶点是位于N端和赖氨酸上的氨基和半胱氨酸上的巯基。当pH低于8时，不会发生这种修饰。因此，与Tris-甘氨酸凝胶电泳相比，蛋白质在NuPAGE™凝胶上电泳将更少发生这类意外的化学修饰。
  • 蛋白质水解减少：加热Tris-甘氨酸样品缓冲液（pH 6.8），可使pH大幅降低，导致蛋白质的Asp-Pro断裂。高温和长时间加热/煮沸会增加这种断裂的发生率，导致出现多条较弱的带。在100℃时，pH降低至4.3。与其不同，NuPAGE™ LDS样品缓冲液（pH 8.5）加热至70℃时，pH降低至8.1，可避免发生这种断裂。
• 电泳时间更短（NuPAGE™ Bis-Tris凝胶仅需35–50分钟，NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶仅需1小时，而Tris甘氨酸凝胶则需90分钟）

NuPAGE™ MOPS和MES SDS电泳缓冲液可兼容Edman蛋白质测序。可直接对NuPAGE™凝胶上的蛋白质测序。

不能。NuPAGE™抗氧化剂在其他凝胶系统的高pH环境下无效。

尽管它们都是Bis-Tris凝胶，但化学成分却相当不同。Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶专为优化蛋白质免疫印迹性能而设计。另一个关键区别在于，Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶的楔形孔设计使上样量增加。

我们不推荐一起使用NuPAGE™ Bis-Tris凝胶和无SDS的NuPAGE™ MOPS或MES上样缓冲液在非变性条件下电泳。这种缓冲液系统会产生过多热量，导致条带分辨率较差。此外，在中性pH环境下，不带电荷的目标蛋白可能不会很好地迁移

可以，NuPAGE™转膜缓冲液可防止氨基酸侧链发生修饰，可兼容通过Edma降解进行的蛋白质N端测序。

NuPAGE™凝胶可兼容所有标准考马斯染色步骤。可通过加热来加速实验，因为加热可帮助“固定”蛋白质，特别是较小的肽。NuPAGE™凝胶也可兼容大部分银染操作。还能兼容铜染或锌染，以及荧光染色。

是的，我们推荐在NuPAGE™转膜缓冲液中加入NuPAGE™抗氧化剂，从而改善还原型蛋白质的转印结果，以便在电泳过程中维持蛋白质的还原状态。

在1块胶和2块胶转膜时，建议在NuPAGE™转膜缓冲液中分别加入10%和20%甲醇。

NativePAGE™样品缓冲液和电泳缓冲液专门用于NativePAGE™ Bis-Tris凝胶。我们不推荐将这些缓冲液与任何其他凝胶（包括NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶）一起用于非变性应用。对于其他凝胶，我们推荐使用Novex™ Tris-甘氨酸非变性样品和电泳缓冲液。

我们不推荐将NativePAGE™样品和电泳缓冲液与NuPAGE™ Bis-Tris凝胶一起使用。NuPAGE™ Novex Bis-Tris凝胶经优化可用于变性条件，具有极其低的操作pH，大部分蛋白难以在非变性条件下在该凝胶中迁移。

尽管我们推荐使用NuPAGE™样品还原剂以加强稳定性，但新鲜的β-巯基乙醇可以代替NuPAGE™样品还原剂并获得相同的结果。通常，终浓度为2–5%的β-巯基乙醇足以还原样品。

Copper or zinc staining is a rapid, sensitive method for detection of protein bands . ~10ng reduced BSA on NuPAGE™ Bis-Tris gels can be detected with both the copper and zinc stain.

Copper Stain: Staining solution - 0.3M CuCl2

After electrophoresis, remove the gel from the cassette and equilibrate the gel in 100 ml of 1X running buffer* for 15 minutes. Immerse the gel in 100 ml of 0.3M CuCl2 solution for about 5 minutes (the protein band will appear as a negative stain with a blue background).

Zinc stain: Staining solution - 0.2 M Imidazole and 10 mM ZnCl2

After electrophoresis, remove the gel from the cassette and equilibrate the gel in 100 ml of 1X running buffer* for 15 minutes. Place the gel in 100 ml of 0.2M Imidazole solution for 10 minutes. Next immerse the gel in 100 ml of 10 mM ZnCl2 solution for about 5 minutes (the protein will appear as a transparent band with a white background).

