蛋白质染色支持 - 入门

通过密度测定法进行蛋白质定量时，您可选择使用SimplyBlue™ SafeStain。但是，胶体蓝染色试剂盒（货号LC6025）最适用于该应用。

对于手灌凝胶，可在配方中加入Rhinohide™聚丙烯酰胺凝胶增强剂（货号R33400和R33410）。降低摇床速度；只需轻轻摇动。更换溶液时，缓慢倒出溶液，加入溶液时尽量避免碰到凝胶。

SimplyBlue™ SafeStain可在室温下稳定保存6个月。

SimplyBlue™ SafeStain是一种即用型专有染色溶液，含有Coomassie™ G250。该产品不含乙酸或甲醇。

使用常规染色方案时，脱色后可检测到7 ng的BSA。使用微波染色方案时，可检测到5 ng的BSA。

SimplyBlue™ SafeStain可用于干燥PVDF膜的染色。用于硝化纤维素膜和湿润PVDF膜的染色，会产生高背景，因此不推荐使用。

使用SimplyBlue™ SafeStain染色的蛋白质，可以用于质谱（MS）分析。

Bolt™ Bis-Tris Plus凝胶含有4%浓缩胶。

SimplyBlue™ SafeStain是经过专业设计的安全、无害染料。它不含有甲醇或乙酸，也无需使用必须作为有害废物进行处理的甲醇或乙酸。

Coomassie™ G250比Coomassie™ R250更灵敏，而Coomassie™ R250比Coomassie™ G250的染色速度更快。

我们建议通过电洗脱或乙醇处理使蛋白质与Coomassie™ G250染料分离，避免Coomassie™ G250产生的不正当免疫反应。如果抗体是用于膜的免疫检测，那么，皮下注射膜结合的条带，会产生特别适用于膜检测的抗体。

可以使用经SimplyBlue™ SafeStain染色的蛋白质条带进行免疫。凝胶的染色和脱色过程应除去SDS（如果使用了SDS PAGE凝胶），从而避免SDS与弗氏佐剂发生相互作用。

我们建议将凝胶放在染料中过夜。根据使用手册的建议，无需额外加入盐溶液，因为无需担心缓冲液盐和SDS，而且这样做会抑制多度染色。

您可以使用SimplyBlue™ SafeStain对PVDF膜进行染色，以检测待测序的蛋白质。在检测后和测序前，使用20–30%乙醇洗涤膜，除去残留的染料。

Imperial蛋白质染料可在室温下稳定保存1年。

Imperial™蛋白质染料含有Coomassie R-250。其他成分拥有专利权。

使用增强型方案时，Imperial™蛋白质染料可在3小时内检测到蛋白质含量低至3 ng的条带。

PageBlue™蛋白质染色溶液可在室温下稳定保存1年。

PageBlue™蛋白质染色溶液含有Coomassie G-250，可用于对聚丙烯酰胺凝胶和PVDF膜上的蛋白质进行染色。其他成分拥有专利权。

PageBlue™蛋白质染色溶液最多可重复利用3次，检测灵敏度不会明显降低。

该产品对蛋白质检测的动态范围为5–500 ng，灵敏度约比传统Coomassie R-250染料强10倍。

使用25%异丙醇/10%乙酸溶液或12%三氯乙酸（TCA）固定凝胶蛋白质15分钟，可提高染色灵敏度。

染色步骤中的第一个洗涤步骤是用于去除凝胶中的十二烷基硫酸钠（SDS），因为SDS可干扰染色。非变性凝胶不含SDS，因此，用于非变性PAGE时可省略该步骤。

由于小分子量蛋白质（< 10 kDa）在染色期间容易从凝胶中浸出，因此，在使用PageBlue™蛋白质染色溶液对凝胶染色前，需要使用戊二醛固定。其他常见的蛋白质固定剂（如乙酸、异丙醇、乙醇、三氯乙酸等）在此不适用，因为会将蛋白质在染色期间从凝胶中洗脱。请参见使用手册第3页的固定步骤。

胶体蓝染色试剂盒可在室温下稳定保存1年。

胶体蓝染色试剂盒的灵敏度比传统Coomassie™ Blue染色技术强5倍。使用胶体蓝染色试剂盒，可在1小时内检测到4–20% 1.0 mm Novex™ Tris-甘氨酸凝胶上<10 ng的BSA。非还原性样品的染色强度略高于还原性样品。在染色溶液中浸泡1小时后，可看见条带。

经胶体蓝染料染色的蛋白质，可用于质谱（MS）分析。

不能，我们不建议使用胶体蓝（G-250）染色试剂盒进行膜染色，因为这会产生非常高的背景。更好的方案有：

1. Coomassie™（非胶体）染色：使用溶于50%甲醇的0.1% Coomassie™ Blue R-250染色5分钟，然后用50%甲醇和10%乙酸洗涤多次进行脱色。用水洗涤多次、风干并在-20℃下保存，最长可保存12个月。灵敏度约为50-100 ng。
2. SimplyBlue™ SafeStain。SimplyBlue™ SafeStain使用手册中有关于PVDF染色的实验方案，但不推荐将其用于硝化纤维素膜，因为会产生高背景。
3. 酰胺黑：与Coomassie™相同，但灵敏度更低。
4. 丽春红S：与Coomassie™相同，但灵敏度更低。
5. 紫外透照法：转印后，将膜放在滤纸上，使其在室温下干燥10分钟。在20%甲醇中润湿，在湿润状态下于白光前观察印迹；条带会比膜看起来更透明。如果条带随膜变干而消失，则再次润湿膜。
6. Novex可逆性膜蛋白质染料（货号IB7710）：可对硝化纤维素和PVDF膜上的蛋白质进行完整的可逆性染色。该产品的灵敏度高于丽春红S（在10分钟内检测到蓝色条带上<10 ng的BSA），可在5分钟内实现可逆性染色。免疫印迹检测不受染色和清除染料过程的影响，在某些情况下可达到更高的灵敏度。

有区别，该产品对非还原型蛋白质的染色更强。

胶体蓝染色试剂盒使用Coomassie™ G-250，而标准Coomassie™染色方案使用Coomassie™ R-250。Coomassie™ G-250为蓝绿色，而Coomassie™ R-250接近于深蓝色。两种染料的区别在于染料本身的色调，而非染色强度。

