在同一个平台上进行多重基因和蛋白质分析

Luminex 平台使研究人员能够在不影响质量或灵敏度的情况下将定量蛋白和基因表达工作流程结合在一起。Invitrogen ProcartaPlex 和 Invitrogen QuantiGene Plex 检测可利用 Luminex 检测仪器平台实现独特的高通量多组学方法。Luminex 检测仪器旨在利用 xMAP 技术对单个小体积样品中的多种分析物进行定量分析。QuantiGene Plex 和 ProcartaPlex 检测可分别测量多达80种 RNA 或蛋白靶标。这两个测定平台均提供预混和定制试剂盒。了解如何利用我们的 QuantiGene Plex 和 ProcartaPlex 选择工具构建定制试剂盒。


xMAP 液体芯片技术

Luminex xMAP(液态芯片)技术将先进的流控技术、光学技术和数字信号处理技术与专有的微球技术相结合,实现多重测定能力。xMAP 液体芯片技术使用荧光标记的微球或微珠,可实现在单次反应中同时采集多达80种蛋白质分析物或80种基因。 Invitrogen QuantiGene Plex 和 ProcartaPlex 检测利用 xMAP 技术进行多种蛋白质和核酸的多重测定。

 

这些微球可使用四个 Luminex xMAP 仪器平台之一进行读取——INTELLIFLEX、Luminex 200 ( LX200)、FLEXMAP 3D 和 MAGPIX。这些仪器使用基于荧光流式细胞术或定量荧光显微术原理的分析仪,用于满足各种研究规模实验室的需求。


在 Luminex 平台上使用 ProcartaPlex 进行蛋白检测

ProcartaPlex 多因子免疫检测是基于微球的检测,利用 Luminex xMAP 液体芯片技术进行基于夹心 ELISA 原理的蛋白定量分析。ProcartaPlex 可用于血清、血浆、细胞和组织裂解物、细胞培养上清液,并且还适用于其他体液。提供96孔和384孔规格,覆盖六个物种:人、小鼠、大鼠、非人灵长类、猪和犬类。

 

可为您的研究从发现到具体筛查的每个阶段提供预混和定制检测。微球组合也可作为单个分析物的单因子试剂盒提供,以保持测定组合之间的一致性。

ProcartaPlex 是如何工作的?

(A) ProcartaPlex 利用 xMAP 液体芯片技术在每孔中同时测量多达80种不同的蛋白质分析物。捕获抗体与内部标记的 Luminex 微球结合。特异性抗体与不同微球的结合可用于分析单个孔中的多种分析物,例如 IL-9 是通过12号微球区域捕获的。 (B) 样品与微球组合混合。样品内的目标分析物与捕获抗体结合。加入对目标分析物特异的荧光标记(藻红蛋白)检测抗体,从而形成抗体-抗原夹心。 (C) 在 Luminex 仪器上读取完成测定,其中一个激光器对微球类型进行分类以确定正在检测的分析物,而第二个激光器确定结合分析物的数量(PE 来源信号)。


在 Luminex 平台上使用 QuantiGene Plex 进行的基因表达检测

与 QuantiGene Plex 配合使用时,Luminex 仪器和微球平台还可用于研究基因表达。QuantiGene Plex 利用分支 DNA (bDNA) 技术,该技术使用信号扩增而不是靶标扩增来直接测量 RNA 转录物。简单易用,具有类似 ELISA 的简单工作流程。

 

QuantiGene Plex 兼容多种棘手的样品类型,包括 FFPE 组织中降解和交联的 RNA 和血液。由于无需 RNA 纯化,因此可保护珍贵样品。最多可在96或384孔板的同一孔中筛选80个基因,从而最大限度地提高数据的输出。


用于蛋白质和 RNA 检测的定制选择工具

使用 Luminex 仪器还可使用您自己设计的蛋白质靶标进行多重免疫测定。选择物种、规格和任意靶标数量,即可根据您的具体要求构建定制试剂盒。

对于 QuantiGene Plex 基因表达探针选择工具,您可以对定制多重 RNA 或 DNA 测定探针组合进行询价。使用关键字搜索工具或通过导入您自己的文本文件将靶标添加到您的测定组合,保存或导出测定组合以供日后参考,并询价。

Luminex 检测仪器特性

Luminex 检测仪器的液流系统

Luminex 检测系统通过流式细胞术检测单个微球。读数仪的液流系统在微球进入鞘液流时,将微球排列成单行纵列,然后进入流动池。微球一旦在流动池内形成单行纵列,每个微珠都会被单独检测以了解微球颜色(分析物)和检测信号强度(PE 荧光强度)。这种成熟的技术可确保采集到所有的数据。

高灵敏度激光检测

激光检测灵敏度高,能检测出极少量分析物。读数仪使用 532 nm 绿色激光("检测"激光)来激发 PE 染料(链霉素亲和素-PE)。635 nm 固态激光(红色"归类"激光),用于激发微球内部的染料,以确定其"颜色"或"区域",也用于通过光散射进行的双重鉴别。xMAP INTELLIFLEX DR-SE 系统具有额外的紫色 (405 nm) 报告激光,每个微球区域可以检测多达两个参数。

检测器

这些读数仪有若干检测器,每个光路各一个。检测器用于测量荧光、归类微球 (1-500) 以及分辨单个与聚合的微球。在计算机上收集结果。

高通量

ProcartaPlex 和 QuantiGene Plex 提供384孔板规格,采用 xMAP INTELLIFLEX 和 FLEXMAP 3D 系统读取即可实现高通量检测。可在单个孔中测量多达80个蛋白质或基因,以获得大量样品的完整数据信息。在一个孔内进行整个通路,或进行筛选化合物、测量免疫应答等操作时可获得更丰富的数据信息。


仅供科研使用。不可用于诊断程序。