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Lipofectamine MessengerMAX™是您的通行证mRNA转染试剂闪亮登场,适用于神经元和原代细胞类型,转染效率可达DNA试剂5倍。
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为了生成mRNA转录物,我们推荐采用以下转录试剂盒:
为了确保转染结果的有效性,我们强烈推荐您使用阳性对照mRNA(可从包括TriLink BioTechnologies在内的第三方供应商处订购),如EGFP mRNA。
Lipofectamine MessengerMAX™ mRNA转染试剂可以在神经元和各种原代细胞中达到极高的转染效率,从而改善了下游应用结果,且能够应用于更多生物学相关的研究。这是由于我们全新的脂质纳米微粒技术经过优化,可以提供最高的mRNA量,且避免了DNA转染所需的入核步骤。
图1.在转染原代细胞(新鲜分离的小鼠皮层神经元、BJ成纤维细胞和原代角质细胞)时,Lipofectamine® MessengerMAX™性能优于业内领先的DNA和mRNA转染试剂。Lipofectamine® MessengerMAX™和业内领先的mRNA转染试剂用于在24孔板中输送GFP mRNA (500 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (500 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。
图2.Lipofectamine MessengerMAX™在转染不同干细胞(Gibco iPSC、H9 ESC、mESCs, hNSCs)时性能优于其它业内领先的DNA和mRNA转染试剂。在本实验中,Lipofectamine MessengerMAX™和领先的mRNA转染试剂用于在48孔板中输送GFP mRNA (250 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (250 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。
图3.Lipofectamine MessengerMAX™在处理非常难转染的细胞系(bEnd.3、SH-SY5Y、SK-N-SH、A431、RAW 264.7和 HT29)时性能优于其它业内领先的DNA和mRNA转染试剂。在本实验中,Lipofectamine MessengerMAX™和领先的mRNA转染试剂用于在24孔板中输送GFP mRNA (500 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (500 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。
图1.在转染原代细胞(新鲜分离的小鼠皮层神经元、BJ成纤维细胞和原代角质细胞)时,Lipofectamine® MessengerMAX™性能优于业内领先的DNA和mRNA转染试剂。Lipofectamine® MessengerMAX™和业内领先的mRNA转染试剂用于在24孔板中输送GFP mRNA (500 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (500 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。
图2.Lipofectamine MessengerMAX™在转染不同干细胞(Gibco iPSC、H9 ESC、mESCs, hNSCs)时性能优于其它业内领先的DNA和mRNA转染试剂。在本实验中,Lipofectamine MessengerMAX™和领先的mRNA转染试剂用于在48孔板中输送GFP mRNA (250 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (250 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。
图3.Lipofectamine MessengerMAX™在处理非常难转染的细胞系(bEnd.3、SH-SY5Y、SK-N-SH、A431、RAW 264.7和 HT29)时性能优于其它业内领先的DNA和mRNA转染试剂。在本实验中,Lipofectamine MessengerMAX™和领先的mRNA转染试剂用于在24孔板中输送GFP mRNA (500 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (500 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。
细胞类型 | Lipofectamine MessengerMAX™转染效率(%) |
---|---|
MDA-MB-231 | |
A431 | |
A549 | |
bEnd.3 | |
BJ fibroblast | |
H9 ESCs | |
Primary hepatocytes | |
Hep G2 | |
HT-29 | |
iPSCs | |
Primary keratinocytes | |
L929 | |
LNCaP | |
hNSCs | |
MCF7 | |
Neuro-2a | |
Primary neurons | |
RAW 264.7 | |
RBL | |
SK-N-SH | |
SH-SY5Y |
转染效率(%):<30% 30–50% 51–79% >80%
使用Lipofectamine MessengerMAX™进行mRNA转染通常能使蛋白质更快地表达,并在转染细胞中表现出很高的均一性。此外,mRNA输送无需进入细胞核(第四步),这就消除了基因组整合的风险,使转染效率不再依赖细胞周期。
图2 . DNA与mRNA转染对比
1 | 制备DNA模板制备带T7启动子的DNA模板。您可以选择使用Gateway pcDNA™-DEST40载体克隆基因,或者用包含T7的引物对其进行PCR扩增。 |
2 | 生成mRNA使用mMESSAGE mMACHINE T7 ULTRA Transcription试剂盒转录模板DNA,合成用于转染的mRNA。 |
3 | 转染mRNA采用简单的Lipofectamine MessengerMAX™ 转染实验方案转染mRNA。 下载Lipofectamine MessengerMAX™操作手册 图5.mRNA工作流程 |
Lipofectamine MessengerMAX™ 试剂通过高效转染提高了GeneArt CRISPR 核酸酶mRNA的剪切和重组效率,可以使基因修饰的效率最大化并简化下游过程。
图4 靶向Gibco iPS细胞中的HPRT位点的各种GeneArt CRISPR产品的剪切效率 (使用12孔板)。采用Lipofectamine 3000试剂输送CRISPR核酸酶一体式质粒DNA;采用Lipofectamine MessengerMAX™ 和两种业内领先的mRNA输送试剂输送all-RNA CRISPR (Cas9 mRNA + IVT gRNA)。转染72小时后使用GeneArt 基因组剪切检测试剂盒测定剪切效率。
仅限研究用途,不可用于诊断操作。