不能，胶体蓝染色试剂盒的化学成分只能用于蛋白质和多肽染色。SilverXpress™染色试剂盒是高度灵敏的核酸染料。

• 染色凝胶在预处理凝胶干燥溶液（如Gel-Dry™溶液）中的时间不能超过5分钟。
• 暴露于预处理凝胶干燥溶液的时间过长，会导致凝胶完全脱色。

5%漂白剂能有效清除塑料、瓷器和金属表面的胶体蓝染料。

胶体蓝染色试剂盒可以保存在冰箱中，但在使用前应恢复到室温。同时，Stainer B试剂在使用前应摇匀。冷藏不会延长染料的保质期。

需要，固定有两个目的：固定凝胶中的样品和帮助去除凝胶背景。如果不使用固定液，凝胶背景会很高，检测灵敏度降低。凝胶中的两性电解质残留会导致高背景。

不可以，染色溶液应在使用前24小时以内配制。如果未使用新鲜的溶液，会产生较高的染色背景。

不能，加热会使胶体溶解，进而使溶液中的游离染料增加，导致背景升高和染色强度降低。

胶体蓝Coomassie™ G250染料需要610 nm波长，而Coomassie™ R250染料需要588 nm波长。

胶体蓝染料中的某些成分可能过于粗糙，不宜用于蛋白质测序，但Coomassie™染料本身并不会产生不利影响。

可以，胶体蓝染料可在免疫印迹前使用。但是，为得到最高转印效率，我们推荐进行凝胶脱色并在一系列Tris base/甘氨酸/SDS溶液中平衡，以增加溶解度；转印完成时，应使用甲醇处理膜，从而在形成发色体之前去除染料（化学发光检测前不需要进行该处理）。

Coomassie™ G250比Coomassie™ R250更灵敏，而Coomassie™ R250比Coomassie™ G250的染色速度更快。

可以，胶体蓝染色试剂盒对Novex™ Zymogram凝胶染色的效果很好。

质谱分析用Pierce™银染染料可在室温下稳定保存1年。

质谱分析用Pierce™银染染料具有次纳克级别的灵敏度，可在固定后30分钟内检测到蛋白含量低至0.25 ng的条带。

使用质谱分析用Pierce™银染染料染色后，有多种方法可回收和处理蛋白质以用于质谱分析。对于胶内胰蛋白酶消化，无论是否进行还原和烷基化，均可使用Thermo Scientific™胶内胰蛋白酶消化试剂盒（货号89871）。应考虑遵循质谱分析中核心设备的建议。

Pierce™银染试剂盒可在室温下稳定保存1年。

Pierce™银染试剂盒可检测蛋白质含量低至0.25ng的条带。

洗涤和固定凝胶，以除去电泳缓冲液中的盐。加入银染染料，释放银离子与蛋白质发生相互作用。加入显色剂，蛋白质条带随着结合银的减少而变黑。加入乙酸降低pH，终止显色。

该染料对大多数聚丙烯酰胺凝胶类型（即，不同供应商和不同缓冲液系统）的染色效果都很好。1D和2D聚丙烯酰胺凝胶均可使用该试剂盒染色。1.0mm凝胶的默认实验方案已经过优化；对于其他厚度的凝胶，需调整孵育和洗涤时间以获得最佳结果。

该试剂盒可检测到蛋白质含量为0.4 ng的条带。大部分蛋白质在低纳克（1–5 ng）级含量时，均可轻松检测到。

可以，点击这里查看如何处理经过Pierce™银染试剂盒染色的凝胶以用于质谱分析。然而，为获得最佳结果，我们推荐使用质谱分析用Pierce™银染染料（货号24600）。胶内胰蛋白酶消化和质谱分析前进行凝胶染色和脱色所需的全部试剂和优化步骤在该试剂盒中均有提供。

可以。首先，对Coomassie染色的凝胶进行脱色处理，以完全去除背景。如果使用了酸性或甲醇脱色溶液，则应使用超纯水彻底清洗凝胶，然后再使用Pierce™银染试剂盒进行染色。

该实验方案中的固定和染色时间非常灵活。凝胶固定至少30分钟后，可将其放在水中保存到第二天。凝胶染色时间控制在5分钟至24小时范围内，都不会使背景增强。

可以。用水彻底清洗凝胶以除去乙酸，使用含有5%甘油和10%甲醇（或10%乙醇）的溶液浸泡凝胶1小时，然后在凝胶干燥装置内进行干燥。

我们推荐将SilverQuest™银染试剂盒保存于室温，将SilverXpress™银染试剂盒保存于4℃。两种试剂盒在合适的条件下均可稳定保存6个月。

使用SilverXpress™和SilverQuest™银染试剂盒时，我们推荐使用Mark12™未染色标准品。对于SilverQuest™银染试剂盒，我们推荐按1:10稀释Mark12™未染色标准品，每个泳道上样5 μL。对于SilverXpress™银染试剂盒，我们推荐按1:20稀释Mark12™未染色标准品，每个泳道上样5 μL。

这是可以实现的。我们推荐用水脱色（不需要去除所有染料，但如果您想去除所有染料，我们推荐用50%乙醇浸泡凝胶，然后用大量清水洗涤）。如果使用盐对经过SimplyBlue™染色的凝胶进行脱色，我们建议用水清洗多次以除去所有盐，然后再进行银染操作。此外，我们推荐从固定步骤开始银染操作（这有助于除去之前染色留下的甲醇/乙醇和盐）。

谷氨酸、天冬氨酸和半胱氨酸硫醇对SilverXpress™和SilverQuest™银染方法的反应性最强。

可以，可在染色前24小时内配制SilverXpress™染色液。

注意：固定液可保存1个月。如果溶液变为粉色，则需要重新配制。

如果没有足够时间连续完成染色操作，可将凝胶在固定液中保存过夜。在某些情况下，延长固定时间可能改善灵敏度和背景染色。

有，可将凝胶在第二次敏化溶液中保存过夜。尽管一些其他试剂盒建议将凝胶保存在固定步骤，但我们发现固定过夜会有损染色性能。

不一定，以下两种方法均经过了内部测试：同时加入三种成分，以及混合2种染色剂后再加入水。两种方法可产生相同的结果。

我们通过对银染法进行轻微改进，得到了良好的结果。我们建议跳过固定步骤，并将敏化溶液的成分更改为2 mL敏化剂加198 mL超纯水。这种改进可将灵敏度变为0.3 ng检测含有50个碱基的核酸，而常规方案的灵敏度为检测0.9 ng含有50个碱基的核酸，溴化乙锭的灵敏度约为检测10 ng含有50个碱基的核酸。此外，为了提高灵敏度，我们推荐将Stainer A的使用量由5 mL增加至7.5 mL，或省略第二个洗涤步骤（该步骤会增强背景）。

