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计数员 _____________________________ 肝细胞批号_________________________
日期 _____________________ 项目 ID ___________________
台盼蓝计数结果
象限 | 活细胞 | + | 死细胞 | = | 总细胞 |
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象限1 | + | = | |||
象限2 | + | = | |||
象限3 | + | = | |||
象限4 | + | = | |||
总计 | + | = |
细胞活力计算
活细胞 / 总细胞 = 活力 %
/ =
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总得率计算
总细胞 / 象限计数 x 稀释因子 x 10,000 x 当前体积 (mL) = 总细胞得率
/ x 2 x 10,000 x = x 106 个细胞
细胞形态注释
透明细胞质
圆形
透明/清晰的细胞膜
极小碎片
细胞器肿胀
细胞膜起泡
脂滴
遍布碎片
备注:_________________________________________________________________________
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接种密度计算
总细胞得率 / 所需密度* = 所需总体积
x 106 个细胞 / x x 106 个细胞/mL = mL
所需总体积 - 当前总体积 = 要添加至细胞储备液的体积
mL - mL= mL
* 请参阅供应商的建议。对于24孔板,人铺板肝细胞的理想密度通常为 0.75 x 106 个细胞/mL、0.8 x 106 个细胞/mL 或 0.9 x 106 个细胞/mL。悬浮所用密度或其他物种的密度将有所不同。
叠加计算
所需 4°C 培养基的总体积* x 最终凝胶浓度 / 初始蛋白质浓度† = 要加入 4°C 培养基的凝胶储备液体积
mL x 0.35 mg/mL / mL = mL
* 培养基需要置于冰上保持 4°C。我们建议 Williams 培养基 E(Life Technologies 货号 CM6000)与无血清维持培养添加剂包(Life Technologies 货号 CM4000)结合使用。
† 请参阅供应商的规格表。我们建议使用 Geltrex™ 低生长因子基底膜基质(Invitrogen 货号 12760-021),浓度为 0.35 mg/mL。
需要帮助?有关肝细胞产品的技术支持,请访问 www.lifetechnologies.com/hepatocytes,
发送电子邮件至 hepaticproducts@lifetech.com,或通过以下电话联系我们:+1 866 952 3559(美国免费热线);+1 919 237 4500(收费热线);+44 (0)141 814 5900(欧洲)。
提前准备冻存肝细胞
注释:处理原代肝细胞时请使用通用安全预防措施和适当的生物安全柜。
准备细胞计数样本瓶
仅供科研使用,不可用于诊断目的。