タンパク質アッセイにおけるタンパク質間変動

Thermo Scientific Pierce Protein Assays数種類の色素応答におけるタンパク質間変動について、以下の比較表をご覧ください。タンパク質サンプル間の変動を評価する際の一般指針として、表中のデータをご利用ください。しかし単一のタンパク質濃度/バッファを用いて比較を行っているため、正確なキャリブレーション因子として表中データを使用することはできません。

タンパク質スタンダードを選択する際に、以下の変動情報データは有益です。例えばアッセイ対象のサンプルが精製抗体である場合、ウシガンマグロブリン(BGG、タンパク質 #5)は、スタンダード物質としてウシ血清アルブミン(BSA、タンパク質 #1)よりも精度が高くなります。このデータからも判るように、タンパク質アッセイ結果は、適用したアッセイスタンダードの種類が重要です。

各タンパク質アッセイについて、標準プロトコルに従い14種類のタンパク質をアッセイしました。各タンパク質の実測(ブランク補正)吸光度の平均値を算出しました。各タンパク質の吸光度は、 BSAの吸光度に対する比率で表されます(例：比率が0.80である場合、BSAの等価質量に対する発色の80%がタンパク質によって生成されたことを意味します)。タンパク質濃度は、全て1000 µg/mLに設定しました(ただし、マイクロBCAアッセイのみ10 µg/mLを適用)。