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基于荧光的蛋白定量检测方法具有卓越的灵敏度,因此您可以使用更少的蛋白样本进行定量而将更多的样本用于您的实验。此外,当由于样本中存在颜色干扰无法使用比色检测试剂盒时,可以使用基于荧光的检测试剂盒。对于下述检测试剂盒,需要的步骤很少,且时间不是关键因素,因此这些检测试剂盒可适应高通量应用中的自动化处理。可使用荧光计或微孔板读数仪检测荧光信号。
Qubit 蛋白 BR 检测试剂盒 | Qubit 蛋白检测试剂盒 | NanoOrange 蛋白定量检测试剂盒 | CBQCA 蛋白定量检测试剂盒 | EZQ 蛋白定量检测试剂盒 | |
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最佳用途 | 迅速定量少量样本 | 快速定量少量样本 | 稀释样本或样本量有限的样本 | 稀释样本或样本量有限且含去污剂或脂质的样本 | 通过固相检测试剂盒形式实现高通量分析 |
检测范围(样本量) | 100 µg/mL 至 20 mg/mL (10–20 µL) | 12.5 µg/mL 至 5 mg/mL (1–20 µL) | 10 ng/mL 至 10 µg/mL(高达 10 µL) | 10 ng/mL 至 150 µg/mL | 20 µg/mL 至 5 mg/mL (1 µL) |
检测试剂盒孵育时间和温度 | 室温下 10 min | 室温下 15 min | 90–95°C 下 10 min | 室温下 1 h | 室温下 1 h |
检测波长 (nm) | 470/570 | 470/570 | 470/570 | 465/550 | 280和450/618 |
所需设备 | Qubit 4 荧光计 | Qubit 荧光计 | 荧光计或荧光微孔板读数仪 | 荧光计或荧光微孔板读数仪 | 荧光微孔板读数仪、基于激光的扫描系统或 CCD 成像系统 |
兼容试剂 | 去污剂、还原剂、盐 | 还原剂、盐 | 还原剂、尿素、盐 | 去污剂、还原剂(低于 100 µM) | 还原剂、去污剂、尿素 |
不兼容试剂 | 甘氨酸 | 去污剂 | 去污剂 | 铵盐、胺类(如 Tris 或甘氨酸) | |
标准曲线 | 2点 | 3点 | 5点 | 5至7点 | 5点 |
信号持续时间 | 1 h | 3 h | 6 h | 5 h | --- |
检测原理 | 与蛋白中的伯胺(赖氨酸中发现的 N 末端和 ε 胺)反应 | 与包被在蛋白上的去污剂和蛋白的疏水性区域结合;未结合染料不发荧光 | 与包被在蛋白上的去污剂和蛋白的疏水性区域结合;未结合染料不发荧光 | 在存在氰化物或硫醇的情况下与蛋白上的伯胺基团反应;未反应的染料不发荧光 | 静电结合碱性氨基酸,并辅以额外的疏水相互作用 |
货号 | A50668 (100次检测) A50669 (100次检测) | Q33211 (100次检测) Q33212 (500次检测) | N6666 | C6667 | R33200 |
查看 Molecular Probes 手册,发现关于如何使用这些检测试剂盒的更多信息
Qubit 蛋白 BR 检测试剂盒 | Qubit 蛋白检测试剂盒 | NanoOrange 蛋白定量检测试剂盒 | CBQCA 蛋白定量检测试剂盒 | EZQ 蛋白定量检测试剂盒 | |
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最佳用途 | 迅速定量少量样本 | 快速定量少量样本 | 稀释样本或样本量有限的样本 | 稀释样本或样本量有限且含去污剂或脂质的样本 | 通过固相检测试剂盒形式实现高通量分析 |
检测范围(样本量) | 100 µg/mL 至 20 mg/mL (10–20 µL) | 12.5 µg/mL 至 5 mg/mL (1–20 µL) | 10 ng/mL 至 10 µg/mL(高达 10 µL) | 10 ng/mL 至 150 µg/mL | 20 µg/mL 至 5 mg/mL (1 µL) |
检测试剂盒孵育时间和温度 | 室温下 10 min | 室温下 15 min | 90–95°C 下 10 min | 室温下 1 h | 室温下 1 h |
检测波长 (nm) | 470/570 | 470/570 | 470/570 | 465/550 | 280和450/618 |
所需设备 | Qubit 4 荧光计 | Qubit 荧光计 | 荧光计或荧光微孔板读数仪 | 荧光计或荧光微孔板读数仪 | 荧光微孔板读数仪、基于激光的扫描系统或 CCD 成像系统 |
兼容试剂 | 去污剂、还原剂、盐 | 还原剂、盐 | 还原剂、尿素、盐 | 去污剂、还原剂(低于 100 µM) | 还原剂、去污剂、尿素 |
不兼容试剂 | 甘氨酸 | 去污剂 | 去污剂 | 铵盐、胺类(如 Tris 或甘氨酸) | |
标准曲线 | 2点 | 3点 | 5点 | 5至7点 | 5点 |
信号持续时间 | 1 h | 3 h | 6 h | 5 h | --- |
检测原理 | 与蛋白中的伯胺(赖氨酸中发现的 N 末端和 ε 胺)反应 | 与包被在蛋白上的去污剂和蛋白的疏水性区域结合;未结合染料不发荧光 | 与包被在蛋白上的去污剂和蛋白的疏水性区域结合;未结合染料不发荧光 | 在存在氰化物或硫醇的情况下与蛋白上的伯胺基团反应;未反应的染料不发荧光 | 静电结合碱性氨基酸,并辅以额外的疏水相互作用 |
货号 | A50668 (100次检测) A50669 (100次检测) | Q33211 (100次检测) Q33212 (500次检测) | N6666 | C6667 | R33200 |
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仅供科研使用,不可用于诊断目的。