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When you isolate mRNA using Dynabeads®, you can also easily construct cDNA libraries for use in cDNA amplification, cDNA cloning, RACE experiments and subtractive hybridization.

  • 高品質で完全長のmRNAを単離
  • 優れた感度により、単一細胞からでもライブラリを作製できます
  • 単離したmRNAは逆転写用にすぐに使用できます
  • 酵素を使用したアプリケーションはDynabeads®によって阻害されることはありません。
  • Dynabeads®はすべての逆転写に使用できます。
  • 固相cDNAライブラリは非常に安定で、再使用可能、2-8°Cで保存できます
  • Optimal template for PCR-amplification, cDNA cloning, RACE and subtractive hybridization!
Solid-Phase cDNA Synthesis
When preparing solid-phase cDNA libraries, you first capture the mRNA onto the Dynabeads®. 次にビーズを直接逆転写反応にかけます。するとビーズに結合したオリゴdT残基がプライマーとして作用して、 一本鎖cDNA合成が開始されます。 操作は、全て固相を使用するため、バッファーを迅速で、単純かつ効率的に交換することができます。


Re-Usable cDNA Library
A stable, covalently linked cDNA library is produced and can be used over and over again (e.g for PCR-amplification, RACE, subtractive hybridisation, cDNA cloning etc.). マグネットによりサンプルを分離し、次のバッファーに再懸濁を行うことができるので、バッファーの条件を最適にすることができます。 逆転写反応は、使用する酵素の反応効率によって制限を受けます。

キャプチャーやプライマー用に使用するビーズ結合プローブは、オリゴdTであってもいかなるDNA配列であってもかまいません。 特許取得ずみのDynabeads®固相cDNA合成法には、市販のcDNAキットが使用できます。

The use of Dynabeads® Oligo(dT) 25 for capture of mRNA for cDNA synthesis and/or subtractive cloning is covered by the patent "Process for producing" cDNA (WO9006044, EPO444119, AT122721T, DE68922743T, DE68922743D, CA2003500, AU627815, US5759820 and JP2960776B2).
主な参考文献:

  1. Jakobsen KS et al. (1994). Direct mRNA Isolation Using Magnetic Oligo (dT) Beads: A Protocol for All Types of Cell Cultures, Animal and Plant Tissues. Advances in biomagnetic separation. Eaton Publishing 61-71.
  2. Karrer EE et al. (1995).In situ isolation of mRNA from individual plant cells: creation of cell specific libraries. Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92:3814-3818.
  3. Lambert KN and Williamson VM (1993). cDNA library construction from small amounts of RNA using paramagnetic beads and PCR. Nucleic Acids Research 21(3):775-776.
  4. Raineri I, Moroni C and Senn HP (1991). Improved efficiency for single-sided PCR by creating a reusable pool of first-strand cDNA coupled to a solid phase. Nucleic Acids Res. 19(14):4010.
  5. Fellmann F, Pretet J and Fellmann D (1996). Simplified Protocol of Solid-Phase cDNA libraries for Multiple PCR Amplification. BioTechniques 21(5): 766-770.
  6. Rodriguez IR et al.(1994). Structural Analysis of the Human Hydroxyindole-O-methyltransferase Gene. J.Biol.Chem. 269(50):31969-31977.
  7. Aasheim HC, Logtenberg T and Larsen F. (1996). Subtractive Hybridization for the Isolation of Differentially Expressed Genes Using Magnetic Beads. Methods in Molecular Biology 69:115-128.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.