Thermo Scientific Pierce ECL Plus Substrateはウェスタンブロッティング用の化学発光と化学蛍光ペルオキシダーゼ基質です。Pierce ECL Plus Substrateは西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）と反応するとアクリジニウムエステルを生成し、市販の類似基質と同等以上の強力なシグナルを発生します （図 1）。エステル中間体はペルオキシドと反応して、強力かつ持続的な化学発光シグナルを生成し、X線フィルムやCCDカメラで捕えることができます。強力な蛍光シグナルも生成され、蛍光イメージャーで捕えることができます（図 2）。

図 2。 1種の基質を3つの方法で検出しました。 ブロットは図1の通り調製しました。 ターゲットを1:1000希釈のウサギ抗MAPキナーゼ（EMDミリポア）、6.6ng/mLのヤギ抗ウサギHRP(製品番号31460)および Pierce ECL Plus Substrateを用いて検出しました。 膜をCL-XPosure Filmに5秒間露光し、Typhoon* 9410 Variable Mode Imager (457nmの励起、510nmの蛍光) および Syngene* G:Box iChemiXT Imager (1 分間の露光)を用いて撮像しました。

Pierce ECL Plus Substrateは、適切な一次および二次抗体濃度で反応させた場合、ニトロセルロースやPVDF膜上の標的タンパク質（図3 ）を低ピコグラム量まで検出できます。汎用性と信頼性を有するこのウェスタンブロッティング基質は、幅広いダイナミックレンジと優れた感度を有し、長時間に渡り信号を検出します(図 4)。