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KnockOut血清替代物-多物种
事实证明，饲养层依赖性培养要比 FBS 更可靠
KnockOut血清替代物-多物种是一种无血清添加剂，支持在成纤维细胞饲养层上培养的多能干细胞 (PSC) 的生长。这种研究专用产品设计用于直接替代现有实验方案中的血清，20 年来相关出版物超过 2000 份的 KnockOut 血清替代物 (KSR) 文献引用。
KnockOut血清替代物-多物种特性：
- 更明确的配方，适用于小鼠、人和其他哺乳动物 PSC 的饲养层依赖性培养
- 相对于血清法具有更紧凑的集落形态（图 1）
- 更好地维持未分化 PSC（图 2）
- 价格和供货均稳定
图 1.采用 KnockOut血清替代物-多物种与采用 FBS 培养的 PSC 形态比较H9 人胚胎干细胞 (ESC) 分别在含 20% 胎牛血清 (FBS) 或 20% KnockOut血清替代物-多物种的小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)上培养。129S6 小鼠 ESC 在含有 15% FBS 或 15% KnockOut血清替代物-多物种的 MEF 上培养相对于 FBS，采用 KnockOut血清替代物-多物种培养的人 ESC 集落更厚、更紧凑。相对于 FBS，采用 KnockOut血清替代物-多物种培养的小鼠 ESC 集落为半球形，更紧凑。
图 2.采用 KnockOut血清替代物-多物种与采用 FBS 培养的 PSC 标记物表达比较H9 人 ESC 和 129S6 小鼠 ESC 在 MEF 上生长，培养条件与图 1 相同。采用 KnockOut血清替代物-多物种培养的人类 ESC 表现出均匀的 Oct4（红色）和 Sox2（绿色）高表达，而采用 FBS 培养的 ESC 则存在异质性且 Sox2 染色更微弱。相对于 FBS，采用 KnockOut血清替代物-多物种培养的小鼠 ESC 表现出更高、更均一的 Oct4 表达。采用 DAPI（蓝色）作为核染色剂。采用 KnockOut血清替代物-多物种培养时，两种培养物均表现出了更致密、更理想的集落形态。
已经在培养的 PSC 可采用标准传代方案，在传代时直接转移到含有 KnockOut血清替代物-多物种的培养基中。
小鼠 PSC 培养物从 FBS 转换至 KnockOut血清替代物-多物种
小鼠 PSC 可采用标准解冻或传代方案，直接解冻或转移入含有 KnockOut血清替代物-多物种的培养基中。
表 1.在血清和KSR-MS 中培养的人和小鼠细胞生长特性比较。
| 种属 | 血清 | KSR-多物种 | 参考文献 | |
|---|---|---|---|---|
| 集落形态 | 人 | 不够紧凑 | 更紧凑 | H. Koivisto, 2004; M. Amit, 2000 |
| 集落形态 | 小鼠 | 更平坦，不够紧凑 | 半球形，更紧凑 | R. Blelloch, 2007; T. Davies, 2012 |
| 生长速率 | 人 | 更慢 | 更快 | H. Koivisto, 2004; J. Inzunza, 2005; H. Skottman, 2006 |
| 异常分化 | 人和小鼠 | 高 | 低 | J. Inzunza, 2005; H. Koivisto, 2004; H. Skottman, 2006; P. Hong-mei, 2006; C. Denning, 2006; G. Guo, 2016 |
| ESC 分化效率 | 人和小鼠 | 低 | 较高 | P. Hong-mei, 2006; T. Davies, 2012; J. Cheng, 2004; V. Bryja, 2006 |
| 克隆效率 | 人和小鼠 | 低 | 较高 | M. Amit, 2000; J. Cheng, 2004 |
| 重编程 | 小鼠 | 更慢 | 更快，选择性支持 PSC | R. Blelloch, 2007; X. Zhao, 2010; H. Hirai, 2012 |
完全培养基系统
| 添加剂 | 基础培养基 | 推荐试剂 |
|---|---|---|
| KnockOut血清替代物-多物种 | KnockOut DMEM 或 KnockOut DMEM/F-12 | bFGF 或 LIF |
订购信息
资源
仅供科研使用，不可用于诊断目的。