Lipofectamine MessengerMAX™是您的通行证

mRNA转染试剂闪亮登场,适用于神经元和原代细胞类型,转染效率可达DNA试剂5倍。

  • 在处理神经元和原代细胞类型时具有惊人的转染效率
  • 更快地表达蛋白质,无基因组整合风险
  • 使用mRNA CRISPR时可获得高达10倍的切割效率

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研究者反馈

为了生成mRNA转录物,我们推荐采用以下转录试剂盒:

为了确保转染结果的有效性,我们强烈推荐您使用阳性对照mRNA(可从包括TriLink BioTechnologies在内的第三方供应商处订购),如EGFP mRNA。   


在转染神经元和原代细胞类型时具有惊人的转染效率

Lipofectamine MessengerMAX™ mRNA转染试剂可以在神经元和各种原代细胞中达到极高的转染效率,从而改善了下游应用结果,且能够应用于更多生物学相关的研究。这是由于我们全新的脂质纳米微粒技术经过优化,可以提供最高的mRNA量,且避免了DNA转染所需的入核步骤。

图1.在转染原代细胞(新鲜分离的小鼠皮层神经元、BJ成纤维细胞和原代角质细胞)时,Lipofectamine® MessengerMAX™性能优于业内领先的DNA和mRNA转染试剂。Lipofectamine® MessengerMAX™和业内领先的mRNA转染试剂用于在24孔板中输送GFP mRNA (500 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (500 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。

图2.Lipofectamine MessengerMAX™在转染不同干细胞(Gibco iPSC、H9 ESC、mESCs, hNSCs)时性能优于其它业内领先的DNA和mRNA转染试剂。在本实验中,Lipofectamine MessengerMAX™和领先的mRNA转染试剂用于在48孔板中输送GFP mRNA (250 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (250 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。

图3.Lipofectamine MessengerMAX™在处理非常难转染的细胞系(bEnd.3、SH-SY5Y、SK-N-SH、A431、RAW 264.7和 HT29)时性能优于其它业内领先的DNA和mRNA转染试剂。在本实验中,Lipofectamine MessengerMAX™和领先的mRNA转染试剂用于在24孔板中输送GFP mRNA (500 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (500 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。

图1.在转染原代细胞(新鲜分离的小鼠皮层神经元、BJ成纤维细胞和原代角质细胞)时,Lipofectamine® MessengerMAX™性能优于业内领先的DNA和mRNA转染试剂。Lipofectamine® MessengerMAX™和业内领先的mRNA转染试剂用于在24孔板中输送GFP mRNA (500 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (500 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。

图2.Lipofectamine MessengerMAX™在转染不同干细胞(Gibco iPSC、H9 ESC、mESCs, hNSCs)时性能优于其它业内领先的DNA和mRNA转染试剂。在本实验中,Lipofectamine MessengerMAX™和领先的mRNA转染试剂用于在48孔板中输送GFP mRNA (250 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (250 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。

图3.Lipofectamine MessengerMAX™在处理非常难转染的细胞系(bEnd.3、SH-SY5Y、SK-N-SH、A431、RAW 264.7和 HT29)时性能优于其它业内领先的DNA和mRNA转染试剂。在本实验中,Lipofectamine MessengerMAX™和领先的mRNA转染试剂用于在24孔板中输送GFP mRNA (500 ng/孔)。其中,领先的DNA转染试剂用于输送GFP DNA (500 ng/孔),GFP在转染后24小时进行分析。


Lipofectamine MessengerMAX™验证过的细胞

细胞类型Lipofectamine MessengerMAX™转染效率(%)
MDA-MB-231
A431
A549
bEnd.3
BJ fibroblast
H9 ESCs
Primary hepatocytes
Hep G2
HT-29
iPSCs
Primary keratinocytes
L929
LNCaP
hNSCs
MCF7
Neuro-2a
Primary neurons
RAW 264.7
RBL
SK-N-SH
SH-SY5Y

转染效率(%):<30%     30–50%    51–79%    >80%


更快地表达蛋白质,无基因组整合风险

使用Lipofectamine MessengerMAX™进行mRNA转染通常能使蛋白质更快地表达,并在转染细胞中表现出很高的均一性。此外,mRNA输送无需进入细胞核(第四步),这就消除了基因组整合的风险,使转染效率不再依赖细胞周期。


图2 . DNA与mRNA转染对比


只需1-2-3三步,轻松上手!

1

制备DNA模板

制备带T7启动子的DNA模板。您可以选择使用Gateway pcDNA™-DEST40载体克隆基因,或者用包含T7的引物对其进行PCR扩增。

2

生成mRNA

使用mMESSAGE mMACHINE T7 ULTRA Transcription试剂盒转录模板DNA,合成用于转染的mRNA。

3

转染mRNA

采用简单的Lipofectamine MessengerMAX™ 转染实验方案转染mRNA。

下载Lipofectamine MessengerMAX™操作手册

图5.mRNA工作流程


使用mRNA CRISPR获得高达十倍的切割效率

Lipofectamine MessengerMAX™ 试剂通过高效转染提高了GeneArt CRISPR 核酸酶mRNA的剪切和重组效率,可以使基因修饰的效率最大化并简化下游过程。

图4 靶向Gibco iPS细胞中的HPRT位点的各种GeneArt CRISPR产品的剪切效率 (使用12孔板)。采用Lipofectamine 3000试剂输送CRISPR核酸酶一体式质粒DNA;采用Lipofectamine MessengerMAX™ 和两种业内领先的mRNA输送试剂输送all-RNA CRISPR (Cas9 mRNA + IVT gRNA)。转染72小时后使用GeneArt 基因组剪切检测试剂盒测定剪切效率。

 

仅限研究用途,不可用于诊断操作。