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显色蛋白质印迹检测
与化学发光或荧光印迹应用不同，显色底物不需要使用特殊设备即可看到分析结果。我们提供多种显色底物，满足您的不同实验需求。
1-Step Ultra TMB底物
| 蓝色沉淀物 |
|---|
| 检测限：20 pg |
| 颜色：深蓝色 |
| 推荐抗体稀释比（1 mg/ml 储备液）： 1°: 1:1,000 2°: 1:5,000-1:10,000 |
| 特点：即用型溶液 |
通过处理膜以增强信噪比
| Thermo Fisher Scientific 产品 | 描述 | 订购 |
|---|---|---|
| SuperSignal 蛋白质印迹增强剂 | 含膜处理试剂和一抗稀释剂，与未使用该试剂时相比，信号强度和灵敏度都提高了 3 到 10 倍。 | 46641 |
1-Step NBT/BCIP底物
| 即用型溶液 |
|---|
| 检测限：30 pg |
| 颜色：黑紫色 |
| 推荐抗体稀释比（1 mg/ml 储备液）： 1°: 1：500 2°: 1:5,000-1:50,000 |
| 何时使用：搭配碱性磷酸酶标记的抗体或探针 |
AP 底物的相关产品
显色或沉淀底物已广泛使用多年，是一种最简单且最具成本效益的蛋白质印迹检测方法。当这些底物与适当的酶接触时，它们转化为沉淀在膜上的不溶性有色产物。由此产生的有色条带或斑点印迹不需要特殊设备进行处理或显色。显色印迹底物有多种规格和包装形式。选择适合的底物需要考虑酶标记物、所需灵敏度，以及所需信号形式或检测方法。
主要优势
- 无需特殊仪器
- 检测高丰度靶点最划算的选择
用辣根过氧化物酶（HRP）进行蛋白质印迹的显色底物
显色 HRP 蛋白质印迹最常使用的底物有 TMB、4-CN 和 DAB。
3,3’,5,5'-四甲基联苯胺（TMB）分子量为 240.4，最常用作 ELISA 中的 HRP 底物。然而，在 HRP 和过氧化物存在的情况下，产生可沉淀在膜上的水溶性蓝色产物。Thermo Scientific 1-Step Ultra TMB-Blotting 底物溶液是一种单组分过氧化物酶底物，用于蛋白质印迹和免疫组化。产物的沉淀导致酶所在之处出现深蓝色条带。 1-Step TMB-Blotting 底物溶液尤其适用于需要高信噪比的应用。
4-氯-1-萘酚（4CN）的分子量为 178.6，可用于印迹和免疫组化中 的HRP显色检测。该沉淀物不如 TMB 和 DAB 灵敏和稳定，但醇溶性沉淀物显像良好并具有明显的蓝紫色，有助于双染色分析。
另一种广泛使用的 HRP 底物是 3,3'-二氨基联苯胺（DAB），分子量为 214.1，在 HRP 和过氧化物存在的情况下可产生棕色沉淀。棕色不溶性产物可轻松与四氧化锇螯合。这种特性使 DAB 成为电子显微镜的理想选择。通过添加可形成络合物的金属如镍、铜、银和钴增强 DAB 显色。金属络合物产生的颜色比单独使用 DAB 产生的颜色更深，增强了染色分析的灵敏度。
通常将 4-CN 和 DAB 各自的优势集中于一个底物混合物中。CN/DAB 底物具有出色的灵敏度，产生的深黑色沉淀物可很好地成像，并且在蛋白质印迹和斑点印迹应用中效果很好。
显色碱性磷酸酶蛋白质印迹底物
针对基于碱性磷酸酶的免疫印迹或染色，理想系统是 NBT 和 BCIP 的组合。它们在一起时会产生强烈的黑紫色沉淀，比单独使用其中一种底物灵敏度更高。该反应以稳定的速率进行，允许精确控制其相对灵敏度。NBT/BCIP 的特点是可产生锐利清晰的条带，膜的背景染色低。
硝基蓝四唑（NBT）的分子量为 817.6，属于四唑盐杂环有机化合物。还原后，该化合物产生一种高度显色的水不溶性产物 NBT-甲腊。该底物广泛用于免疫化学分析和技术，因为甲腊的显色呈线性且在较宽的动态范围内保持稳定。
5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯（BCIP）的分子量为 433.6，碱性磷酸酶（AP）水解产生蓝紫色沉淀，可沉积在硝酸纤维素膜或尼龙膜上。BCIP 可用作免疫印迹和免疫组织化学研究的显色底物。
