视频:细胞培养简介
该视频概述了细胞培养中使用的基本设备和适当的实验室装置。介绍并演示了如何在细胞培养通风橱中进行安全无菌操作的指南。

 Video: Cell Culture Basics
 

视频1:细胞培养简介

该视频概述了细胞培养中使用的基本设备和适当的实验室装置。介绍并演示了如何在细胞培养通风橱中进行安全无菌操作的指南。

 

培养箱

培养箱用于为细胞生长提供合适的环境。培养箱的容量应足够大以满足您的实验室需求,具有强制空气循环,且温度应控制在 ±0.2°C 以内。不锈钢培养箱易于清洁,并提供防腐蚀保护,尤其是在需要潮湿空气进行培养的情况下。尽管对细胞培养箱中的无菌条件要求不像细胞培养通风橱中那样严格,但经常清洁培养箱对于避免细胞培养物污染仍然必不可少。

培养箱类型


培养箱有两种基本类型,即干式培养箱和潮湿 CO 2 培养箱。 干式培养箱更经济实惠,但要求将细胞培养物放入密封培养瓶中进行孵育以防止蒸发。在干式培养箱中放置水盘可以提供一定湿度,但无法精确控制培养箱中的空气条件。 潮湿 CO2 培养箱更昂贵,但可以更好地控制培养条件。它们可用于孵育在皮氏培养皿或多孔板中培养的细胞,这需要在高湿度和增加 CO 2 张力的受控环境下进行。

储存

细胞培养实验室应有储存液体(如培养基和试剂)、化学品(如药物和抗生素)、耗材(如一次性移液器、培养容器和手套)、玻璃器皿(如培养基瓶和玻璃移液器)、专用设备以及组织和细胞的区域。玻璃器皿、塑料和专用设备可以在室温下存放在架子上和抽屉中;但是,必须根据标签上的说明储存所有培养基、试剂和化学品

一些培养基、试剂和化学品对光敏感;虽然在实验室光照条件下正常使用是可接受的,但在不使用时应避光保存或用铝箔包裹。

冷藏箱

对于小型细胞培养实验室,家用冰箱(最好是没有自动除霜功能的冰箱)是用于在 2–8°C 下储存试剂和培养基的合适且价格低廉的设备。对于较大的实验室,仅限于细胞培养的冷藏室更为合适。确保定期清洁冷藏箱或冷藏室,以避免污染。
 

冷冻冰箱

大多数细胞培养试剂可以在 –5°C 至 –20°C 下储存;因此超低温冰箱(即 –80°C 冰箱)可用于储存大多数试剂。家用冰柜是实验室冷冻冰箱的更低廉替代品。虽然大多数试剂可以承受带自动除霜(即自动解冻)功能的冷冻冰箱中的温度波动,但还是应将某些试剂(如抗生素和酶)储存于不带自动除霜功能的冷冻冰箱中。

低温储存

连续培养的细胞系可能会因其传代次数增加出现遗传不稳定性;因此,必须制备细胞工作储备液并在低温储存环境下保存(更多信息见 冷冻细胞)。 请勿将细胞储存在 –20°C 或–80°C 冷冻冰箱中,因为在这些温度下储存时,细胞活力会迅速下降。

液氮储存系统主要有两种类型,即 气相和液相,分别以广口或细口储存容器形式提供。气相系统可以将冻存管的爆炸风险降至最低,是储存生物危害性物质所必需的方式;而 液相系统通常具有更长的静态保存时间,因此更经济实惠。

细口容器的氮蒸发率更低且更经济实惠,但 广口容器更易于操作且储存容量更大。

细胞计数仪

细胞计数仪是定量生长动力学实验中必不可少的工具,当在实验室中培养超过两个或三个细胞系时,它具有很大的优势。

 

全新的 Countess® II FL 自动细胞计数仪是一种细胞计数平台,配备了先进的光学系统和图像分析软件,可快速评估悬液中的细胞。现在通过荧光功能——明场和两个可选荧光通道——研究人员可进行细胞计数、监测荧光蛋白表达和测量细胞活力。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。

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