考马斯亮蓝染色

凝胶上蛋白检测的最常用方法是进行考马斯亮蓝染色。考马斯染色易于操作,因为它只涉及一种现成的试剂,而且不会永久性地对目标蛋白质进行化学修饰。由于未发生化学修饰,切下的蛋白质条带可以完全脱色,然后通过质谱或测序对回收的蛋白质进行分析。我们基于考马斯染色法的蛋白质染料简单易用,可轻松对通过电泳分离的蛋白质进行可视化。

比较不同的蛋白质银染方法

考马斯亮蓝染色的优势:

  • 使用方便—操作方法简单,仅需2-3个步骤
  • 兼容性好—考马斯亮蓝染料可兼容多种下游应用,如定量密度测定、质谱或测序分析
  • 可逆性染色

根据您的研究需要,选择合适的考马斯染料

 Simply Blue Safe Stain 染料Colloidal 蓝色染料GelCode 蓝色染料GelCode 蓝色安全染料Imperial 蛋白质染料Pageblue 蛋白质染料
检测限> 7 ng< 10 ng8 ng9 ng≤3 ng5 ng
大致染色时间
(用于凝胶)
标准
方案
135 分钟10 小时135 分钟135 分钟135 分钟95 分钟
微波
方案
12 分钟 30 分钟30 分钟12 分钟30 分钟
组分数量1(即用型)21 (即用型)21 (即用型)1(即用型)
染色步骤232-3333
染色剂G-250G-250G-250G-250R-250G-250
产品优势无害处置 染色灵活,可用于多种应用无害运输紫色染料染料可重复使用3次
无需酸固定剂或甲醇

染色需使用甲醇,Bis-tris 凝胶在染色前需要固定

*Bis-tris 凝胶在染色前需要固定

凝胶染色

PVDF膜染色

*膜必须干燥

×

×

*膜必须干燥
硝酸纤维素膜染色

×

×

×

质谱或测序分析

货号LC6065LC602524592245942461524620

考马斯染色方案

染色前,建议用水进行漂洗以去除残留的 SDS,避免对染料结合的干扰。然后加入染料,通常摇晃孵育约1小时。凝胶即可在染料中直接分析。如果需要进一步提高灵敏度,也可以使用水或甲醇:乙酸进行脱色,从凝胶基质中洗去多余的未结合染料。为了加快染色过程,可选用微波方案进行不需要甲醇或乙酸的考马斯染色。

染色灵敏度

考马斯染色法通常可以在5分钟内检测到3-10μg 的蛋白质。如果进行了额外的水脱色处理,则可以检测到低至7ng 的蛋白质 (BSA)。

Simply Blue Safe 染料染色灵敏度

泳道 1:6µg 蛋白质混合物
泳道 2:1µg 兔免疫球蛋白
泳道 3:1µg 还原牛血清白蛋白
泳道 4:5µg大肠杆菌裂解物
泳道 5:20ng 还原牛血清白蛋白
泳道 6:10ng 还原牛血清白蛋白
泳道 7:7ng 还原牛血清白蛋白
泳道 8:3ng 还原牛血清白蛋白
泳道 9:10µl Mark12标准品
泳道 10:5µl Mark12标准品

NuPAGE Bis-tris凝胶通过Simply Blue Safe 染料染色1小时,并在水里进行过夜脱色。

Imperial 蛋白染料快速染色
使用Imperial 蛋白染料对蛋白条带进行染色检测仅需5分钟。如需进一步提高灵敏度和降低背景,凝胶可染色1小时后,用水过夜脱色。

线性度

考马斯亮蓝染料可在一定蛋白质范围内定量结合蛋白质,从而进行光密度分析。PageBlue 蛋白质染料具有〜5ng至〜500ng的动态范围。

PageBlue 蛋白染料可实现灵敏且线性动态范围宽

PageBlue 蛋白质染料可实现灵敏且线性动态范围宽的染色方案。将一系列含有β-半乳糖苷酶和牛血清白蛋白的样品(各为0-500ng)在12%Tris-甘氨酸SDS-PAGE 胶上通过电泳分离,然后使用PageBlue蛋白质染料染色,并对染色的蛋白条带进行光密度测定。

考马斯染色凝胶和膜的获取和分析

iBright智能成像系统

iBright智能成像系统

使用 iBright 智能成像系统对染色的凝胶和膜拍照,获取发表级图像并进行分析。此凝胶成像系统配备了功能强大的硬件,融合了先进的自动化技术,操作界面易于使用,无论你是实验室新手,还是资深研科人员,都能快速上手,拍摄清晰成像图片并进行快速分析。

