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Thermo Scientific Nunc 温度感应细胞培养表面
Thermo Scientific Nunc UpCell 表面
UpCell 表面是一种温度响应性细胞培养表面，可实现贴壁细胞的非酶收获，保存细胞活力并保留表面蛋白。
只需借助支撑膜，将培养容器转移到室温下收集悬浮形式或"细胞层"形式的细胞即可。
了解如何使用我们的 UpCell 表面仅通过降低温度即可收获细胞，并了解 UpCell 产品与传统表面、添加剂和涂层相比的优势。
Nunc UpCell 表面特征：
- 无需胰蛋白酶——保留细胞表面蛋白
- 无需刮取——有助于提高细胞活力
- 设计用于培养传代、单细胞分析和细胞移植研究
- 支撑膜选件便于收获细胞层和创建 3D 组织模型
- 60mm 和 100mm 培养皿内有 3 x 3mm 的网格设计，有助于防止细胞聚集，并实现单细胞悬浮收获
UpCell 表面工作原理是什么？
将温度响应性聚（N-异丙基丙烯酰胺）（PNIPAAm）聚合物接枝到标准的经细胞培养处理的聚苯乙烯表面上。在 37℃ 下，共价结合的聚合物允许细胞黏附在培养皿上并正常生长。在室温下，PNIPAAm 与水结合并溶胀，释放贴壁细胞和细胞外基质。将细胞与不含胰蛋白酶的培养底物分离。
Nunc UpCell 表面应用
保留表面膜蛋白
酶解法细胞分离会影响细胞表面蛋白的完整性。Nunc UpCell 表面设计用于较大程度保留细胞表面蛋白。
图：灰色峰向右移动表明通过 Nunc UpCell 表面的降温收获方式，可保留细胞表面分子 CD140a。
细胞层收获和工程
细胞层可保护细胞极化，并且通过正常的细胞间连接和细胞外基质聚集在一起。使用 Thermo Scientific Nunc UpCell 表面从培养器皿中收获的细胞层可以：
- 进行体外分析，例如通过电子显微镜检查
- 重新铺板到带有 UpCell 表面的培养器皿或传统细胞培养器皿上
- 用于不同移植模型
- 堆叠在另一个细胞层的顶部，用于细胞层工程
使用带 Thermo Scientific Nunc UpCell 表面的培养器皿制备的细胞层构建体可以：
- 进行体外分析，例如通过功能性组织特异性检测
- 进行体外培养，例如作为 3D 共培养物
- 用于不同的移植模型，其中在移植过程之前或期间，将细胞层堆叠在一起
UpCell 表面可实现收获的细胞层堆叠在一起以形成 3D 组织模型。让细胞增殖并汇合在带有 UpCell 表面的培养器皿内，收获细胞层，并将细胞层转移至其他细胞层。无需细胞支架！
使用通过降温方式收获的细胞层的应用示例
| 细胞类型 | 应用 | 参考文献 |
|---|---|---|
| 主动脉内皮细胞（牛） | 分析（结构和基质沉积） | Kushida 等人，1999年 |
| 角质化细胞（人） | 分析（电子显微镜检查） | Yamato 等人，2001年 |
| 尿路上皮细胞（人） | 分析（电子显微镜检查） | Shirayanagi 等人，2003年 |
| 视网膜色素上皮细胞系 ARPE-19（人） | 分析（光学显微镜检查） | Kubota 等人，2006年 |
| 肾上皮细胞（人和犬） | 重新铺板到传统培养器皿上&分析（电子和荧光显微镜检查） | Kushida 等人，2005年 |
| 肺细胞（大鼠） | 重新铺板到传统培养器皿上&分析（荧光显微镜检查） | Nandkumar 等人，2002年 |
| 平滑肌细胞&成纤维细胞（人） | 重新铺板到 PIPAAm 表面上&分析（功能性）&移植 | Hobo 等人，2008年 |
