MyQubit 介绍

为 Qubit 2.0 荧光计设想并创建新的检测方法

（请参阅本文涉及的完整产品列表。）

Qubit 2.0 荧光计是一种开创性的台式仪器——小型的、个性化、操作简单、成本低廉，但能够以前所未有的准确性、灵敏度和选择性生成数据。每台仪器都集成了 DNA、RNA 和蛋白质定量的检测方法，这些方法利用高度优化的算法，仅通过 2 点或 3 点校准就可以确保准确的结果（图 1）。装置读取的每个样本均报告为分析物浓度—不需要数学计算或与标准曲线单独比较—在低到中产量设置下，为研究人员提供一个完美的解决方案。

图 1.Qubit 工作流程。Qubit 2.0 荧光计通过无缝工作流、彩色触摸屏、图形显示和 USB 驱动器兼容性实现数据采集。

MyQubit 固件现在可用

尽管预编程算法使得 Qubit 2.0 荧光计非常友好，但个人用户一直无法开发新的 Qubit 测试——直到现在! 我们刚刚发布了名为MyQubit的固件，允许您使用参数在几分钟内创建应用程序，这些参数可以轻松地使用 USB 驱动器上传到仪器上，而无需更改现有试验的外观和工作流程。

所有 Qubit2.0 设备现在都预先加载了 MyQubit 固件，现有 Qubit2.0 所有者可以下载固件。由于 Qubit 2.0 荧光计是由简单的组件来操作，因此创建额外的应用程序就像将测试产品的光谱特性与适当的 LED 和发射过滤器匹配一样简单。仪器采用蓝色（最大波长约 470 nm）和红色（最大波长约 635 nm）两个 LED 进行操作，激发滤光片分别为 430–495 nm 和 600–645 nm。在 510–580 nm 和 665–725 nm 有两个带通发射滤波器。一种新的 Qubit 分析可以使用现有的 Life Technologies kits 和试剂作为起点，或者从全新的想法中发展出来。

如何使用 MyQubit 进行测试

要使用 MyQubit 创建新的测试，必须首先定义几个关键参数。使用标准 PC 生成的简单 .txt 文件允许识别诸如分析名称、单元、光源和动态范围等字段。此外，还必须解决确定标准曲线形状的常数，这可能需要收集新数据。在这种情况下，Qubit 2.0 荧光计可以作为一个在 Qubit 的原始模式下的微型荧光计。此功能允许您手动选择蓝色和红色的激发源，同时读取两个发射通道中的荧光。

Qubit 2.0 荧光计将指导您完成新分析的上传过程。在单个 .txt 文件中，您最多可以上传 4 个新测试的参数，总共有 20 个新测试可以永久上传到设备上。现有的 Qubit 检测 DNA、RNA 和蛋白质定量不受任何使用 MyQubit 创建的新应用程序的影响。同样，新测试的工作流和外观保持一致，存储和访问数据的能力也保持一致。唯一的变化是添加了新的分析，增加了 Qubit 仪的灵活性。查看创建一个新的 MyQubit 分析文件的详细说明以及下载 Qubit 原始应用程序，请访问 lifetechnologies.com/qubit。

实例：Amplex 红胆固醇检测

分子探针Amplex Red assays能够通过耦合酶途径对许多生物分析物（包括葡萄糖、谷氨酸、过氧化氢和磷酸盐）进行简单、直接的定量。在这个例子中，我们选择基于 Amplex Red 胆固醇分析试剂盒来创建新的 Qubit 测定，它可以精确地测量复杂混合物中的胆固醇和胆固醇酯。

Amplex 红色胆固醇检测试剂盒已被设计用于传统的荧光酶标仪。然而，荧光反应产物的光谱性质使其成为使用 MyQubit 固件进行优化的合适选择。为此，使用现有程序在荧光酶标仪运行重复样本，并与在 Qubit 2.0 荧光计上运行的平行样本进行比较。基于灵敏度、动态范围和精度确定等效性能后，利用 Microsoft Excel 模板对标准曲线的算法常数进行了优化。根据现有的试验质量标准定义剩余的试验参数（例如，单位、动态范围），并以备忘录的方式将新的试验永久上传到仪器（图 2）。就像用 MyQubit 固件创建的任何分析一样，即使在同一类分析中（例如，生物样品中的胆固醇与乳制品样品中的胆固醇），试验参数可用于常规分析。

图 2.建立一种新的胆固醇 Qubit 分析方法。  （A）使用 Amplex Red cholesterol assay 试剂盒在 Molecular SpectraMax M5 荧光标仪和荧光计 Qubit 2.0 上对 3 份浓度在 0.32 μM 至 20 μM 范围的胆固醇标准样品进行分析。图中显示了用于计算浓度数据的曲线拟合算法对应的直线。为了便于参考，将标准的位置和来自实际实验的一组数据点叠加到该线上。这张图表明，利用曲线拟合算法可获得溶液中游离胆固醇定量的准确数值。（B）一种新的胆固醇 Qubit 分析方法可以很容易地上传到仪器上，与现有的检测方法有相同的外观和感觉。

Qubit 2.0 荧光计可升级性和适应性

任何与 Qubit 硬件光谱兼容的试剂或分析方法都可以用于 Qubit 2.0 荧光计。MyQubit 将会是您最为信赖的桌面型荧光定量检测平台，可满足多种定量检测的需求—从实验室的研究及质控到更近一步的监测功能。

仅供研究使用。不可用于诊断程序。