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ReadyProbes® reagents은 계산, 희석, 피펫팅 없이 세포를 염색할 수 있는 ready-to-use 영상 솔루션입니다. 간단히 편리한 dropper bottle에서 2 방울/mL을 넣고 다음 단계를 진행합니다. 본사는 핵 및 액틴 염색제, 세포 생활성 및 세포자멸 염색제, 항체 접합물, 영상 촬영 부속품을 개발하였으며 이들 대부분은 사용자 편의를 위한 있는 제형으로 실험실 벤치톱에서 실온에 보관할 수 있습니다.
핵 염색 프로토콜
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2. 2025°C에서 5-20분간 배양한다 |
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3. 세포 영상을 촬영한다 |
샘플 영상
| ReadyProbes® reagent | 보관 | 필터 | Ex/Em | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|---|---|
| NucBlue® Live Cell Stain | 실온(RT) (≤25°C) | DAPI | 358/461 | R37605 |
| NucBlue® Fixed Cell Stain | RT (≤25°C) | DAPI | 352/461 | R37606 |
| Propidium Iodide Reagent | RT (≤25°C) | RFP | 535/617 | R37108 |
| NucRed® Live 647 Cell Stain | RT (≤25°C) | Cy®5 | 638/686 | R37106 |
액틴 염색 프로토콜
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샘플 영상
Actin staining. BPAE cells were fixed, permeabilized and blocked using the Image-iT® Fixation/Permeabilization Kit. Tubulin에 anti-tubulin 항체를 사용해 라벨을 표시한 후Alexa Fluor® 594 secondary룰 이용해 검출하였다.액틴은 ActinGreen™ 488 ReadyProbes® reagent 로 염색하였고 핵은 NucBlue® Fixed Cell Stain을 사용해 염색하였다.
| ReadyProbes™ reagent | 보관 | 필터 | Ex/Em | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|---|---|
| ActinGreen™ 488 Reagent | Room Temperature (RT) (≤25°deg;C) | FITC | 495/518 | R37110 |
| ActinRed™ 555 Reagent | RT (≤25°deg;C) | RFP | 540/565 | R37112 |
생활성 염색 프로토콜
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| nbsp; 2. 2025°C에서 5-20분간 배양한다. |
| nbsp; 3. 세포 영상을 촬영한다 |
샘플 영상
세포 생존율 평가. Live Jurkat 세포 또는 0.1% Triton® X-100 detergent으로 처리된 Jurkat cell을 ReadyProbes® Cell Viability Imaging Kit (Blue/Red): NucBlue® Live stain 및 propidium iodide (세포현탁액 1 mL당 2방울) 시약과 혼합하여 15분간 염색한다. 이제 세포 영상을 촬영하고 EVOS® FL Auto system에서 분석한다. NucBlue® Live는 모든 세포를 염색하고 propidium iodide는 죽은 세포만 염색한다.
| ReadyProbes® reagent | 보관 | 필터 | Ex/Em | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|---|---|
| NucGreen® Dead 488 Reagent | 실온 (RT) (≤25°C) | FITC | 504/523 | R37109 |
| NucRed® Dead 647 Cell Stain | RT (≤25°C) | Cy®5 | 642/661 | R37113 |
| ReadyProbes® Cell Viability Imaging Kit (Blue/Green | RT (≤25°C) | DAPI/FITC | 360/460 504/523 | R37609 |
| ReadyProbes® Cell Viability Imaging Kit (Blue/Red) | RT (≤25°C) | DAPI/RFP | 360/460 535/617 | R37610 |
세포자멸 시약 프로토콜
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3. 세포 영상을 촬영한다. |
샘플 영상
세포자멸 평가. HeLa 세포를 CellEvent® Caspase 3/7 Green ReadyProbes® reagent와 함께 넣은 후, 4시간 동안 0.5 M staurosporine 또는 부형대조제로 처치한다. 미처치 세포 (A)는 약한 형광을 보이나 처치 세포(B)는 세포자멸을 제시하는 유의한 형광 증가(녹색)을 나타낸다.
| ReadyProbes™ reagent | 보관 | 필터 | Ex/Em | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|---|---|
| CellEvent® Caspase 3/7 Green | 실온(RT) (≤25°C) | FITC | 495/518 | R37111 |
이차 항체
이차 항체 프로토콜
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샘플 영상>
고정 및 침투 후 세포 염색. CAKI 세포는 Image-iT® FixationPermeabilization Kit를 사용하여 고정 및 침투되었다. 핵(청색)은 NucBlue® Fixed Cell Stain로 염색하고, 액틴 세포골격(녹색)은 ActinGreen™ 488 Reagent, 미토콘드리아(적색)는 anti-OxPhos Complex V 억제제 일차 항체로 라벨을 붙이고 Alexa Fluor® 594 goat anti-mouse IgG antibody로 검출한다.
| ReadyProbes® reagent | 보관 | 필터 | Ex/Em | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|---|---|
| Alexa Fluor® 488 Donkey anti-mouse IgG antibody | 28°C | FITC | 495/518 | R37114 |
| Alexa Fluor® 594 Donkey anti-mouse IgG antibody | 2-8°C | Texas Red® | 590/617 | R37115 |
| Alexa Fluor® 488 Goat anti-rabbit IgG antibody | 2-8°C | FITC | 495/518 | R37116 |
| Alexa Fluor® 594 Goat anti-rabbit IgG antibody | 2-8°C | Texas Red® | 590/617 | R37117 |
| Alexa Fluor® 488 Donkey anti-rabbit IgG antibody | 2-8°C | FITC | 495/518 | R37118 |
| Alexa Fluor® 594 Donkey anti-rabbit IgG antibody | 2-8°C | Texas Red® | 590/617 | R37119 |
| Alexa Fluor® 488 Goat anti-mouse IgG antibody | 2-8°C | FITC | 495/518 | R37120 |
| Alexa Fluor® 594 Goat anti-mouse IgG antibody | 2-8°C | Texas Red® | 590/617 | R37121 |
고정 및 침투 후 세포 염색. CellLight® Mitochondria-GFP를 발현하는 U2OS 세포를 Image-iT® Fixation/Permeabilization Kit를 사용해 고정, 침투시킨다. 액틴 섬유는 Alexa Fluor® 594 phalloidin으로 염색하였고 핵은 NucBlue® Live Cell Stain로 염색하였다.
| ReadyProbes® reagent | Dropper | 보관 | 생존 또는 고정 | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|---|---|
| BackDrop® Background Suppressor | 예 | 실온 (RT) (≤25°C) | Live | R37603 |
| Live Cell Imaging Solution | No | RT (≤25°C) | Live | A14291DJ |
| Image-iT® Fixation/Permeabilization Kit | No | RT (≤25°C) | Fixed | R37602 |
| Image-iT® FX Signal Enhancer | Yes | RT (≤25°C) | Fixed | R37107 |
- Asakawa K et al. (2012) Hair organ regeneration via the bioengineered hair follicular unit transplantation. Scientific Reportsdoi:10.1038/srep00424.
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- Weng A et al. (2012) Saponins modulate the intracellular trafficking of protein toxins. Jour Contr Releasedoi:10.1016/j.jconrel.2012.10.002.
BioProbes® 관련 논문
연구용으로만 사용할 수 있습니다. 인간이나 동물에게 치료 또는 진단 목적으로 사용할 수 없습니다.