SilverXpress™银染试剂盒可达到的灵敏度水平主要取决于蛋白质的类型和分离程度。通常，非还原型样品可在次纳克范围内产生极好的结果。SilverXpress™试剂盒可检测到0.86 ng非还原型BSA，而标准Coomassie™染色只能检测到50 ng以上的相同类型蛋白质。如果您使用了Mark12™标准品，1:20的稀释倍数适合作为对照。还原型蛋白质所得结果的灵敏度较低。如果使用BME作为还原剂，则可能获得与非还原型样品相等的灵敏度。然而，如果使用DTT作为还原剂，则预期灵敏度在纳克范围，而非次纳克范围。

该试剂盒可检测到≥0.3 ng的蛋白质。

我们推荐将凝胶在第二次敏化洗涤溶液中保存过夜。尽管一些其他试剂盒建议将凝胶保存在固定步骤，但我们发现固定过夜有损染色性能。

SilverQuest™银染试剂盒可兼容质谱（MS）分析，而SilverXpress银染试剂盒不能兼容质谱分析。

可以，由于敏化溶液不含戊二醛，您可在SilverQuest™染色凝胶完全脱色后，将蛋白质转印到膜上。

SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料主要与蛋白质结合，通过染料的离子电荷结合到蛋白质的碱性侧链（赖氨酸、精氨酸、组氨酸以及较少的酪氨酸和色氨酸）上。固定液和SYPRO™ Ruby染色溶液均为酸性pH，SYPRO™ Ruby染料结合随质子化碱性残基的增加而增加。SYPRO™ Ruby染料也会结合与蛋白质结合的SDS以及凝胶基质中的SDS。固定溶液中较高的50%甲醇浓度，有助于去除凝胶基质中的SDS，从而降低背景染色并获得最佳的信噪比。

以下是一篇关于SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料的氨基酸特异性的参考文献：

Ultrasensitive fluorescence protein detection in isoelectric focusing gels using a ruthenium metal chelate stain. Steinberg TH, Chernokalskaya E, Berggren K, Lopez MF, Diwu Z, Haugland RP, Patton WF. Electrophoresis 2006, 21, 486–496.

由于SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料主要与碱性蛋白质残基结合，而非SDS，因此不能将其作为终点染料（直接的饱和结合，并具有较低的解离率）。终点染料的性能不会受到固定、染色或脱色溶液体积或孵育时间的差异的影响，只受蛋白质含量的影响。SYPRO™ Ruby染色方案中较强的50%甲醇/7%乙酸固定，可除去大部分与蛋白质结合的SDS以及凝胶基质中的SDS，因此信号仅来源于直接的蛋白质结合。通过SDS/蛋白质结合作用而与蛋白质间接结合的染料（如Deep Purple、Lucy、SYPRO™ Orange/Red/Tangerine、Nile Red染料），会产生较大的蛋白质间以及凝胶间差异，这取决于与蛋白质结合的SDS量和凝胶基质中的SDS量。未与SDS饱和结合的蛋白质，如严重糖基化或磷酸化的蛋白质，使用间接SDS结合蛋白质染料的染色程度较低。

图解：按照生产商的推荐方案，将糖基化（G）、磷酸化（P）和非糖基化/磷酸化蛋白质的混合物以125 ng/条带在4–12% Bis-Tris凝胶上进行分离和染色。将凝胶置于最佳激发/发射条件下，对每种染料进行显色。Deep Purple对糖蛋白葡萄糖氧化酶和酸性磷蛋白胃蛋白酶的染色效果较差。Lucy对a1酸性糖蛋白的染色效果较差。

以下是一些参考文献：

• Comparative performance of fluorescent total protein stains on one- and two-dimensional PAGE gels. Hart C, Ahnert N, Hajivandi M, Lindsey A, Harwood SH. Poster, Journal of Biomolecular Techniques, Volume 17, Issue 1, March 2006.
• Relative photostability and differential staining of proteins in two dimensional gels. Smejkal GB, Robinson MH, Lazarev A. Electrophoresis 2004, 25, 2511–2519.

Protein stains for proteomic applications: Which, when, why? Miller I, Crawford J, Gianazza E, Proteomics 2006, 6, 5385–5408.

荧光强度随蛋白质含量呈线性变化，跨越将近3个数量级，从1 ng至1000 ng。SYPRO™ Ruby染料比银染的线性范围更宽。基本上，蛋白质越多，SYPRO™ Ruby染料的结合量越高。

如果一种蛋白质具有较低的碱性残基含量，则染色水平相对于高碱性残基含量的蛋白质较低。严重糖基化的蛋白质就是一种碱性残基含量较低的蛋白质，其染色效果可能不如非糖基化或轻度糖基化蛋白质的效果好，因此检测灵敏度较低。不含有任何碱性残基的蛋白质（可作为合成结构），不会与染料结合。

SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料可用水稀释最多5倍，这只会使检测灵敏度轻微降低。但是，即使是1/2稀释，也会使荧光信号和动态范围显著下降。重复利用染料多达2次，检测灵敏度依然很高，但是，染料在第二次使用时的信号强度会降低多达2.5倍。重复利用染料时，推荐将染料体积增加至100 mL。

参考文献：Ahnert N, Patton WF, Schulenberg B. Optimized conditions for diluting and reusing a fluorescent protein gel stain. Electrophoresis 2004, 25, 2506–2510.

对于使用SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料或任何凝胶染料染色的蛋白质，若蛋白质固定在凝胶中，则不能将其转印到膜上。固定步骤和SYPRO™ Ruby凝胶染色溶液的低pH条件，都可将蛋白质沉淀到凝胶基质中，以防止蛋白质在染色过程中发生扩散，从而也阻止了蛋白质有效转印到膜上。我们推荐使用SYPRO™ Tangerine蛋白质凝胶染料，它是一种具有中性pH、以简单的盐溶液为基础的非固定型凝胶染料，可用于转印前的蛋白质预染。

不能。上样溶液含有很多SDS，因此，SYPRO™ Ruby、SYPRO™ Orange和SYPRO™ Red染料会只与游离的SDS结合，而极少与蛋白质结合。在电泳前，可预先使用ATTO-TAG™ CBQCA（货号A2333）、DDAO琥珀酰亚胺酯（货号C34553）或TAMRA-琥珀酰亚胺酯（货号C2211）染料或TC-FLAsH™表达分析检测试剂盒（货号A10067为橙黄色荧光，货号A10068为红色荧光）对蛋白质进行共价标记，不会影响蛋白质在凝胶中的迁移。

