UV-Vis 分光光譜儀資源

在最基本的條件下，分光光譜儀可對整個紫外線及可見光光譜範圍，執行相對光強度的光度比較。引導受控、固定強度光源（鹵素、氘、氙）穿過整個光譜範圍或以特定波長穿過樣本，可輕鬆確認樣本的已知特性或計算其未知特性。入射光 (I₀) 經向後重新定向後成為反射光，遭受能量損失後成為吸收光，穿過透明或半透明樣本後成為透射光。液體中的樣本需要放入試管或比色皿（由與樣本和測量波長相容的塑膠、玻璃或石英組成），然後放入樣本室中的樣本架，才能進行測量。 

光譜儀可以進行不同的光學設置，採用單一、雙重（或分光）或雙光束設置。最簡單且最經濟實惠的裝置依賴從波長選擇器（單光儀或濾光片系統）傳播到檢測器的單一光束，但需要對基線溶劑空白樣本進行單獨測量，才能與樣本的測量進行比較。 雙光束裝置將光束分離為參考光束和樣本光束，從而透過單一檢測器交替收集參考物與樣本之間的資料，實現在相同的儀器條件下測量空白樣本及樣本室中的樣本。雙光束設置同時使用兩個光束和兩個檢測器，能同時測量樣本和參考物。  

固體或溶液形式的樣本可以反射用於分光光譜儀分析的入射光。當表面非常光滑時，可能會產生鏡子般的鏡面反射，其中入射光會以與入射角相等的反射角反射為單束光。粗糙表面和在樣本內散射光的表面會產生漫反射，即使只有一個入射角，也會造成反射，並透過廣大的角度分布消散。使用傳統樣本架測量這些材料的光透射，將會導致只有一部分光線到達檢測器，造成光譜品質下降和資訊遺失。不過，使用積分球配件可以透過將樣本固定在入射點或出射口，收集所有穿過樣本的光進行總透射率測量，或總反射率或漫反射率測量。