Countess Automated Cell Counter 3 FL

Además de contar células, las capacidades de fluorescencia del instrumento Countess 3 FL se utilizan a menudo para evaluar la viabilidad celular, la apoptosis, la eficacia de transfección y la expresión de las proteínas fluorescentes. Sin embargo, las aplicaciones se extienden a cualquier parámetro celular que sea autofluorescente o que pueda etiquetarse con tintes fluorescentes. Encontrará datos que ilustran el control de calidad del cultivo celular, la detección de células CAR-T, la eficacia de edición CRISPR-Cas9 y otras aplicaciones de fluorescencia en Datos de muestras.

Viabilidad celular. La evaluación de la viabilidad celular es un paso clave en el cultivo celular cotidiano y es necesaria para un procesamiento posterior preciso y eficaz. Las opciones de fluorescencia de Countess 3 FL ofrecen un control de viabilidad sensible y específico que se puede realizar rápida y fácilmente antes del análisis de muestras posterior.

Aunque el azul de tripano se utiliza ampliamente para la evaluación de viabilidad en el recuento de células de campo brillante, puede alterar la morfología celular en ciertos casos. Por ejemplo, cuando se tiñen con azul de tripano las CMSP de ratón muertas, estas pueden expandirse y hundirse en un plano focal diferente al de las células vivas, lo que complica la detección y el recuento exactos. Como alternativa de fluorescencia, la tinción de viabilidad verde/roja Invitrogen ReadyCount  contiene naranja acridina y yoduro de propidio (AO/PI) en una combinación optimizada. La tinción fluorescente proporciona una gran sensibilidad y una mayor especificidad del estado vivo/muerto en una población de células mixtas sin alterar la morfología de la célula.

El instrumento Countess 3 FL dispone de dos canales de fluorescencia opcionales, que detectarán los colores fluorescentes determinados por la inserción de cada uno de los cubos de luz. Con 14 cubos de luz intercambiables de los que elegir, el instrumento Countess 3 FL no está limitado a la detección de células que expresan GFP y RFP.

Suponga que está interesado en medir tanto la apoptosis como la viabilidad de las células de una población. Puede utilizar un indicador de apoptosis que mida la activación de la caspasa, como el reactivo de detección CellEvent Caspase-3/7 Green junto con el cubo de luz EVOS GFP 2.0. Además, utilice un tinte de viabilidad como la tinción de células muertas SYTOX Red con el cubo de luz EVOS Cy5 2.0 para medir las células muertas que han progresado más allá de la apoptosis. Esta combinación de tinción, junto con los dos cubos de luz EVOS, ofrece un método múltiplex rápido y sencillo para obtener datos sobre apoptosis y viabilidad.

La tinción de fluorescencia puede proporcionar datos abundantes sobre las células, incluso en muestras heterogéneas, pero puede resultar difícil de optimizar. Los reactivos Invitrogen ReadyCount son tinciones fluorescentes estables de sobremesa, que están preoptimizadas para su uso con los contadores de células automatizados Countess 3.