电泳期间，可将SYPRO™ Orange或SYPRO™ Red蛋白质凝胶染料稀释5000倍并加入到阴极（上层）缓冲液槽中，对蛋白质进行染色而不影响迁移。这样做可能引起的问题是，染料与SDS的相互作用可能导致凝胶产生背景荧光。在电泳后使用7.5%乙酸脱色15–60分钟，可降低这种背景荧光。这种染色方法还会导致蛋白质灵敏度低于标准的后染色方法、在凝胶成像前需要相同的时间以及污染电泳装置。

可以，但是乙醇/乙酸会产生气味强烈的乙酸乙酯，因此，应在通风橱里进行固定。

不一定，也可使用其他常用的凝胶固定剂，包括10%甲醇/7%乙酸。SYPRO™ Ruby染料本身即可固定凝胶中的蛋白质，因此，对染色结果较好的蛋白质无需单独采用固定步骤。实验方案推荐使用的50%甲醇/7%乙酸固定剂，已被证明对于去除凝胶基质中残留的SDS效果最好，因此，与其他固定方法相比，该固定方法的背景最低、灵敏度最佳。降低甲醇浓度可能导致凝胶底部出现严重染色的SDS区域，从而降低在此区域附近电泳的低分子量蛋白质的检测灵敏度。

不是，23分钟恰好是30分钟总染色时间减去微波和5分钟孵育时间后剩下的时间。事实上，这些是所用的最短时间，从而使全部固定、染色、脱色步骤可在90分钟内完成。无需严格遵守微波染色步骤2.2的准确时间。凝胶染色时间可以长于30分钟，但背景也会随蛋白质信号逐渐增强，因此，微波方案的染色时间长于30分钟不会改善灵敏度。通常，染色30至90分钟会产生相似的结果。最高的终点信号强度可在5小时后达到，与过夜染色方案达到的结果相同。

在30分钟的染色时间内，只需将凝胶微波处理2次至将近沸腾，这样只会形成小气泡。过度沸腾会导致染色溶液撞击，在某些情况下，可使凝胶烧焦和损坏。

可以，最佳停止点是第一次固定步骤。凝胶可在第一次固定溶液中保存数天，并且对染色结果无影响。一次较长时间的固定足以去除凝胶上的SDS，因此无需重复固定步骤，这样可节约溶剂。过夜或更长时间的固定会使凝胶基质显著脱水，凝胶尺寸会减小并变成不透明的白色。微波处理前，必须再水化凝胶。在水中或SYPRO™ Ruby凝胶染料中摇动5分钟，可使凝胶再水化。在微波处理前，应确保凝胶漂浮在溶液中而没有粘到染色盘底部，否则，会发生不均匀的再水化或染色。当凝胶经过再水化而回到原始尺寸后，即可将其置于SYPRO™ Ruby凝胶染料中进行微波处理。

点击这里，查看用于SYPRO™ Ruby染料成像的仪器列表。

对于许多无需分析的常规凝胶或印迹成像，可使用简单的数码相机或拍照手机（如iPhone相机）并结合使用紫外或蓝光透照仪，如Safe Imager™ 2.0蓝光透照仪（货号G6600）。将凝胶置于透照仪表面，用琥珀色塑料滤镜覆盖凝胶。透过琥珀色塑料拍照，可降低背景亮度并提高灵敏性。对于印迹膜，最好从膜上方（照明）拍照，而非透过膜（透照）拍照。将灯箱放置在桌上，并将印迹膜面朝上放置在灯箱旁边。将琥珀色塑料滤镜拿到接近相机镜头的地方，透过滤镜拍照。

在Safe Imager™ 2.0蓝光透照仪（货号G6600）或其他相似的蓝光透照仪中，SYPRO™ Ruby染料（以及SYPRO™ Orange、Coomassie™ Fluor Orange和核酸染料SYBR™ Safe、SYBR™ Gold以及SYBR™ Green I和II）在约470 nm激发波长处可很好地发出荧光。使用设备自带的琥珀色玻璃片，可观察凝胶。也可使用带有302 nm或365 nm灯泡的紫外灯透照仪，但使用时需要紫外防护设备。

SYPRO™ Ruby染料不会影响质谱分析。使用SYPRO™ Ruby染料染色后，可对蛋白质条带或点进行胰酶消化，然后进行质谱分析。尽管SYPRO™ Ruby染料不会干扰质谱分析，但我们偶尔会看到一些由SYPRO™ Ruby染料形成的峰。对称的峰群集中分布在1257和1279 MW附近。

参考文献：Parker K, Garrels J, Hines W, Butler E, McKee A, Patterson D, Martin S. Electrophoresis 1998, 19, 1920–1932.

我们只测试了分子量低至6,000 Da的蛋白质，但是，如果有更小的蛋白质能够溶解在凝胶中并且含有赖氨酸、精氨酸或组氨酸碱性氨基酸残基，也有可能被检测到。

经SYPRO™ Ruby染色的凝胶可使用任何银染试剂进行后染色，如SilverXpress™银染试剂盒（货号LC6100）和SilverQuest™银染试剂盒（货号LC6070）。实际上，双重染色是增强单独SYPRO™ Ruby染色凝胶或银染凝胶灵敏度的极佳方法。只需在SYPRO™ Ruby染色后遵循常规的10%甲醇、7%乙酸脱色和清水洗涤步骤，如有需要可进行SYPRO™ Ruby信号成像，然后进行银染操作。银染实验中，无需固定步骤，因为凝胶已经被固定。银离子被大量吸引到SYPRO™ Ruby染料上，蛋白质周围的银沉积增加，从而增强了信号。当SYPRO™ Ruby染色凝胶经过银染后，SYPRO™ Ruby的荧光信号将不再被检测到。

可以，经SYPRO™ Ruby染色的凝胶和印迹膜可使用任何Coomassie™ Blue染料染色，产生的结果与只使用Coomassie™ Blue染料染色的凝胶和印迹膜相似。SYPRO™ Ruby的荧光将在Coomassie™ Blue染色后消失。

不能，SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料和印迹膜染料的配方有很大不同，它们经过优化分别适用于各自的用途，并且不可交换使用。交换使用印迹膜或凝胶染料进行染色，会产生不理想的染色强度和较高的背景。

