Self-contained devices give you the solution for high-protein recovery

byThermo Scientific Pierce Protein Biology Team - 06/01/11

Thermo Scientific Slide-A-Lyzer MINI透析装置は、低容積タンパク質サンプル（10～100 μL）を透析する簡便な方法です。弊社の新しい0.5 mLおよび2 mLのSlide-A-Lyzer* MINI透析装置は、50～500 μLおよび200～2000 μLのサンプルをそれぞれ処理でき、内蔵型使い捨て装置のためシリンジ、遠心分離、ビーカー、面倒なステップが必要ありません。サンプル追加、除去は通常の実験室ピペットで簡単に行えます。透析は直接同梱の15 mLまたは50 mLコニカルチューブで迅速かつ効率的に行い、廃液および必要な透析バッファーの量を最小限にします。複数サンプルが同時で安全に、楽に処理できます。蓋をした装置は普通の実験室ラックまたはシェーカーに置くことができ、省スペースかつこぼれや汚染のリスクを最小限にします。

透析は多孔性メンブレンを通した選択的拡散に基づいた、サンプル成分を分離するためよく使われる技術です。孔のサイズはメンブレンのMWCOを決定し、これは90%の一般のタンパク質またはポリペプチドがメンブレンに保持される分子量として定義されます。Slide-A-Lyzer MINI透析装置は低結合ポリプロピレンおよび統合された再生セルロースメンブレンで作られており、メンブレンのMWCO仕様は3.5 K、10 K、20 Kです。再生セルロースメンブレンは幅広い一般試薬およびバッファーに適合し、優れたタンパク質回収（表1）および透析率（図1）を提供します。Slide-A-Lyzer MINI透析装置はHEPAフィルター付きクリーンルーム施設で製造され、ユニットの100%に最高品質とサンプルの安全を保証するため真空漏洩検査を行っています。

表1高いタンパク質回収が2 mL透析装置を使用して得られます。†

メンブレンのMWCO（kDa）タンパク質/ペプチド回収率（%）
3.5インスリンB鎖（3.5 kDa）90.13
10シトクロムC（12.4 kDa）94.44
20ミオグロビン（17 kDa）95
† 50 mMリン酸ナトリウム、pH 7.2の75 mM NaClまたはpH 9.4の炭酸-重炭酸緩衝液のいずれかでインスリンB鎖、シトクロムC、ミオグロビン（0.25 mg/mL）を4°Cで一晩（17時間）透析しました。タンパク質濃縮液の量はThermo Scientific Pierce BCAタンパク質アッセイ（品番23225）で決定しました。

Slide-A-Lyzer MINI透析装置で低分子量汚染物の除去、バッファー交換、脱塩がバッファー30～100 mLのみを使用して図1で説明するような手順で4～8時間以内に達成できます。透析の効率、速度、収率は大量のバッファーを使用した従来の透析と類似していました（図2）。

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図1. Thermo Scientific Slide-A-Lyzer MINI透析装置を使用した手順の概要。
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図2. 10 K MWCO、2 mL透析装置を使用したNaCl（パネルA）、DTT（パネルB）、バッファー交換（パネルC）の除去速度。 各透析実験サンプルは、オービタルシェーカー（300 rpm）上のディスポーザブル50 mLコニカルチューブで透析される。 透析バッファーは2時間後に1回交換する。 結果は2サンプルの平均である。 0.5 mLの装置でも似た結果が得られる。 従来の透析では、サンプルはスターラー付きビーカー中で2 Lのバッファーで透析されていた。 パネルA：ウシ血清アルブミン（BSA）サンプル（2 mL、1 M NaCl中0.25 mg/mL）を2 x 45 mLの水で透析した。 NaCl除去速度は、示した時間における濃縮液の伝導率を測定して決定した。 4時間以内に95%以上のNaClが除去された。 パネルB：サンプル（2 mL、50 mMリン酸ナトリウム中100 mM DTT、pH 7.2の75 mM NaCl）を50 mMリン酸ナトリウム2 x 45 mLとpH 7.2の75 mM NaClで透析した。 DTT除去速度は、示した時間で濃縮液中の残留DTTをThermo Scientificエルマン試薬（品番22582）を使用し412 nmで測定して決定した。 一晩の透析で95%を超えるDTTが除去された。 パネルC：サンプル（2 mL、100 mM MES中0.25 mg/mL BSA、pH 4.7の150 mM NaCl）を100 mMリン酸ナトリウム2 x 45 mLとpH 7.2の150 mM NaClで透析した。 バッファー交換速度は、示した時間における濃縮液のpHを測定して決定した。 透析率は、サンプル量、サイズ、透析する分子のサイズと形状、撹拌および温度など、様々な要因によって決まる。
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    Slide-A-Lyzer

    Thermo Scientific Slide-A-Lyzer MINI透析装置と10K MWCOは、透析、10 µL～2 mLのタンパク質および10 kDaを超える巨大分子を高収率で得るために用い、ディスポーザブルなポリプロピレンカップと統合された低結合メンブレンが含まれています。

    Slide-A-Lyzer MINI透析装置、10 K MWCO、0.1 mLの特徴：

    便利な3サイズ―標準の1.5 mL微量遠心、15 mLと50 mLコニカルチューブにそれぞれ合う0.1、0.5、2 mLサンプルに対する透析装置
    高いサンプル回収率–低結合プラスチックおよび小さなメンブレン表面積がろ過とレジンのシステムに比較してサンプル損失を最小に

    • ワンステッププロトコル–MINI装置へサンプルを取り、透析バッファーを含むチューブに配置。面倒な組み立て、装置の準備、または高価な装置は不必要
    • 100%真空漏洩検査済み–革新的な設計のため、手作りの装置で起こる場合がある「ウィッキング」はなし
    • 時間の節約–核酸およびタンパク質の脱塩（95%を超える回収率）を15分以下で行い、そのためサンプル分解度、定量、コンジュゲーションが向上

    Thermo Scientific Slide-A-Lyzer MINI透析装置について詳しく知る

    For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.