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비이온성 all-in-one 세제용액으로 native 단백질을 부드럽게 추출하면서 E.coli 및 다른 세균세포를 기계적으로 파열시키지 않은 상태에서 효율적으로 용해시킵니다. Thermo Scientific™ B-PER™ 완전 세균 단백질 추출 시약은 lysozyme을 이용한 용해시약과 그람 음성균 및 그람 양성균 모두에서 부드럽게 추출할 수 있도록 하는 범용 nuclease가 복합적으로 포함된 all-in-one 제형입니다.
단백질 추출물은 대부분의 단백질 분석과 전형적인 downstream 어플리케이션에 적합합니다. 이러한 시약은 높은 단백질 수율을 제공하며 보통 10-15분만에 샘플 처리를 가능하게 합니다.
Reagent | B-PER Complete Bacterial Protein Extraction Reagent | B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent | B-PER (PBS) Bacterial Protein Extraction Reagent | B-PER II (2X) Bacterial Protein Extraction Reagent |
Compatible sample types | E. coli, B. subtilis | E. coli, B. subtilis | E. coli, B. subtilis | E. coli, B. subtilis |
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Nuclease and lysozyme in formulation? | Yes | No | No | No |
Sample processing time | 15 min | 10–15 min | 10–15 min | 10–15 min |
Works for fresh and frozen cells? | Add EDTA to gram negative fresh cells | Yes | Yes | Yes |
Mechanical disruption required? | No | No, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yield | No, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yield | No, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yield |
Amount of sample processed | 100 g cell paste per 500 mL | 125 g cell paste per 500 mL | 125 g cell paste per 500 mL | 125 g cell paste per 250 mL |
Protein assay compatibility | BCA, Coomassie Plus, Pierce 660, Detergent Compatible Bradford (subtract blank–contains enzymes) | BCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible Bradford | BCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible Bradford | BCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible Bradford |
Downstream compatibility | SDS-PAGE, western blotting & protein purification | SDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins) | SDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins) | SDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins) |
Protease inhibitors recommended? | Yes | Yes | Yes | Yes |
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두 세균세포 용해 시약의 단백질 수율 비교.E.coli ER2566/pLATE51-Klenow, ER2566/pGST-CC-StpA와 ER2566/pGST-Syk 세포 펠렛(0.5 g)을 실온에서 15분간 부드럽게 저으면서 B-PER 완전 시약 또는 EMD Millipore™ BugBuster™ 마스터 믹스 분주액 2.5mL에 재현탁시켰습니다. 4°C에서 20분 동안 16,000 x g에서 원심분리하여 불용성 세포 파편을 제거하였습니다. 가용성 분획에 대한 단백질 수율(농축액)을 Pierce BCA 단백질 분석 키트(Part No. 23225)로 측정하였습니다.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.