| 间充质干细胞&皮肤成纤维细胞（大鼠） | 分析（结构性和功能性）&移植 | Miyahara 等人，2006年 |
| 角膜干细胞（人和兔） | 分析（结构性）&移植 | Nishida 等人，2004年 |
| 角膜内皮细胞（人） | 分析（结构性和功能性）&移植 | Sumide 等人，2006年 |
| 口腔黏膜上皮细胞（犬） | 分析（结构性）&移植 | Ohki 等人，2006年 |
| 气管上皮细胞（兔） | 移植 | Kanzaki 等人，2006年 |
| 牙周韧带细胞（人） | 移植 | Hasegawa 等人，2005年 |
| 间充质干细胞（人） | 移植 | Cho 等人，2020年 |
使用通过降温方式收获的细胞层进行细胞层工程的示例
| 细胞类型 | 应用 | 参考文献 |
|---|---|---|
| 主动脉内皮细胞（人） | 培养（3D 共培养）&分析（结构性） | Harimoto 等人，2002年 |
| 肝细胞（小鼠和人） | 移植过程中的分析（结构性和功能性）&堆叠 | Ohashi 等人，2007年 |
| 骨骼肌成肌细胞（犬） | 移植过程中的分析（结构性）&堆叠 | Hata 等人，2006年 |
| 肺和皮肤成纤维细胞（大鼠） | 移植过程中的分析（结构性）&堆叠 | Kanzaki 等人，2007年 |
| 心肌细胞（大鼠） | 移植前的培养&分析（结构性和功能性）&堆叠 | Sekiya 等人，2006年；Shimizu 等人，2002年和2006年 |
收获高度功能性 APC
抗原递呈细胞（APC）是一组免疫细胞，通过处理并递呈抗原以供 T 细胞识别来介导细胞免疫反应。树突状细胞和巨噬细胞都是需要黏附到细胞培养容器上才能生长的 APC。胰蛋白酶化可能会损伤细胞膜并导致 APC 过早活化，从而可能降低抗原递呈功能。Nunc UpCell 表面不使用胰蛋白酶即可分离 APC，生成具有完整膜蛋白的高活性细胞，并最终改善细胞功能。
从 Nunc UpCell 表面收获的树突状细胞表现出更高水平的表面标志物。通过流式细胞分析检测标记蛋白水平。
Nunc UpCell 表面可实现更高效分离高活性树突状细胞。
温和地通过降温方式收获高活性巨噬细胞。通过降温（适用于 UpCell 表面）或传统酶解法（胰蛋白酶化）或机械（刮取）方法收获小鼠腹腔巨噬细胞。然后对细胞计数并计算回收率。显示均值和标准差。
保留表面膜蛋白
酶解法细胞分离会影响细胞表面蛋白的完整性。Nunc UpCell 表面设计用于较大程度保留细胞表面蛋白。
图：灰色峰向右移动表明通过 Nunc UpCell 表面的降温收获方式，可保留细胞表面分子 CD140a。
细胞层收获和工程
细胞层可保护细胞极化，并且通过正常的细胞间连接和细胞外基质聚集在一起。使用 Thermo Scientific Nunc UpCell 表面从培养器皿中收获的细胞层可以：
- 进行体外分析，例如通过电子显微镜检查
- 重新铺板到带有 UpCell 表面的培养器皿或传统细胞培养器皿上
- 用于不同移植模型
- 堆叠在另一个细胞层的顶部，用于细胞层工程
使用带 Thermo Scientific Nunc UpCell 表面的培养器皿制备的细胞层构建体可以：
- 进行体外分析，例如通过功能性组织特异性检测
- 进行体外培养，例如作为 3D 共培养物
- 用于不同的移植模型，其中在移植过程之前或期间，将细胞层堆叠在一起
UpCell 表面可实现收获的细胞层堆叠在一起以形成 3D 组织模型。让细胞增殖并汇合在带有 UpCell 表面的培养器皿内，收获细胞层，并将细胞层转移至其他细胞层。无需细胞支架！