1-Step Ultra TMB底物
| 蓝色沉淀物 |
|---|
| 检测限：20 pg |
| 颜色：深蓝色 |
| 推荐抗体稀释比（1 mg/ml 储备液）： 1°: 1:1,000 2°: 1:5,000-1:10,000 |
| 特点：即用型溶液 |
通过处理膜以增强信噪比
| Thermo Fisher Scientific 产品 | 描述 | 订购 |
|---|---|---|
| SuperSignal 蛋白质印迹增强剂 | 含膜处理试剂和一抗稀释剂，与未使用该试剂时相比，信号强度和灵敏度都提高了 3 到 10 倍。 | 46641 |
1-Step NBT/BCIP底物
| 即用型溶液 |
|---|
| 检测限：30 pg |
| 颜色：黑紫色 |
| 推荐抗体稀释比（1 mg/ml 储备液）： 1°: 1：500 2°: 1:5,000-1:50,000 |
| 何时使用：搭配碱性磷酸酶标记的抗体或探针 |
AP 底物的相关产品
显色或沉淀底物已广泛使用多年，是一种最简单且最具成本效益的蛋白质印迹检测方法。当这些底物与适当的酶接触时，它们转化为沉淀在膜上的不溶性有色产物。由此产生的有色条带或斑点印迹不需要特殊设备进行处理或显色。显色印迹底物有多种规格和包装形式。选择适合的底物需要考虑酶标记物、所需灵敏度，以及所需信号形式或检测方法。
主要优势
- 无需特殊仪器
- 检测高丰度靶点最划算的选择
用辣根过氧化物酶（HRP）进行蛋白质印迹的显色底物
显色 HRP 蛋白质印迹最常使用的底物有 TMB、4-CN 和 DAB。
3,3’,5,5'-四甲基联苯胺（TMB）分子量为 240.4，最常用作 ELISA 中的 HRP 底物。然而，在 HRP 和过氧化物存在的情况下，产生可沉淀在膜上的水溶性蓝色产物。Thermo Scientific 1-Step Ultra TMB-Blotting 底物溶液是一种单组分过氧化物酶底物，用于蛋白质印迹和免疫组化。产物的沉淀导致酶所在之处出现深蓝色条带。 1-Step TMB-Blotting 底物溶液尤其适用于需要高信噪比的应用。
4-氯-1-萘酚（4CN）的分子量为 178.6，可用于印迹和免疫组化中 的HRP显色检测。该沉淀物不如 TMB 和 DAB 灵敏和稳定，但醇溶性沉淀物显像良好并具有明显的蓝紫色，有助于双染色分析。
另一种广泛使用的 HRP 底物是 3,3'-二氨基联苯胺（DAB），分子量为 214.1，在 HRP 和过氧化物存在的情况下可产生棕色沉淀。棕色不溶性产物可轻松与四氧化锇螯合。这种特性使 DAB 成为电子显微镜的理想选择。通过添加可形成络合物的金属如镍、铜、银和钴增强 DAB 显色。金属络合物产生的颜色比单独使用 DAB 产生的颜色更深，增强了染色分析的灵敏度。
通常将 4-CN 和 DAB 各自的优势集中于一个底物混合物中。CN/DAB 底物具有出色的灵敏度，产生的深黑色沉淀物可很好地成像，并且在蛋白质印迹和斑点印迹应用中效果很好。
显色碱性磷酸酶蛋白质印迹底物
针对基于碱性磷酸酶的免疫印迹或染色，理想系统是 NBT 和 BCIP 的组合。它们在一起时会产生强烈的黑紫色沉淀，比单独使用其中一种底物灵敏度更高。该反应以稳定的速率进行，允许精确控制其相对灵敏度。NBT/BCIP 的特点是可产生锐利清晰的条带，膜的背景染色低。
硝基蓝四唑（NBT）的分子量为 817.6，属于四唑盐杂环有机化合物。还原后，该化合物产生一种高度显色的水不溶性产物 NBT-甲腊。该底物广泛用于免疫化学分析和技术，因为甲腊的显色呈线性且在较宽的动态范围内保持稳定。
5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯（BCIP）的分子量为 433.6，碱性磷酸酶（AP）水解产生蓝紫色沉淀，可沉积在硝酸纤维素膜或尼龙膜上。BCIP 可用作免疫印迹和免疫组织化学研究的显色底物。
资源
仅供科研使用，不可用于诊断目的。