SYPRO™ Ruby凝胶染料是一种终点染料，这表示一旦染料与蛋白质的结合达到饱和，则染料不会继续对蛋白质染色或增强背景信号，这一点与银染不同。凝胶可在SYPRO™ Ruby凝胶染料中保存几个月（建议在4℃）且不会过度染色。

SYPRO™ Ruby凝胶染料的解离率非常低。实际上，染料与蛋白质结合后，很难将染料从凝胶上洗脱出来。染色凝胶可在4℃下避光保存至少几个月而无信号损失。将凝胶保存在含2–5 mM叠氮化钠（作为防腐剂）的少量水中或7%乙酸中，维持水化状态。对于更为长久的保存，可将凝胶干燥或真空密封保存在含2–5 mM 叠氮化钠的1–5 mL SYPRO™ Ruby染料中，并保存在4℃。可使用Seal-A-Meal™食品保存袋。

凝胶将需要被连续染色，并在每次染色后成像。染色顺序为：

InVision™ His-Tag In-Gel Stain（货号LC6030）→成像→ Pro-Q™ Diamond磷酸化蛋白凝胶染料→成像→ Pro-Q™ Emerald 300或488糖蛋白凝胶染料→ SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料→ Coomassie™ Blue或银染→成像

使用Safe Imager™ 2.0蓝光透照仪时，需要8-10分钟持续紫外照射才能引起过度的光漂白。漂白率取决于光源强度，但在大多数情况下，这并不是问题。即使发生漂泊，也只会轻微降低SYPRO™染料预染凝胶的灵敏度。

可以，您可使用SYPRO™ Orange蛋白质凝胶染料对Novex凝胶进行染色，但需要更改实验方案。该染料主要是与0.05% SDS电泳缓冲液一起使用，但我们所有的缓冲液均含有0.1% SDS。这会产生较高的背景，因为SDS会与染料紧密结合。以下是获得最佳Novex™凝胶染色结果的推荐方案：

洗涤液：7.5% (v/v) 乙酸

染色液：在洗涤液中按1:5000稀释SYPRO™ Orange

1. 凝胶电泳完毕后，在100 ml洗涤液中清洗10分钟。
2. 将凝胶置于染色液中，在暗处放置长达24小时。
3. 从染色液中取出凝胶，在100 ml洗涤液中短暂清洗。
4. 随后，可对凝胶进行拍照。

经过SYPRO™染料染色的凝胶可放置在玻璃纸之间进行干燥，但有时会轻微降低灵敏度。如果在纸上干燥凝胶，光会散射且灵敏度会降低。不推荐使用其他塑料，因为通常使用的塑料是不可透过紫外光的。

不会。染料浓度高于1X不会带来更好的检测结果。相反，随着染料浓度的增加，背景荧光会增强，染料会发生自淬灭，从而降低信号。

不能完全去除。使用含150 mM Tris 的20–50%甲醇溶液（pH 9）孵育凝胶或PVDF膜并多次更换干净的溶液，可去除大部分染料，但不能完全去除。

可以，15分钟是最短时间。如果在SYPRO™ Ruby印迹膜染料中孵育超过15分钟，不会使印迹膜过度染色。

可以。印迹膜可长期放置在水中，并且不会使染色的蛋白质脱色。长时间的清水洗涤有助于降低非特异性背景，特别是对于浸没式染色的PVDF膜。

可以。我们建议在使用Pro-Q™ Emerald 300或488糖蛋白印迹膜染料染色后，再使用SYPRO™Ruby印迹膜染料进行染色。

可以。我们建议在使用Pro-Q™ Diamond磷酸化蛋白印迹膜染料染色后，再使用SYPRO™Ruby印迹膜染料进行染色。

是的，与用甲醇再润湿的印迹膜染色（浸没式染色）相比，对干燥的PVDF膜进行染色（面染色）可产生较低的非特异性背景信号和更好的信噪比。背景降低的另一个原因是，膜的背面没有染料。印迹膜上未完全干燥或有很多SDS残留的区域会湿透并呈现为较暗的染色背景。如果这是问题，那么可使用100%甲醇将整个PVDF印迹膜润湿，使整个背景的染色程度相同。染色蛋白质的信号和印迹膜的背景都会变得更明亮。您还应该增加水洗次数或延长印迹膜浸没染色的时间。干燥印迹膜也会使蛋白质完全结合到膜上。

经过SYPRO™ Ruby印迹膜染料染色的干燥印迹膜的光稳定性很强，可长期保存在室温和避光条件下，包括夹在笔记本中。

可以。SYPRO™ Ruby染料可兼容后续的免疫检测，可使用比色、荧光和化学发光检测技术，包括BCIP/NBT、ECL和CDP-Star™试剂。为获得最佳的免疫检测灵敏度，我们建议在免疫检测步骤前，使用含150 mM Tris的20%甲醇溶液（pH 8.8）进行脱色处理10分钟，随后用去离子水洗涤4次，每次1分钟，以去除大部分SYPRO™ Ruby染料。

SYPRO™ Ruby染料在干燥状态下更明亮，因此，干燥印迹膜更适用于照明成像。如果您只有透照仪，由于印迹膜在湿润时更透明，所以在湿润状态下成像会得到更明亮的信号和更低的背景。

不能。SYPRO™ Ruby蛋白质印迹膜染料不能用于阳离子膜，如Immobilon™ CD或Immobilon™ N膜。因为SYPRO™ Ruby蛋白质印迹膜染料是一种阴离子染料，它会与膜发生非特异性结合。酰胺黑、Coomassie™ Blue、丽春红和任何其他总蛋白印迹膜染料也是如此。建议将SYPRO™ Ruby蛋白质印迹膜染料用于Immobilon™ P或Immobilon™ FL膜。

用于硝化纤维素膜的MemCode™可逆性蛋白质染色试剂盒可在室温下稳定保存1年。

用于硝化纤维素膜的MemCode™可逆性蛋白质染色试剂盒可检测到蛋白质含量低至25-50 ng的条带。

Novex™可逆性膜蛋白质染色试剂盒可在室温下稳定保存6个月。

该染料可检测到<10 ng的牛血清白蛋白。

Novex™可逆性膜蛋白质染色试剂盒中溶液的成分拥有专利权。

Novex™可逆性膜蛋白质染料比丽春红S染料更灵敏。丽春红S不能很好地检测低丰度蛋白质转印或分离的分辨率。

与预染ladder中蛋白质结合的染料具有电荷并且是共价结合的，因此，预染ladder的转印效率几乎总是高于SDS变性蛋白。所以，预染ladder不能用于衡量转印成功。