*The 1X running buffer can be the buffer from the electrophoresis tank after run (MES, MOPS). However, for better contrast of the band, the 1X Tris-Glycine SDS running buffer is recommended.

We do not recommend using Carbonate or CAPS transfer buffers to transfer NuPAGE™ gels as the transfer efficiency will be badly compromised. Further, the high pH environment (pH 9) of these buffers will make the NuPAGE™ Antioxidant non-functional.

Novex™ Tris-甘氨酸凝胶的化学成分是基于Laemmli系统，其预制规格具有最少的修饰和最佳的性能。这些凝胶不含SDS，可通过使用合适的电泳缓冲液精确分离非变性和变性蛋白。Novex™ Tris-甘氨酸凝胶可将大量蛋白质分离为分辨率良好的条带，并具有可重复性。

Tris-甘氨酸凝胶的操作pH为9.5；NuPAGE™ Bis-Tris凝胶的操作pH为7，NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶的操作pH为8.1。

NuPAGE™凝胶比Novex™ Tris-甘氨酸凝胶具有以下优势：

• 稳定性更高，保质期更长：
  • NuPAGE™ Bis-Tris凝胶和NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶的操作pH（NuPAGE™ Bis-Tris凝胶为pH 7，NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶为pH 8.1）比Novex™ Tris-甘氨酸凝胶（pH 9.5）更低。在碱性pH下，聚丙烯酰胺水解为聚丙烯酸和氨，而中性pH可减少这种水解的发生。因此，NuPAGE™凝胶比Novex™ Tris-甘氨酸凝胶的稳定性更高，保质期更长（NuPAGE™ Bis-Tris凝胶可在4-25℃保存12个月，NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶可在4℃保存8个月，而Tris-甘氨酸凝胶在4℃只能保存4-8周）。
• 蛋白质分辨率更高，因为：
  • 意外的化学修饰减少：在碱性pH（8.5-9.0）下，游离的丙烯酰胺可使蛋白质烷基化。其靶点是位于N端和赖氨酸上的氨基和半胱氨酸上的巯基。当pH低于8时，不会发生这种修饰。因此，与Tris-甘氨酸凝胶电泳相比，蛋白质在NuPAGE™凝胶上电泳将更少发生这类意外的化学修饰。
  • 蛋白质水解减少：加热Tris-甘氨酸样品缓冲液（pH 6.8），可使pH大幅降低，导致蛋白质的Asp-Pro断裂。高温和长时间加热/煮沸会增加这种断裂的发生率，导致出现强度降低的多肽条带。在100℃时，pH降低至4.3。与其不同，NuPAGE™ LDS样品缓冲液（pH 8.5）加热至70℃时，pH降低至8.1，可避免发生这种断裂。
• 电泳时间更短（NuPAGE™ Bis-Tris凝胶仅需35–50分钟，NuPAGE™ Tris-Acetate凝胶仅需1小时，而Tris甘氨酸凝胶则需90分钟）

我们的Tris-甘氨酸凝胶不含SDS。使用Novex™ Tris-甘氨酸非变性样品缓冲液和Novex™ Tris-甘氨酸非变性电泳缓冲液时，Tris-甘氨酸凝胶可在非变性条件下电泳。使用Novex™ Tris-甘氨酸SDS样品缓冲液和Novex™ Tris-甘氨酸SDS电泳缓冲液时，Tris-甘氨酸凝胶可在变性条件下电泳。

NativePAGE™样品缓冲液和电泳缓冲液专门用于NativePAGE™ Bis-Tris凝胶。我们不推荐将这些缓冲液与任何其他凝胶（包括NuPAGE™ Tris-甘氨酸凝胶）一起用于非变性应用。对于其他凝胶，我们推荐使用Novex™ Tris-甘氨酸非变性样品和电泳缓冲液。

Tris-甘氨酸凝胶可兼容所有标准考马斯染色步骤，也可兼容大部分银染操作。

我们不推荐将NativePAGE™样品和电泳缓冲液与NuPAGE™ Bis-Tris凝胶一起使用。NuPAGE™ Novex Bis-Tris凝胶经优化可用于变性条件，具有极其低的操作pH，大部分凝胶难以在非变性条件下在该凝胶中迁移。

Tris-甘氨酸凝胶可在CAPS缓冲液（10mM CAPS（3-环己胺，1-丙磺酸），10%甲醇，pH 11.0）中转印。

Yes, the new Novex WedgeWell gels can be run in the XCell SureLock Mini-Cell.

