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Debido al elevado nivel de fondo, la clonación de productos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) largos y de extremo romo puede ser difícil y a menudo produce un bajo porcentaje de recombinantes. Nuestra exclusiva tecnología Zero Background™ utiliza el gen letal ccdB (control de la muerte celular) para permitir una clonación de alta eficacia.
El gen ccdB está incorporado en el sitio de clonación de los vectores Zero Background™. La proteína CcdB envenena a la girasa bacteriana, lo que provoca la degradación del cromosoma de manguera y la muerte celular. Cuando se liga un inserto al vector, el gen ccdB se interrumpe, con lo que solo permite que crezcan las colonias recombinantes. Mediante la eliminación del elevado nivel de fondo de vectores, la tecnología Zero Background™ produce casi un 100 % de recombinantes, lo que le libera de tener que cribar cientos de colonias de fondo.
Los kits de clonación Zero Blunt® ahora incluyen la adición de la ligasa de ADN T4 ExpressLink™ en los kits de clonación Zero Blunt®, la ligación ahora se puede realizar a temperatura ambiente en solo 5 minutos con reacciones que normalmente producen > 80 % de recombinantes que contienen insertos.
Pase de la PCR a la clonación en solo 5 minutos mediante la tecnología Zero Blunt® TOPO®. Zero Blunt® TOPO® produce hasta un 95 % de clones con el inserto adecuado y no se requiere ligasa, procedimientos posteriores a la PCR ni primers de PCR que contengan secuencias específicas.
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