我们不推荐重复利用Novex™可逆性膜蛋白质染色溶液，因为这会导致沉淀形成并影响染色。

使用Eraser溶液可完全清除染料，因此不会影响免疫检测过程。

InVision™ His-Tag In-Gel Stain可在室温下稳定保存6个月。

InVision™ His-tag In-gel Stain是一种即用型专用荧光染料，其配方专用于快速、灵敏和特异性检测His标签融合蛋白。该染料是由独特的荧光染料与Ni2+:次氮基三乙酸（NTA）复合物结合而成。Ni2+可特异性结合His标签融合蛋白的寡聚组氨酸结构域，从而能够特异性检测内源蛋白混合物外的His标签融合蛋白。

InVision™ His-Tag In-Gel Stain是粉色的。

该染料可检测到约为0.5 pmole的6X His标签融合蛋白（如1 pmole的30 kDa蛋白质为30 ng）。染色强度对蛋白质条带所含的蛋白质摩尔量很灵敏，因为1分子的InVision™ His-tag In-Gel Stain只能结合蛋白质上的1个寡聚组氨酸标签分子。例如，分子量分别为150 kDa和30 kDa的蛋白质上样量均为150 ng/条带，使用InVision™ His-tag In-Gel Stain染色后，30 kDa条带的染色强度高于150 kDa条带。这是因为，在150 ng/条带的相同上样总质量中，150 kDa条带只有1 pmole，而30 kDa条带有5 pmole。小型凝胶的染色在3小时内即可完成。

InVision™ His-tag In-gel Stain的最大激发波长为560 nm，最大发射波长为590 nm。

为了在染色后观察His标签融合蛋白，您将需要：

• 配有集成相机的紫外透照仪（302 nm）——为了在紫外透照仪上观察凝胶并拍照，可使用标准摄影机、CCD（电荷耦合器件）相机或冷却型CCD相机，并带有溴化乙锭滤光片或包含染料最大发射波长（590 nm）的带通滤波片。不建议使用Polaroid™相机。注意：您也可使用365 nm紫外透照仪，但是需要延长凝胶的曝光时间，因为其灵敏度低于302nm紫外透照仪。
  或者
• 激光扫描仪，带有属于染料最大激发波长（560 nm）的激光线，以及560 nm长通滤波片或以590nm最大发射波长为中心的带通滤波片。激光扫描仪的检测灵敏度比紫外透照仪强2倍。

BenchMark™ His标签蛋白标准品非常适合作为InVision™ His-Tag In-Gel Stain的阳性对照。该标准品的配方能够同时检测标准蛋白和His标签融合蛋白。InVision™ His-tag In-Gel Staining 试剂盒（货号LC6033）中包含BenchMark™ His标签蛋白标准品。

使用手册中有对转印到硝化纤维素膜上的His标签融合蛋白进行染色的实验方案。不建议将该方案用于PVDF膜染色。

经过InVision™ His-Tag In-Gel Stain染色的蛋白质可以用于质谱（MS）分析。

为了将经过InVision™ His-Tag In-Gel Stain染色的His标签融合蛋白用于免疫印迹分析，应该

• 在His标签融合蛋白染色后，记录凝胶的永久性图像
• 将凝胶置于1X SDS电泳缓冲液中平衡1小时。
• 使用所选方法进行免疫印迹分析和免疫检测。

由于E-PAGE™凝胶比标准小型凝胶更厚，因此，使用InVision™ His-Tag In-Gel Stain染色会产生过强的背景。为获得更好的染色灵敏度，我们建议先将E-PAGE™凝胶上的蛋白质转印到硝化纤维素膜上，然后根据使用手册第14页的说明使用InVision™ His-tag In-gel Stain对印迹膜进行染色。

在避光条件下，Lumio™绿色检测试剂盒的组件可在-20℃稳定保存6个月。

Lumio™绿色检测试剂盒是一种灵敏的、高特异性试剂盒，可用于在电泳前标记Lumio™融合蛋白。该试剂盒可直接在聚丙烯酰胺凝胶上使Lumio™融合蛋白立即显色。

Lumio™绿色检测试剂的最大激发波长为500 nm，最大发射波长为535 nm。

Lumio™绿色检测试剂在保存期间可从无色变为粉色。颜色改变不会影响试剂的功能。

该试剂盒的独特配方专用于快速、灵敏和特异性的检测，可检测到1 pmole的Lumio™融合蛋白（如1 pmole的30 kDa蛋白质为30 ng）。信号强度可能会改变，取决于蛋白质本身。信号强度也取决于蛋白质条带所含的蛋白质摩尔量，因为1分子的Lumio™绿色试剂只能结合蛋白质上的1个Lumio™标签。例如，分子量分别为150 kDa和30 kDa的蛋白质上样量均为150 ng/条带，使用Lumio™绿色检测试剂盒染色后，30 kDa条带的染色强度高于150 kDa条带。这是因为，在150 ng/条带的相同上样总质量中，150 kDa条带只有1 pmole，而30 kDa条带有5 pmole。

Lumio™标签很小（6个氨基酸，585 Da）。较小的标签不大可能干扰目标蛋白的结构和生物学活性。

使用Lumio™绿色检测试剂检测过的蛋白质可以用于质谱（MS）分析。使用Lumio™绿色检测试剂检测后，剪切蛋白质条带/点，使用所选方法或根据核心设备的指示来制备用于质谱分析的样品。Lumio™绿色检测实验方案会产生以下蛋白质修饰。应确保在质谱分析期间考虑到这些因素：

• 蛋白质中的半胱氨酸被修饰，导致每个半胱氨酸增加97.07 Da。
• Lumio™绿色试剂中Lumio™标签的总分子量为1060 Da（无EDT的Lumio™绿色试剂的分子量为475 Da，Lumio™标签的分子量为585 Da）。

为了使染色后的Lumio™标签蛋白条带显色，您将需要：

• 配有标准摄影机、CCD（电荷耦合器件）相机或冷却型CCD相机的紫外透照仪（302 nm），并带有溴化乙锭滤光片或SYBR™ Green滤光片。注意：您也可使用365 nm紫外透照仪，但是需要延长凝胶的曝光时间，因为其灵敏度低于302nm紫外透照仪。

或者

• 激光扫描仪，带有属于染料最大激发波长（500 nm）的激光线，以及535 nm长通滤波片或以535nm最大发射波长为中心的带通滤波片。配有合适滤光片的激光扫描仪的检测灵敏度比紫外透照仪更高。

