NanoDrop 分光光譜儀的線上及可下載資料

此單元中的手冊、型錄、應用和技術說明、影片、網路研討會及其他資源,將可幫助您充分利用您的 Thermo Scientific NanoDrop One/OneC、Eight、Lite Plus 分光光譜儀或 3300 螢光光譜儀。

 

關於 NanoDrop 2000/2000c、8000、Lite 及 1000 分光光譜儀的類似資料,請參閱此頁面最下方的已停產 NanoDrop 儀器的資源 。


NanoDrop 產品選擇指南

Thermo Scientific NanoDrop 儀器深受全世界科學家的信任,為微量分析樹立標準,能提供準確的核酸和蛋白質樣本濃度,以及樣本純度資訊。

使用 NanoDrop One 定量蛋白質以及在 205 nm 進行胜肽製備

生命科學家能使用 A205 預先編程的直接吸收應用,在 Thermo Scientific NanoDrop One/Oneᶜ Microvolume UV-Vis 分光光譜儀上定量胜肽和蛋白質樣本。

常見問題:NanoDrop One 樣本汙染鑑定

Thermo Scientific NanoDrop One Microvolume UV-Vis 分光光譜儀專為協助科學研究人員成功執行下游應用所設計,僅需 1-2 µL 樣本,即可準確地定量 DNA、RNA 及蛋白質樣本。

生物製藥與生物科學的 UV-Vis 解決方案

瞭解 UV-Vis 分光光譜儀在生物製藥與生物科學研究中最新應用及發展。免費註冊即可觀看五個課程。

研究重點摘要:SARS-CoV-2 研究中的 NanoDrop 分光光譜儀

SARS-CoV-2 是引起 COVID-19 的病毒,該病毒為具外套膜、非分段、單股正向 RNA (+ssRNA) 病毒及 β 冠狀病毒。SARS-CoV-2 病毒生命週期目前尚不清楚,而這是研究感染進展的關鍵步驟。

 

NanoDrop 分光光譜儀是眾多 Thermo Fisher Scientific SARS-CoV-2 研究工具的其中之一,在傳染病研究中扮演著關鍵的角色,因為定量病毒 RNA/DNA 及鑑定汙染物是確保獲得準確下游結果的必要步驟。

簡易、輕鬆、快速執行核酸和蛋白質量化

操作簡單、使用容易可能是 NanoDrop 定量最引人注目的特色。先進的 NanoDrop 臺座系統能將所需的樣本量減至最少,並簡化操作。只要使用移液管移取一滴 DNA、RNA 或蛋白質樣本(只需 1.0–2.0 µL)到臺座上,並將機械臂往下拉。無需比色皿或毛細管,便可在數秒內獲得結果。

1.打開機械臂並將樣本直接移取到臺座上。

2.關上機械臂。樣本柱會形成。

3.臺座會進入自動調整,以達到最佳路徑長度。

4.測量完成時,只要使用實驗室用無塵擦拭紙擦拭表面,就能繼續下一個樣本。


透過 UV 吸光度執行準確的核酸和蛋白質量化

NanoDrop 分光光譜儀根據紫外線-可見光光譜 (UV-Vis) 吸光度原理運作。核酸的吸光波峰在 260 nm。純化蛋白質的吸光波峰在 280 nm,而缺少色胺酸及酪胺酸殘基的蛋白質與胜肽的吸光波峰在 205 nm。提取方法遺留的許多汙染物是在 280 nm 或 230 nm 處吸收。

光學訊號產生

核酸(DNA 及 RNA)和蛋白質的光度測量是以其本質吸收特性為依據。當測量吸收光譜時,核酸的吸光特徵峰在 260 nm。

核酸和蛋白質樣本定量

核酸和蛋白質的濃度是使用比爾─朗伯方程式根據在所需波長下測得的吸光度值自動計算,其中:

  • c = 莫耳濃度 (M)
  • A = UV 吸光度,吸光度單位為 AU
  • e = 波長相依的莫耳吸收係數(消光係數),單位為 M-1cm-1
  • L = 光路徑長度,單位為 cm

比爾─朗伯方程式的其中一個含義是,對於低濃度樣本,較長的路徑長度會導致更高的準確度和訊噪比。NanoDrop 儀器會自動最佳化液體柱的長度,確保各種濃度範圍都能獲得最高準確度。

依據參考儀器驗證 NanoDrop One dsDNA 定量準確性。製備了濃度介於 3–28,000 ng/µL 的一系列 dsDNA 稀釋液,並在 NanoDrop One 和 Evolution 300 分光光譜儀上於 260 nm 以分光光度法進行定量。(A) 圖例顯示整個儀器濃度範圍的線性比較。迴歸線顯示 NanoDrop One dsDNA 濃度結果與在參考 Thermo Scientific Evolution 300 分光光譜儀上取得的值完全一致 (R2 = 0.9991)。(B) 另有提供放大圖例,顯示低濃度範圍(從 3–495 ng/μL 開始)的線性比較。迴歸線顯示與 Evolution 300 結果密切相關 (R2 = 1),而且在檢測範圍的下限具有出色的線性度。關於方法和更多詳細資料,請參閱 NanoDrop One 核酸技術說明