使用通过降温方式收获的细胞层的应用示例
| 细胞类型 | 应用 | 参考文献 |
|---|---|---|
| 主动脉内皮细胞（牛） | 分析（结构和基质沉积） | Kushida 等人，1999年 |
| 角质化细胞（人） | 分析（电子显微镜检查） | Yamato 等人，2001年 |
| 尿路上皮细胞（人） | 分析（电子显微镜检查） | Shirayanagi 等人，2003年 |
| 视网膜色素上皮细胞系 ARPE-19（人） | 分析（光学显微镜检查） | Kubota 等人，2006年 |
| 肾上皮细胞（人和犬） | 重新铺板到传统培养器皿上&分析（电子和荧光显微镜检查） | Kushida 等人，2005年 |
| 肺细胞（大鼠） | 重新铺板到传统培养器皿上&分析（荧光显微镜检查） | Nandkumar 等人，2002年 |
| 平滑肌细胞&成纤维细胞（人） | 重新铺板到 PIPAAm 表面上&分析（功能性）&移植 | Hobo 等人，2008年 |
| 间充质干细胞&皮肤成纤维细胞（大鼠） | 分析（结构性和功能性）&移植 | Miyahara 等人，2006年 |
| 角膜干细胞（人和兔） | 分析（结构性）&移植 | Nishida 等人，2004年 |
| 角膜内皮细胞（人） | 分析（结构性和功能性）&移植 | Sumide 等人，2006年 |
| 口腔黏膜上皮细胞（犬） | 分析（结构性）&移植 | Ohki 等人，2006年 |
| 气管上皮细胞（兔） | 移植 | Kanzaki 等人，2006年 |
| 牙周韧带细胞（人） | 移植 | Hasegawa 等人，2005年 |
| 间充质干细胞（人） | 移植 | Cho 等人，2020年 |
使用通过降温方式收获的细胞层进行细胞层工程的示例
| 细胞类型 | 应用 | 参考文献 |
|---|---|---|
| 主动脉内皮细胞（人） | 培养（3D 共培养）&分析（结构性） | Harimoto 等人，2002年 |
| 肝细胞（小鼠和人） | 移植过程中的分析（结构性和功能性）&堆叠 | Ohashi 等人，2007年 |
| 骨骼肌成肌细胞（犬） | 移植过程中的分析（结构性）&堆叠 | Hata 等人，2006年 |
| 肺和皮肤成纤维细胞（大鼠） | 移植过程中的分析（结构性）&堆叠 | Kanzaki 等人，2007年 |
| 心肌细胞（大鼠） | 移植前的培养&分析（结构性和功能性）&堆叠 | Sekiya 等人，2006年；Shimizu 等人，2002年和2006年 |
收获高度功能性 APC
抗原递呈细胞（APC）是一组免疫细胞，通过处理并递呈抗原以供 T 细胞识别来介导细胞免疫反应。树突状细胞和巨噬细胞都是需要黏附到细胞培养容器上才能生长的 APC。胰蛋白酶化可能会损伤细胞膜并导致 APC 过早活化，从而可能降低抗原递呈功能。Nunc UpCell 表面不使用胰蛋白酶即可分离 APC，生成具有完整膜蛋白的高活性细胞，并最终改善细胞功能。
从 Nunc UpCell 表面收获的树突状细胞表现出更高水平的表面标志物。通过流式细胞分析检测标记蛋白水平。
Nunc UpCell 表面可实现更高效分离高活性树突状细胞。
温和地通过降温方式收获高活性巨噬细胞。通过降温（适用于 UpCell 表面）或传统酶解法（胰蛋白酶化）或机械（刮取）方法收获小鼠腹腔巨噬细胞。然后对细胞计数并计算回收率。显示均值和标准差。
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