使用标准（Laemmli）SDS-PAGE样品缓冲液制备的样品，不能使用Lumio™绿色检测试剂盒进行检测。

Lumio™胶内检测增强剂是一种独特的溶液，专门用于减少Lumio™绿色检测试剂与内源性蛋白质的非特异性结合。

使用BenchMark™荧光蛋白标准品，可直接在SDS-PAGE凝胶上观察分子量范围内的Lumio™融合蛋白。使用UV透照仪或激光扫描仪可轻松检测到标准品中的蛋白质，其激发和发射波长与Lumio™融合蛋白相同。

97 Da的分子量改变，是由于增强剂覆盖到了不属于Lumio™标签的半胱氨酸上，以防止染料与这些半胱氨酸发生非特异性结合。因此，除了Lumio™标签中的4个半胱氨酸，其他所有半胱氨酸都将被修饰并产生分子量的改变。

Pierce™ 6xHis蛋白质标签染色试剂套装可在室温下稳定保存1年。

使用CCD相机，Pierce™ 6xHis蛋白质标签染色试剂套装可检测到一个条带中低至0.2 μg的35 kDa (5.7 pmol) His标签蛋白；使用紫外透照仪，该套装可检测到一个条带中低至2 μg (57 pmol) 的His标签蛋白。检测时，需要使用波长范围为280–310 nm的紫外光照射染色凝胶。

Pierce™ 6xHis蛋白质标签染色试剂套装的染色步骤中无固定步骤。因此，使用该试剂盒染色不会限制后续使用通用蛋白质染料进行总蛋白质染色或将蛋白质转印到膜上。

注意：在MOPS或MES缓冲液中电泳的Bis-Tris凝胶可能需要在染色步骤前使用50%甲醇：7%乙酸固定15分钟。电泳后，固定凝胶，然后开始染色操作的步骤1。

将凝胶保存在水中，荧光信号可稳定维持数小时。保存过夜后，信号仍可检测到，但多少会有所衰减。

凝胶将需要被连续染色，并在每次染色后成像。染色顺序为：

InVision™ His-Tag In-Gel Stain（货号LC6030）→成像→ Pro-Q™ Diamond磷酸化蛋白凝胶染料→成像→ Pro-Q™ Emerald 300或488糖蛋白凝胶染料→ SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料→ Coomassie™ Blue或银染→成像

最好将凝胶在固定步骤保存过夜，因为甲醇和乙酸都能够沉淀蛋白质并防止扩散。若将容器良好密封以防止污染或凝胶干燥，并且静置或轻轻摇动容器以尽量减少凝胶损害，则凝胶可在固定溶液中长久稳定保存。较高的甲醇浓度会使凝胶脱水、萎缩，并可能变为不透明的白色。这属于正常情况。只需将凝胶置于洗涤液中轻轻摇动，即可使其恢复原状。

也可在固定步骤后将凝胶置于洗涤液中保存过夜。经过固定后洗涤，最好遵循推荐的实验方案时间来完成染色步骤。凝胶染色后，只要是在避光条件下保存，信号可至少维持数天。染色并干燥的印迹膜可收集归档，在避光条件下保存的印迹膜，其信号可一直被检测到。

不能，Pro-Q™ Diamond磷酸化蛋白质凝胶染料和印迹膜染料的配方非常不同，交换使用将产生不可接受的磷酸化蛋白检测结果。

可以。我们推荐在使用Pro-Q™ Diamond磷酸化蛋白质印迹膜染料染色后，再使用SYPRO™ Ruby印迹膜染料染色。

其他已知的磷酸化蛋白质可以用作Pro-Q™ Diamond磷酸化蛋白质染料的阳性对照标准品。蛋白质分子量标准品试剂（货号P6649）中的卵清蛋白就是一种磷酸化蛋白质。Mark12™、Novex™ Sharp、SeeBlue™或SeeBlue™ Plus2标准品中的蛋白质，都不是可以用作Pro-Q™ Diamond磷酸化蛋白质染料的阳性对照的磷酸化蛋白质。

高碘酸氧化试剂通过形成环状高碘酸酯而破坏糖残基上邻近氢氧根（1,2二醇）间的键， 形成醛或羰基基团。Pro-Q™ Emerald试剂含有伯胺，可与醛/酮直接结合，从而在糖残基和染料分子间形成共价键。

注意：Pro-Q™ Emerald的精确结构拥有专利权。

Pro-Q™ Emerald糖蛋白凝胶染料对Tris-甘氨酸和Tricine凝胶的染色效果最好。Pro-Q™ Emerald染料可用于Novex™ NuPAGE™ Bis-Tris和Tris-Acetate凝胶，但可能产生较高的背景染色，特别是与MES电泳缓冲液一起使用或用于邻近有效期的凝胶时。如果您想将Pro-Q™ Emerald染料用于Novex™ NuPAGE™ Bis-Tris凝胶，我们推荐使用近期购买的凝胶和MOPS电泳缓冲液。凝胶背景随丙烯酰胺密度的增加而增加，梯度凝胶的背景从上到下逐渐减弱，与凝胶上丙烯酰胺的梯度保持一致。在高背景凝胶上，仍然可检测到糖蛋白，但灵敏度降低。

凝胶将需要被连续染色，并在每次染色后成像。染色顺序为：

InVision™ His-Tag In-Gel Stain（货号LC6030）→成像→ Pro-Q™ Diamond磷酸化蛋白凝胶染料→成像→ Pro-Q™ Emerald 300或488糖蛋白凝胶染料→ SYPRO™ Ruby蛋白质凝胶染料→ Coomassie™ Blue或银染→成像

Pro-Q™ Emerald 300/488糖蛋白凝胶染料可以兼容质谱。在胰蛋白酶消化中，只有少数多肽会发生糖基化，而大部分非糖基化的多肽能够被鉴定。糖基化多肽在标准条件下无法被检测到（染色或未染色），因为数据库未将连接在多肽上的糖链考虑在内。

如果凝胶缓冲液中含有Tris、甘氨酸或任何其他结构中含有伯胺的成分，其中的伯胺会直接与高碘酸氧化形成的醛/酮发生反应，覆盖所有反应位点，使Pro-Q™ Emerald染料试剂没有结合位点。

使用Pro-Q™ Emerald 300/488糖蛋白染料染色前，必须清除凝胶上所有残留的高碘酸，这是为了限制Pro-Q™ Emerald染料的氧化/分解。

使用Pro-Q™ Emerald 300/488糖蛋白染料染色前，必须清除蛋白质中的SDS，这是为了使糖残基能够接近氧化试剂（高碘酸）和Pro-Q™ Emerald染料试剂。SDS可覆盖蛋白质，可能产生空间位阻而限制蛋白质接近试剂。