核酸和蛋白質樣本的純度分析

樣本的純度可使用不同波長的吸光度比來評估。樣本汙染可能導致核酸濃度高估及/或下游程序或測量不準確。

 

UV 吸光度的主要純度比

比值

分析物

視為「純」

可能導致比值異常的因素

A260/A280

核酸

DNA:~1.8
RNA:~2.0

低比值表示的汙染物:

·    蛋白質

·    殘餘酚或提取方法中使用的其他試劑

A260/A230

核酸

DNA/RNA:~2.0­–2.2

低比值表示的汙染物:

·    蛋白質

·    碳水化合物殘留(通常是植物的問題)

·    來自核酸提取的殘餘酚

·    殘餘胍(通常用於管柱式套件)

·    用於沉澱的糖原

低比值表示的因素:

·    空白測量發生問題

A260/A280

蛋白質

~0.6

高比值表示的汙染物:

·    核酸

如圖所示,除純度比之外,不純物也會改變光譜曲線,使波峰移動。

汙染物導致光譜曲線移動

無汙染(A,紅色) 的純化 DNA 以及被胍 (B,綠色) 和酚 (C,褐色) 汙染之相同樣本的光譜。

執行 Acclaro Sample Intelligence 的 NanoDrop 儀器可使用這種全光譜資料來鑑定汙染物,如特色所述。


NanoDrop One/Oneᶜ 分光光譜儀的文件

NanoDrop 分光光譜儀影片


NanoDrop 分光光譜儀網路研討會

網路研討會:使用 NanoDrop One UV-Vis 分光光譜儀進行蛋白質樣本評估

蛋白質樣本評估是許多蛋白質工作流程中的重要步驟。此網路研討會說明 NanoDrop 儀器如何簡化流程、比較可用的蛋白質檢測法,以及檢視有助於獲得準確蛋白質量化的最佳實作。

網路研討會:mRNA 疫苗:開發、製造及 NanoDrop Eight 的功用

此網路研討會簡述 mRNA 疫苗歷史和工作流程,並探討 NanoDrop 分光光譜儀如何幫助研究人員及生產工程師評估核酸濃度和純度,同時符合 FDA 21 CFR 第 11 部分的法規要求。

網路研討會:保持藥廠 QA/QC 實驗室的合規

瞭解新的軟體工具如何幫助製藥公司執行高準確度的 QA 測試,同時確保整個藥物開發過程的資料完整性。

網路研討會:NanoDrop 創新及課堂:培育下一代科學家

應用最新科技,為教育帶來改變。聽聽學校教師如何在實驗室和教室內運用 NanoDrop 儀器,為學生提供學習業界領先技術的機會。

網路研討會:定量大豆 DNA 萃取物,以供後續的 GMO(基因改造生物)偵測使用

本次網路研討會概述採用 qPCR 的 GMO(基因改造生物)偵測,並重點介紹 NanoDrop Eight 光譜儀,以確保反應成功。

NanoDrop 分光光譜儀的支援與教育資源

如需在美國及加拿大獲得技術支援,請致電 877-724-7690 轉 4,或將電子郵件寄至 NanoDrop 技術支援 (nanodrop@thermofisher.com)。如需國際協助,請寄電子郵件至 nanodrop@thermofisher.com 或聯絡您的當地 NanoDrop 經銷商

 

瀏覽上方的文件、文獻、影片及網路研討會,可獲得許多技術支援問題的解答。此外,我們還提供免費的線上教育資料,包括學習中心及涵蓋光譜學、蛋白質生物學及核酸定量的頁面。 

 

光譜、元素及同位素分析學習中心

深入瞭解提供快速、高效定性和定量分析的技術,適用於工業、教育、環境及健康等應用領域。核酸和蛋白質量化的相關主題包括 NanoDrop One 教育動畫適用於製藥業的光譜、流變、擠壓及 X 光解決方案

蛋白質生物學學習中心

我們對蛋白質分析方法及技術的免費介紹,包含文章、影片、引導式學習,以及更多有關蛋白質及其研究方法的資源。蛋白質檢測方法總覽 是一個很好的起點。

RNA/DNA 定量頁面

我們的 RNA/DNA 定量頁面對比 UV-Vis 光度測定法與螢光檢測法作為核酸定量方法,並比較 NanoDrop 和 Qubit 儀器以及進行這兩種測量的盤式分析儀。

已停產 NanoDrop 儀器的資源

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NanoDrop 1000 分光光譜儀的資源

NanoDrop 2000/2000c 分光光譜儀的資源

NanoDrop 3300 分光光譜儀的資源

NanoDrop 8000 分光光譜儀的資源

NanoDrop Lite 分光光譜儀的資源