FluxOR™
  • K+ 通道特异性—测定电压门控和配体门控钾通道中的离子通量
  • 快速—在高通量模式下测量钾通量并获得高度可重现的结果
  • 药理学相关性—已知的阻滞剂在宽信号窗口内显示出剂量依赖性抑制
FluxOR™ 钾离子通道检测是钾离子通道和转运体活性高通量筛选 (HTS) 的新一代解决方案。FluxOR 检测试剂盒利用钾通道对铊 (Tl+) 离子的良好渗透性并使用新型改良指示剂染料，该染料可产生更大的信号窗口并显著改善提高检测的灵敏度。由于涵盖超过80种不同的钾离子通道亚型，该检测试剂盒报告的荧光信号可作为对铊具有渗透性的任何离子通道或转运体（包括 hERG、Kv1.3、Kir2.1、KATP 以及 >80 种不同钾离子通道基因产物中的其他产物）活性的替代读数。已使用在96孔、384孔和1,536孔板中稳定或瞬时表达钾通道的细胞对 FluxOR 检测试剂盒进行了验证。
 

检测原理

为运行检测，在细胞中上样非荧光、铊特异性 FluxOR™ 染料（图1）。将要筛选的药物与细胞一起预孵育，然后将微孔板装入读取器中，在读取器内的微孔板中注入含有低浓度铊离子的刺激物缓冲液。作为 K+ 的替代物，铊离子可自由穿过开启的钾通道。当钾通道受到刺激时，铊流入细胞中并与 FluxOR™ 染料结合，在生理盐水条件下产生与通道活性成正比的荧光信号。 经证明，FluxOR 检测试剂盒可在包括 Kv1.3（图2）、Kv7.2/Kv7.3（图3）、Kv11.1 (hERG)（图4）、Kir1.1、Kir2.1、Kv1.1、Kv2.1（数据未显示）在内的多个钾离子通道的检测中获得可靠结果。



图1.  FluxOR™ 检测试剂盒的原理。在已添加 FluxOR™ 染料的细胞中，钾通道受刺激之前的基础荧光水平很低，如左图所示。将铊和刺激物一起加入检测试剂盒后，铊沿其浓度梯度从高到低流入细胞，从而激活染料，如右图所示。

 

 FluxOR 钾离子通道检测试剂盒FluxOR II 绿色钾离子通道检测试剂盒FluxOR 红色钾离子通道检测试剂盒
检测原理使用铊 (Tl+ ) 离子作为钾离子的替代物。将铊添加到细胞外溶液中，钾通道开启，铊沿其浓度梯度从高到低流入细胞，使用可增加胞质荧光的专有指示染料检测通道或转运体活性
性能 改良的指示染料可提高信号背景比和检测灵敏度发射红光，可与 GFP 表达或其他绿色荧光检测试剂盒组合使用
标准滤光片组FITCRFP
激发/发射波长490/525490/525560/590
检测方案洗涤洗涤和不洗涤洗涤
可用规格10个微孔板100个微孔板2个微孔板10个微孔板100个微孔板2个微孔板10个微孔板
货号F10016F10017F20015F20016F20017F20018F20019

仅供科研使用，不可用于诊断目的。

仅供科研使用，不可用于诊断目的。

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