猪口腔液样品的采集

用于监测

口腔液可用于监测有疾病症状的动物，也可用于预后分析，以估计病原体在猪群中的传播情况。预后分析不是一种诊断程序，因此不应使用口腔液样品来排除感染。

抗体检测（例如基于 ELISA 方法的检测）— 可以采用口腔液样品检测是否存在抗 PRRSV 抗体。血清学检测不适用于普遍存在的病原体，如 PCV2。

病原体 RNA/DNA 的检测（基于 PCR 方法的检测）—可采用 PCR 方法确认是否存在引起肺炎的病原体（如猪肺炎支原体、PRRSV、SIV 等），但它们的存在并不一定意味着患病。

采样动物的选择

选择哪些动物来采集样品取决于期望得到的结果（请记住，如用于监测目的，其它样品类型可能更可行）：

检测感染—选择具有临床感染症状的动物。

跟踪感染随时间推移的情况（即纵向检查）*—在第 1 天采集第一份样品，并在 2 至 4 周后从同一动物中重复采集样品。

确定不同群体的感染情况（即横向检查）*—从不同年龄群体（如 4、8、12、16、20 和 24 周龄）的动物中采集样品。

* 如果要进行血清学检测，请将所有样品同一批送至实验室，以避免不同批次的检测试剂盒可能会造成的检测结果差异。

样本量

由于缺乏关于口腔液采样诊断敏感性的数据，最终建议的合适的样本量尚未有定论。样本量取决于所观察的单元情况，总之不会比栏水平更细。

假设在特定猪栏内的所有动物都有相同或至少相似的感染状况，那么可以数出群体中个体的数目，然后将这个数字与表 1 中的数字进行对应，可能可作为粗略的指导。采用口腔液检测的动物总数应等于或高于表中对应的样本数。最小样本数为2，以降低实验室检测可能出现的假阴性结果的影响。

样本量的影响因素可能包括疫病在群体内的流行水平、所检测的疫病本身、结果的置信水平、要求的检测方法和采样目的等。

表 1

准备工作

使用一根新的、干净的、未漂白的棉绳，其直径应适合猪只的大小和年龄（对于断奶的仔猪约 1 cm，生长猪/育肥猪约 2 cm）。不要使用合成材质的绳子，因为它们吸收口腔液的能力不如棉花材质。

绳子的长度取决于它被固定在猪栏里的方法：例如，在天花板上固定比系在猪栏围墙上需要的绳子更长。

一根绳子就足以采样 10 到 15 头猪。如果一个猪栏里的猪多于这个数目，那么绳子的数量就必须增加。

每个猪栏均得使用新的绳子。

每份口腔液样本 (5-12 mL) 使用一根无菌收集管。收集管不应含有任何盐类等。

如果是脉冲饲喂（例如液体喂食系统），尝试在饲喂之前或至少 2 小时后进行采样，否则猪会不太活跃，不会对棉绳有太多的注意力。

储存

在运输至实验室前（应在 1 天内完成），样本应储存在冷藏冰箱中。如果无法做到这一点（例如，如果是纵向评估），请将样本冷冻在 -20 至 -80°C 下。

运输

在运送任何样本前，应联系实验室以确认是否有可用于口腔液的经验证的检测方法。对于已针对血清或组织确立的检测，如果未进行进一步验证和调整，不得用于口腔液。

按照联合国法规 (UN 3373)，来自患病动物的材料通常被归类为“生物物质 B 类”。必须按照国家法规和国际航空运输协会 (IATA) 规定的“包装指令 650”（至少在国际运输方面）进行运输。国家法规和 IATA 指令可能会随着时间而改变。如果您对实际法规有疑问，请咨询您的快递公司或实验室。

样本应附带一份病史和检查表，包括：

• 兽医姓名
• 农民/畜群所有者的姓名
• 开票信息
• 采样动物的物种/品种和年龄
• 样本采集日期
• 样本数
• 样本类型
• 样本标识/标记（样本上的编号应与耳标上编号相关）
• 需执行的特定检测，例如“用于 PRRSV 的实时荧光定量 PCR”，而不仅仅是“PRRSV 检测”；或“用于检测抗 PRRSV 抗体的 ELISA”，而不是仅仅是“PRRSV 检测”
• 不需要重复进行的任何先前检测的结果

完整的的背景信息有助于实验室进行适当的检测，并提供相关建议。

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