了解 iBright 智能成像系统

Dual LED Blue/White light transilluminator to illuminate stained gels and membranes

双 LED 蓝白光透射仪

使用白光捕获您的凝胶和膜染色结果。

了解有关双 LED 透射仪的更多信息

根据您的研究需要,选择合适的考马斯染料

 Simply Blue Safe Stain 染料Colloidal 蓝色染料GelCode 蓝色染料GelCode 蓝色安全染料Imperial 蛋白质染料Pageblue 蛋白质染料
检测限> 7 ng< 10 ng8 ng9 ng≤3 ng5 ng
大致染色时间
(用于凝胶)
标准
方案
135 分钟10 小时135 分钟135 分钟135 分钟95 分钟
微波
方案
12 分钟 30 分钟30 分钟12 分钟30 分钟
组分数量1(即用型)21 (即用型)21 (即用型)1(即用型)
染色步骤232-3333
染色剂G-250G-250G-250G-250R-250G-250
产品优势无害处置 染色灵活,可用于多种应用无害运输紫色染料染料可重复使用3次
无需酸固定剂或甲醇

染色需使用甲醇,Bis-tris 凝胶在染色前需要固定

*Bis-tris 凝胶在染色前需要固定

凝胶染色

PVDF膜染色

*膜必须干燥

×

×

*膜必须干燥
硝酸纤维素膜染色

×

×

×

质谱或测序分析

货号LC6065LC602524592245942461524620

考马斯染色方案

染色前,建议用水进行漂洗以去除残留的 SDS,避免对染料结合的干扰。然后加入染料,通常摇晃孵育约1小时。凝胶即可在染料中直接分析。如果需要进一步提高灵敏度,也可以使用水或甲醇:乙酸进行脱色,从凝胶基质中洗去多余的未结合染料。为了加快染色过程,可选用微波方案进行不需要甲醇或乙酸的考马斯染色。

染色灵敏度

考马斯染色法通常可以在5分钟内检测到3-10μg 的蛋白质。如果进行了额外的水脱色处理,则可以检测到低至7ng 的蛋白质 (BSA)。

Simply Blue Safe 染料染色灵敏度

泳道 1:6µg 蛋白质混合物
泳道 2:1µg 兔免疫球蛋白
泳道 3:1µg 还原牛血清白蛋白
泳道 4:5µg大肠杆菌裂解物
泳道 5:20ng 还原牛血清白蛋白
泳道 6:10ng 还原牛血清白蛋白
泳道 7:7ng 还原牛血清白蛋白
泳道 8:3ng 还原牛血清白蛋白
泳道 9:10µl Mark12标准品
泳道 10:5µl Mark12标准品

NuPAGE Bis-tris凝胶通过Simply Blue Safe 染料染色1小时,并在水里进行过夜脱色。

Imperial 蛋白染料快速染色
使用Imperial 蛋白染料对蛋白条带进行染色检测仅需5分钟。如需进一步提高灵敏度和降低背景,凝胶可染色1小时后,用水过夜脱色。

线性度

考马斯亮蓝染料可在一定蛋白质范围内定量结合蛋白质,从而进行光密度分析。PageBlue 蛋白质染料具有〜5ng至〜500ng的动态范围。

PageBlue 蛋白染料可实现灵敏且线性动态范围宽

PageBlue 蛋白质染料可实现灵敏且线性动态范围宽的染色方案。将一系列含有β-半乳糖苷酶和牛血清白蛋白的样品(各为0-500ng)在12%Tris-甘氨酸SDS-PAGE 胶上通过电泳分离,然后使用PageBlue蛋白质染料染色,并对染色的蛋白条带进行光密度测定。

考马斯染色凝胶和膜的获取和分析

iBright智能成像系统

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使用 iBright 智能成像系统对染色的凝胶和膜拍照,获取发表级图像并进行分析。此凝胶成像系统配备了功能强大的硬件,融合了先进的自动化技术,操作界面易于使用,无论你是实验室新手,还是资深研科人员,都能快速上手,拍摄清晰成像图片并进行快速分析。

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Dual LED Blue/White light transilluminator to illuminate stained gels and membranes

双 LED 蓝白光透射仪

使用白光捕获您的凝胶和膜染色结果。

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资源

仅供科研使用,不可用于诊断目的。