FreeStyle MAX 系统

使用 FreeStyle CHO-S 细胞生产了人 IgG、IX 因子、人生长激素 (HGH) 以及促红细胞生成素 (EPO)。细胞在 125 mL 摇瓶内培养，使用 30 mL FreeStyle CHO 表达培养基，细胞密度 1 x 10⁶ 细胞/mL。每毫升要转染的培养体积使用1.25 μg 质粒 DNA 和 1.25 μl FreeStyle MAX 试剂，在 OptiPRO SFM 中形成转染复合体。转染后 24 小时，根据 GFP 表达测定，转染效率为 60%。使用 ELISA 测定蛋白产量，单位为 mg/L。

FreeStyle 293 系统适用于从人 HEK293 细胞生产带有翻译后修饰的功能性蛋白，迅速且易于扩大规模。该系统可以提供快速、超高产量的重组抗体蛋白瞬时表达（表 2）。系统使用高效的 293fectin 转染试剂进行转染。转染实验方案可以简单扩大而仅需微小改变或无需改变，悬浮培养物的体积可以从小于 30 毫升扩大至超过 10 升，同时保持相同的单位体积蛋白产量（图 3）。

FreeStyle 293 系统试剂盒包括 293fectin 转染试剂、Gibco FreeStyle 293 表达培养基、FreeStyle 293 细胞和 Opti-MEM I 培养基。您也可以单独购买系统组分。

在 FreeStyle 293-F 细胞中生产了人 IgG、IX 因子、人生长激素 (HGH) 以及促红细胞生成素 (EPO)。细胞在 125 mL 摇瓶内培养，使用 30 mL FreeStyle 293 表达培养基，细胞密度 1 x 10⁶ 细胞/mL。每毫升要转染的培养体积使用 1.0 μg 质粒 DNA 和 2.0 μl 293fectin 试剂，在 OptiPRO SFM 或 Opti-MEM I 培养基中形成转染复合体。转染后 24 小时，根据 GFP 表达测定，转染效率为 >75%。使用 ELISA 测定蛋白产量，单位为 mg/L。

悬浮培养哺乳动物细胞的大规模瞬时转染是一种可靠且快速的生产毫克级哺乳动物重组蛋白的方法，得到的蛋白可用于蛋白功能、疗效和结构研究。使用 FreeStyle MAX 和 FreeStyle 293 系统时，您只需要一个无菌的工作台，一台 CO₂ 培养箱和一个摇瓶震荡平台或旋转培养平台。稳定细胞系的建立则需要耗费大量劳动进行筛选和适应培养以找到高表达克隆。

您也可以选择 FreeStyle 客户定制服务，我们将基于您所要求的规模使用悬浮 CHO 或 293 系统在理想条件下生产您的蛋白。我们提供时程研究，以及在 1 至 50 L 培养物中生产蛋白。我们可以提供细胞团块，或者更佳的是提供纯化的蛋白（作为最终交付产品）。请联系您的 赛默飞销售代表，讨论您的需求并开始您的项目。