结构光照明显微镜检查 (SIM)

利用荧光蛋白进行活细胞标记

因为 SIM 可以用于较厚切片和活细胞成像，所以许多出版物展示了荧光蛋白在高分辨率研究（使用 GFP 或 tagRFP）中的应用。Molecular Probes® CellLight® 试剂是一种靶向特定亚细胞结构的即用型荧光蛋白构建体（GFP 或 tagRFP）。这些试剂为在活细胞内引入靶向细胞内标记提供了一种简单有效的方法。线粒体、溶酶体、膜、细胞骨架和细胞核等特定细胞器都可以在活细胞中或固定后使用 CellLight® 试剂进行显像。CellLight® 试剂在活细胞中可以结合多种荧光基团进行多重检测，也可以使用免疫荧光技术进行固定和成像。

• 使用下面的 SIM 产品选择指南查找这些活细胞标记产品

抗体偶联物和标记

Molecular Probes® 荧光基团已在 SIM 应用中作为抗体偶联物（适用于固定细胞应用）以及蛋白、葡聚糖或其他生物分子的偶联物（适用于固定的细胞或活细胞）经过了反复试验和测试。使用下表，为您的应用选择具有最佳波长和 SIM 等级的荧光基团——每项均列出了文献列表。多种 Alexa Fluor® 探针在该应用中表现出色。根据链接，您还可以找到目前可靶向您目标分子的每个荧光基团的所有生物偶联物；列表范围包括抗体和鬼笔环肽到生长因子和凝集素。如果您在列表中未找到所需的偶联物，链接中还包括活性染料表单或优化的标记试剂盒，您可借此创建自己的生物偶联物探针。

• 使用下面的 SIM 产品选择指南查找抗体偶联物和标记

DNA 染色剂

DAPI 是最常用的 DNA 染色试剂之一，非常适合 SIM 应用。由于与 DNA 的高度亲和力，DAPI 也经常用于细胞计数、细胞凋亡检测，也可作为高内涵成像分析中的细胞核分割工具。由于 DNA 含量高，DAPI 的有限亮度也可产生足够的信号，且蓝色荧光与 FITC 通道中的信号分离良好。由于 DAPI 不透过细胞，一般用于对固定细胞进行染色，但在较高浓度下使用时该染色剂也会进入活细胞。

• 使用下面的 SIM 产品选择指南查找 DAPI DNA 染色剂

细胞器染色剂

有机染料易于与荧光蛋白配合使用进行多重检测，用于活细胞或固定细胞成像，一些细胞器特异性探针适用于这两种情况。MitoTracker® Red 染料是一种远红外荧光染料，可染色活细胞中的线粒体，其蓄积取决于膜电位。它可以作为有效的 SIM 探针，且在固定后保留在细胞内。

CellMask™ 橙色细胞膜染色剂能够快速、均匀地标记细胞膜，而且不同类型细胞间亦未表现出凝集素染色差异。该染色剂通常用作 HCS（高内涵筛选）的分隔工具，也可在标准荧光显微镜检查中用于细胞膜染色——也非常适合 SIM。该染色剂可固定，但不可透化，因此不适于通过抗体检测内部靶标的实验。

• 使用下面的 SIM 产品选择指南查找这些细胞器染色剂