AKT也称为蛋白激酶B (PKB)或RAS-α,是一种普遍存在的丝氨酸/苏氨酸激酶,PI3K/AKT信号通路在调节代谢、细胞存活和生长等多种生物反应中发挥重要作用。这种蛋白激酶被胰岛素、PI3K、IGF1和其他生长因子激活。AKT信号通路通过几个靶标(包括Foxp和caspase-9)的磷酸化和失活来抑制细胞凋亡,从而促进细胞存活。AKT信号通路是发现和研究癌症药物的主要靶标。Invitrogen AKT信号通路抗体旨在可靠地检测关键的AKT靶标。每种抗体都经过验证可用于各种应用。

主要的AKT信号通路靶标包括:

ATK信号通路抗体应用实例

FGFR1的免疫组织化学分析

该图显示免疫组织化学分析FGFR1 (pYpY653/654) 在石蜡包埋的人肾组织的细胞质和细胞膜(右)与没有一抗处理的阴性对照(左)对比结果。微波加热 8-15 分钟暴露靶蛋白,然后使用 10mM 柠檬酸钠 (pH 6.0) 进行抗原修复。抗原修复后,组织在 3% H2O2-甲醇中室温封闭 15 分钟,用 ddH2O 和 PBS 洗涤,接着用 3% BSA-PBS 对Phospho -FGFR1 (Tyr53, Tyr654) 多克隆抗体(货号 44-1140G)进行1:100稀释,在 4°C 孵育过夜。样本接着在 PBST 中彻底洗涤,使用 HRP 二抗进行检测,然后使用 DAB 试剂盒进行比色检测。组织用苏木精复染并用乙醇和二甲苯脱水,样本待分析。

FOXO3 的蛋白质印迹分析

蛋白质印迹分析 MCF7(条带 1)和 Hep G2(条带 2)的全细胞提取物(30 µg 裂解物)。使用FOXO3 多克隆抗体(货号 PA5-27145, 1 µg/mL) 和Goat anti-Rabbit IgG (H+L), Superclonal Recombinant Second Antibody, HRP (货号 A27036,0.25 µg/mL,1:4,000 稀释)进行孵育并化学发光检测。结果显示条带大小为71 kDa 的FOXO3A被成功检测 。

流式细胞术分析p-4EBP1(Thr37)

使用 0.1 µg 的 Phospho-4EBP1 (Thr37) Recombinant Rabbit Monoclonal Antibody (52H37L2)(货号 700238)通过流式细胞术检测 Jurkat 细胞中的p-4EBP1(Thr37) 。使用 FIX 和 PERM(货号 GAS-004)试剂固定和透化细胞,并使用 Alexa Fluor 488 山羊抗兔 IgG孵育,流式检测不含一抗的对照(灰色)和一抗处理的样本(黑色)。磷酸肽预孵育会导致信号明显降低(蓝色),而非磷酸肽孵育则信号降低不多(红色)。