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AmpFlSTR Identifiler Plus PCR 扩增试剂盒和 AmpFlSTR Identifiler Direct PCR 扩增试剂盒是在单次 PCR 扩增中扩增 15 个四核苷酸重复基因座和釉原蛋白性别决定标记的短串联重复序列 (STR) 多重检测试剂盒。该试剂盒包含组合 DNA 索引系统 (CODIS) 所需的 13 个原始基因座和 2 个附加基因座(D2S1338 和 D19S433),以确保与其他全球数据库要求兼容。
这些试剂盒保持了原有的引物序列,以便与先前使用 Identifiler、Profiler Plus、COfiler 或 SGM Plus 试剂盒进行分型的样品的基因分型保持一致,并有助于与现有 DNA 数据库进行比较。该试剂盒在我们位于英国沃灵顿的工厂生产,该工厂符合 ISO 18385 认证指南的要求,并得到我们综合培训、服务和应用团队的支持。
AmpFlSTR Identifiler Plus PCR 扩增试剂盒是专门为满足法医案件实验室的需求开发而成。它使用的引物与广泛使用的 AmpFlSTR Identifiler PCR 扩增试剂盒的引物相同,并利用新一代 PCR 扩增技术协助提供更高水平的性能、数据质量和效率。使法医分析人员以更可靠的方式从复杂检材中获得更多可解析的结果。
Identifiler Plus 试剂盒和 Identifiler 试剂盒在抑制案件检材上的性能比较。Identifiler 试剂盒无法扩增皮手套中的血样。 Identifiler Plus 试剂盒采用增强型配方,可帮助提供 完整的分析图谱。对于两种试剂盒,均使用 1 ng 起始量 DNA 和 28 个扩增循环。
证明 Identifiler Plus 试剂盒在存在浓度升高的常见 PCR 抑制剂正铁血红素和腐殖酸情况下的性能的研究。即使在最高浓度下, Identifiler Plus 试剂盒也呈现出恢复完整谱图分析的能力。所有重复样品均使用 1 ng 起始量 DNA 和 28 个扩增循环。
使用 Identifiler 试剂盒进行分析时未产生任何图谱,但使用 Identifiler Plus 试剂盒产生高质量、可解读混合物谱的案件检材示例。对于两种试剂盒,均使用 1 ng 起始量 DNA 和 28 个扩增循环。
Identifiler Plus 试剂盒灵敏度提高的图示。此图显示了使用 Identifiler 试剂盒(绿色条)和 Identifiler Plus 试剂盒(橙色条)扩增 28 个循环的对照 DNA 样品的四种不同稀释液获得的平均峰高 (rfu)。 Identifiler Plus 试剂盒的平均峰高约为 Identifiler 试剂盒峰高的 1.7 倍。
28 个扩增循环时 Identifiler 试剂盒、28 个扩增循环时 Identifiler Plus 试剂盒和 29 个扩增循环时 Identifiler Plus 试剂盒的阴性对照品反应比较。 Identifiler Plus 试剂盒采用改进的引物生产工艺,帮助用户获得明显更干净的基线。
AmpFlSTR Identifiler直接PCR扩增试剂盒的开发是为了实现单一来源样本工作流程的前端自动化,简化整个流程,同时最大限度地提高采样的完整性和可靠性。Identifiler Direct 试剂盒通过消除 DNA 提取和纯化中的繁琐步骤,使用简单、易于自动化的方案促进了高通量处理,该自动化平台并不复杂,成本也并不高昂。
使用 Identifiler Direct 试剂盒扩增 FTA 卡上血样的示例。杂合子峰高平均约为 2000 rfu。
从液体血液中提取的 DNA(使用 6100 平台上的 Applied Biosystems BloodPrep 化学),与固定在 FTA 卡上的相同血样相比,使用 Identifiler 试剂盒扩增 1 ng,并使用 Identifiler Direct 试剂盒直接扩增。
整合四家美国检测中心实验室的分析结果,这些实验室使用 Identifiler Direct 试剂盒对 FTA 卡上的血液和口腔样品进行检测。
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