其他已知的糖蛋白可以用作Pro-Q™ Emerald 300/488糖蛋白染料的阳性对照标准品。蛋白质分子量标准品试剂（货号P6649）中的卵清蛋白和转铁蛋白都是糖蛋白。Mark12™、Novex™ Sharp、SeeBlue™或SeeBlue™ Plus2标准品中的蛋白质，都不是可以用作Pro-Q™ Emerald 300/488糖蛋白染料的阳性对照的糖蛋白。

最好将凝胶在固定步骤保存过夜，因为甲醇和乙酸都能够沉淀蛋白质并防止扩散。若将容器良好密封以防止污染或凝胶干燥，并且静置或轻轻摇动容器以尽量减少凝胶损害，则凝胶可在固定溶液中长久稳定保存。较高的甲醇浓度会使凝胶脱水、萎缩，并可能变为不透明的白色。这属于正常情况。只需将凝胶置于洗涤液中轻轻摇动，即可使其恢复原状。

也可在固定步骤后将凝胶置于洗涤液中保存过夜。经过固定后洗涤，最好遵循推荐的实验方案时间来完成染色步骤。凝胶染色后，只要是在避光条件下保存，信号可至少维持数天。染色并干燥的印迹膜可收集归档，在避光条件下保存的印迹膜，其信号可一直被检测到

使用Pro-Q™ Emerald 300/488糖蛋白染料时，必须使用PVDF膜。硝化纤维素膜会被固定步骤中的高浓度甲醇溶解。

可以。我们推荐在使用Pro-Q™ Emerald 300或488糖蛋白印迹膜染料染色后，再使用SYPRO™ Ruby印迹膜染料染色。

Thermo Scientific™ Pierce™ Power Stainer（货号22833）由带有激活版Staining Software的Thermo Scientific™ Pierce™ Power Station（货号22838）以及Thermo Scientific™ Pierce™ Power Stain Cassette（货号22836）组成。该系统专为聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的快速Coomassie染色脱色而设计。传统Coomassie染色技术需要一小时至一夜的时间来完成染色和脱色，才能得到理想结果。与Thermo Scientific™ Pierce™中型和小型凝胶快速染色试剂盒一起使用时，Pierce™ Power Stainer只需6分钟即可带来等同或优于传统Coomassie™染色技术的染色效率。该系统将蛋白质固定在凝胶中，并通过电泳使带负电荷的Coomassie R250染料快速通过凝胶基质，从而实现蛋白质染色时间的显著缩短。染料通过聚丙烯酰胺并与蛋白质以离子键结合，产生亮蓝色条带和极低的背景。该系统已经过验证，对常用的预制和自制SDS-PAGE凝胶都适用。

Pierce™ Power Stainer只需6分钟，即可完成对2块小型凝胶或1块中型凝胶的染色。请注意，同时染色的凝胶必须具有相同的配方。

可以。您可购买Thermo Scientific™ Pierce™ Power Blot Cassette（货号22835），插入到设备中即可激活预先加载的Power Blotter软件。

检测区间与商业化蛋白质染料相近（约0.01至50 µg纯蛋白）。

Pierce™ Power Stainer Cassette可同时对1-2块小型凝胶或1块中型凝胶进行染色。

尺寸为7 x 8.4 mm的小型凝胶和8 x 13.5 cm的中型凝胶分别适用于小型和中型凝胶垫。最常用的凝胶厚度为1 mm。若使用厚度大于或小于1 mm的凝胶，将需要进行时间优化。

Pierce™快速染色试剂盒所含材料足够用于30块小型凝胶（小型试剂盒）或15块中型凝胶（中型试剂盒）的染色。

不能。为获得最佳结果，应使用新鲜配制的染色和脱色垫。每次染色后，应丢弃用过的凝胶垫。

不能。Pierce™ Power Stainer、快速染色液和脱色液要求使用小型和中型凝胶垫（每张凝胶垫有8层）。凝胶垫可作为快速染色液和脱色液的储备层。标准免疫印迹滤纸会导致染色不均匀和背景不一致。

使用的是Coomassie R-250染料。在有铂涂层的阳极和不锈钢阴极加以最优化的电压后，Coomassie R-250染料的负电荷使其能够通过凝胶并与蛋白质结合。未结合的染料将继续电泳并离开凝胶基质，从而使背景脱色。

不能。该系统对常规Coomassie染料无效。

不能。Pierce™ Power Stainer需使用经优化的专用快速染色液和脱色液。

可以。按照生产商提供的实验方案，只需将凝胶放置于Coomassie染料中染色30-60分钟并脱色即可。

经Pierce™ Power Stainer染色的凝胶可在塑料保护纸或水中保存长达4小时，无信号损失。

可以。其质谱分析结果与传统Coomassie染色的蛋白质条带相似。

可以。您可购买Pierce™ Power Stain Cassette（货号22836），插入到设备中即可激活预先加载的Power Stainer软件。

不能。蛋白质在染色期间被固定到了凝胶上，因此，不能得到最佳的免疫印迹结果。免疫印迹分析应使用未染色的凝胶。

Thermo Scientific™ Pierce™ Power System（货号22830）由带有激活版Staining和Blotting Software的Pierce™ Power Station（货号22838）、Pierce™ Power Stain Cassette（货号22836）以及Pierce™ Power Blot Cassette（货号22835）组成。该系统是Power Stainer和Power Blotter的组合。

可以。Pierce™ Power Station可自动识别染色盒的插入并初始化正确的软件菜单系统。

不能。不可以在插入Power Blot Cassette时选择快速染色方案，反之亦然。

不能。每种盒子只能用于其预期使用目的；Power Blot Cassette仅用于转印（快速蛋白质转印），Power -stain Cassette仅用于蛋白质染色。我们优化了表面区域，可使每种应用获得最佳结果。较小的染色盒用于染色效果更好，而较大的转印盒用于转印效果更好。

您可购买Thermo Scientific™ Pierce™ G2 Fast Blotter的Power Stainer升级套装（货号62288）。该套装包含Pierce Power Stain Cassette和一个USB闪存盘，闪存盘内附带的软件可升级Pierce G2 Fast Blotter Control Unit软件，并添加染色功能。我们也提供Thermo Scientific™ Pierce™快速染色试剂盒（货号22839，22840）。