We use what we call ‘mirror printing’, the same way we do for Bolt™ gels. This means that when the gel is loaded in the Mini Gel Tank, the text will face in the readable direction (left to right).

We were able to optimize shelf life through a proprietary gel formulation change. Unfortunately, we are unable to provide specific details on the chemical changes.

The Novex WedgeWell gels can use standard Tris-Glycine sample and running buffers. For running under native conditions, we recommend using sample and running buffers that do not contain SDS (such as our Native Tris-Glycine premade buffers).

No. Novex WedgeWell gels must be stored at 4 degrees C.

Precise凝胶含有4%浓缩胶。

Precise Tris-甘氨酸凝胶具有两种不同的小型凝胶规格。两种规格凝胶和凝胶塑料卡的尺寸如下：

• 凝胶：6.8 cm x 8 cm x 1 mm
  凝胶塑料卡：8 cm x 10 cm x 5 mm

• 凝胶：8.8 cm x 8 cm x 1 mm
  凝胶塑料卡：10 cm x 10 cm x 7 mm

Precise Tris-甘氨酸凝胶可在4℃下稳定保存1年

可以，10 cm x 10 cm x 7 mm凝胶塑料卡的Precise Tris-甘氨酸凝胶可兼容XCell SureLock Mini Cell或小型凝胶电泳槽。

Precise Tris-HEPES凝胶和凝胶塑料卡的尺寸如下：

• 凝胶：5.8 cm x 8 cm x 1 mm
• 凝胶塑料卡：8.5 cm x 10 cm x 4.5 mm

Precise Tris-HEPES凝胶可在4℃下稳定保存1年

Precise凝胶的pH为7。

不含，Precise凝胶不含SDS。SDS用于变性蛋白质，将蛋白质包围在一致的净负电荷中。蛋白质的电荷可忽略不计，其形状不会产生任何作用，从而电泳完全取决于蛋白质大小。Precise凝胶电泳应使用SDS。样品和电泳缓冲液中的SDS主要使蛋白质变性，并在电泳过程中维持其变性状态。

Tris-HEPES Precise凝胶不可用于非变性条件。使用这些凝胶时，样品缓冲液和Tris-HEPES缓冲液必须含有SDS。Tris-甘氨酸Precise凝胶在非变性和变性条件下均能使用。

在使用转接板的情况下，Precise Tris-HEPES凝胶可兼容XCell SureLock Mini Cell或小型凝胶电泳槽。

注意：使用XCell SureLock Mini Cell或小型凝胶电泳槽时，1块凝胶需要2个转接板，2块凝胶需要1个转接板。

Precise Tris-HEPES凝胶专为与Tris-HEPES SDS电泳缓冲液一起使用而设计，以获得最佳的速度和分辨率。我们不推荐将其与Tris-甘氨酸SDS电泳缓冲液仪器使用，否则会产生较差的迁移和条带分辨率。

可以。Precise凝胶可风干。如果破裂会带来问题，可使用商业化干燥液进行凝胶干燥。推荐的干燥液为含4%乙二醇的35%乙醇。

所有标准染色溶液都可用于Precise凝胶。但是，甲醇浓度低于30%时，才能获得最佳结果。考马斯染色的凝胶可使用6%醋酸进行脱色。

不能。Precise凝胶只能使用其适用的缓冲液；Tris-HEPES 凝胶使用Tris-HEPES-SDS电泳缓冲液，Tris-甘氨酸凝胶使用Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液。在该缓冲液系统中，凝胶可电泳45分钟。使用其他缓冲液将有损性能。

含有。凝胶保存缓冲液确实含有叠氮化钠，可被洗掉。