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実証済みリアルタイムPCRアッセイから独自のApplied Biosystems TaqMan SARS-CoV-2 Mutation Panelを選択でき、今必要な結果を得ることができます。このスケーラブルなパネルを使えば、数個から数百個のサンプルに対して、お手持ちのリアルタイムPCR装置を使用して、1から多数の変異を識別することができます。
ターゲット | 実証済みリアルタイムPCR SNPアッセイから独自のカスタムパネルを選択 |
アッセイデザイン | ターゲット配列領域を増幅するための特異的Forward/ReverseプライマーReverseプライマーは、SARS-CoV-2ゲノムRNA配列の逆転写反応用のプライマーを兼ねています。各アッセイは、野生型と変異型を検出するため、非蛍光クエンチャー(NFQ)を備えた2種類のTaqMan MGBプローブを含みます |
入手可能なサイズ | 375反応 1,250反応 |
RNAサンプル | CT値が30以下のSARS-CoV-2サンプルから抽出されたRNAサンプル |
反応時間 | 結果まで約70分 |
推奨装置 | Applied Biosystems QuantStudioシリーズなど、すべてのApplied BiosystemsブランドのリアルタイムPCR装置 |
推奨ソフトウェア | QuantStudio Design and Analysis Software v2.5以降のGenotyping Analysis Module |
実証済みリアルタイムPCRアッセイ(SNPジェノタイピング)により、ロバストなSARS-CoV-2変異の検出が行えます。下記はQuantStudio Design and Analysis Software v2.5のGenotyping Analysis Moduleを使用した解析結果(クラスタープロット)です。これらのクラスタープロットは、野生型のサンプル(x軸に沿った赤い点)と変異サンプル(y軸に沿った青い点)の非常に明確な区別を示しています。
図2.S遺伝子変異delH69V70のクラスタープロットdelH69V70(69-70delとしても知られる)はB.1.1.7(501Y.V1またはアルファ株)の既知の変異です。delH69V70はB.1.1.7のみに存在するわけではありません。
当社独自のワークフローは、SARS-CoV-2陽性サンプルから分離したRNA から始まり、当社ゴールドスタンダードのApplied Biosystems TaqMan SNP Genotyping AssaysとワンステップRT-PCR反応を組み合わせて、サンプル中に既知の変異が存在するかどうかを検出します。
このビデオでは、このワンステップRT-PCR反応の仕組みと、結果がどのようであるかを説明します。
2つのビデオでからなるこの短いチュートリアルで、以下をご覧になれます:
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実験のセットアップと結果解析のためのヒントとコツ
この短いビデオでは、以下をご覧になれます:
Genotyping Analysis Module を備えるQuantStudio Design and Analysis Software v2.5以降を使用します。
TaqMan SARS-CoV-2 Mutation Panelを使用するには、以下を注文する必要があります:
Premier assaysは1つの標準サイズで提供され、一般的な変異株で需要が高いアッセイです。
Custom assaysには2種類のサイズがあり、納品に時間がかかります。
当社は最近、命名規則を見直しました:遺伝子変異参照コドン変異コドン
例: S.D215G.GAT.GGT
備考:多塩基の欠失では、参照コドンおよび変異コドンは命名規則に当てはまらない場合があります。(例:S.delH69V70)
変異 | WHO ラベル | 関連変異株 | 最初に記録されたサンプル | 製品番号 | アッセイID |
---|---|---|---|---|---|
S.D215G.GAT.GGT | Beta | B.1.351 | 南アフリカ | A51823 | CV9HHWM |
S.D614G.GAT.GGT | Various | B.1.1.207, P.1、B.1.1.33、B.1.1.7、B.1.177、B.1.258、B.1.351、B.1.525、Mink変異株 | ナイジェリア、英国、南アフリカ、ブラジル/アマゾン | A51818 | CVKA3AT |
S.delH69V70 | Alpha | B.1.1.7、B.1.258、B.1.525 | 英国 | A51808 | CVCE3U9 |
S.delY144 | Alpha | B.1.1.7 | 英国 | A51817 | CVTZ76E |
S.E484K.GAA.AAA | Beta、 Gamma、 Eta | P.1、B.1.1.33、B.1.351、B.1.525 | 南アフリカ、ブラジル | A51813 | CVEPRY3 |
S.E484Q.GAA.CAA | Delta (この変異はなし) | B.1.617、B.1.617.1、B.1.617.3 | インド | A51820 | CVDJXE7 |
S.F888L.TTT.CTT | Eta | B.1.525 | 英国 | A51827 | CVFVKJ2 |
S.K417N.AAG.AAT | Beta | B.1.351 | 南アフリカ | A51814 | CVFVKJZ |
S.K417T.AAG.ACG | Gamma | P.1 | ブラジル/アマゾン | A51815 | CVGZE4X |
S.L18F.CTT.TTT | Gamma | P.1, B.1.351 | 南アフリカ、ブラジル/アマゾン | A51830 | CV47VRT |
S.L452R.CTG.CGG | Delta、 Epsilon | B.1.617、B.1.617.1、B.1.617.2、B.1.617.3、B.1.429 | インド、カリフォルニア州 | A51819 | CVAAAAD |
S.N439K.AAC.AAA | B.1.258 |
| A51825 | CVH49PV | |
S.N501Y.AAT.TAT | Alpha、 Beta、 Gamma | P.1、B.1.1.7mB.1.351 | 英国、南アフリカ、ブラジル/アマゾン | A51812 | CVDJXE6 |
S.P681H.CCT.CAT | Alpha | B.1.1.207、B.1.1.7 | ナイジェリア、英国 | A51816 | CVPRJZJ |
S.P681R.CCT.CGT | Delta | B.1.617.1, B.1.617.2, B.1.617.3 | インド | A51822 | CVEPRY4 |
S.S13I.AGT.ATT | Epsilon | B.1.427, B.1.429 | カリフォルニア州 | A51828 | CVNKRFN |
S.S477N.AGC.AAC | lota | B.1.526 | ニューヨーク州 | A51824 | CVMFWVR |
S.T20N.ACC.AAC | Gamma | P.1 | ブラジル/アマゾン | A51821 | CVCE3VA |
S.V1176F.GTT.TTT | P.2 | ブラジル | A51826 | CVKA3AU |
*両方のアッセイを用いることが推奨されます。変異株には2種類の変異コドンがある場合があり、その結果、同じアミノ酸変化が生じます。各変異に関連する命名規則は上記の表を参照してください。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.