iBlot 3 웨스턴 블랏 트랜스퍼 시스템

생산성 극대화

이제 단 3분 만에 그 어느 때보다 빠르게 안정적인 고품질 트랜스퍼를 수행할 수 있습니다. 또한 트랜스퍼 장치 사용을 위한 대기 시간을 절약할 수 있습니다. 2개의 독립 제어형 트랜스퍼 스테이션을 통해 장치를 동료와 공유할 수 있으며, 동시에 2개의 서로 다른 프로그램을 사용하여 4개의 미니(mini) 젤 또는 2개의 미디(midi) 젤을 동시에 실행할 수 있습니다. 또한 사용자 친화적인 터치스크린 인터페이스에서 사전 프로그래밍된 방법을 선택하여 방법 설정 시간을 줄일 수 있습니다. 프로그램은 필요에 맞게 맞춤화할 수도 있습니다.

트랜스퍼 효율성 향상

iBlot 3을 사용하면 습식 탱크 트랜스퍼 및 기타 신속한 트랜스퍼 방법에 비해 단백질 트랜스퍼 효율이 양호하거나 더 우수합니다.

iBlot 3 시스템은 트랜스퍼 효율이 더 우수합니다. (A) Hsp70: Invitrogen NuPAGE 4–12% Bis-Tris mini gel에 레인당 20, 15, 10, 5, 2.5, 1.25, 0.625 및 0.312 μg의 A431 용해물을 로드했습니다. 젤 전기영동 후 단백질을 위의 방법과 조건을 사용하여 트랜스퍼했습니다. Invitrogen Bandmate Automated Western Blot Processor를 사용하여 이뮤노프로세싱을 완료했습니다. Thermo Scientific Pierce Clear Milk Blocking Buffer를 사용하여 30분 동안 블랏을 인큐베이션했습니다. Hsp70 1차 항체(clear milk에서 1:1,000)를 블랏에 추가하여 실온에서 12시간 동안 인큐베이션했습니다. 1차 항체를 제거하고 GAM-HRP 2차 항체(TBST에서 1:120,000)를 블랏에 추가하여 2시간 동안 인큐베이션했습니다. Thermo Scientific SuperSignal West Dura 화학 발광 기질을 검출에 사용했습니다. 이미지 캡처에 Invitrogen iBright FL1500 이미징 시스템을 사용했습니다. 용해물당 로컬 백그라운드 보정된 부피를 각 레인에 대해 그래프로 표시했습니다. (B) 4EBP1: Invitrogen Novex 16% Tricine mini gel에 레인당 10, 5, 2.5, 1.25, 0.625, 0.312, 0.156 및 0.078 μg의 A431 용해물을 로드했습니다. 젤 전기영동 후 단백질을 위의 방법과 조건을 사용하여 트랜스퍼했습니다. Bandmate Automated Western Blot Processor를 사용하여 이뮤노프로세싱을 완료했습니다. Pierce Clear Milk Blocking Buffer를 사용하여 30분 동안 블랏을 인큐베이션했습니다. 4EBP1 1차 항체(clear milk에서 1:1,000)를 블랏에 추가하여 실온에서 12시간 동안 인큐베이션했습니다. 1차 항체를 제거하고 GAR-HRP 2차 항체(TBST에서 1:175,000)를 블랏에 추가하여 2시간 동안 인큐베이션했습니다. SuperSignal West Dura 화학 발광 기질을 검출에 사용했습니다. 이미지 캡처에 iBright FL1500 기기를 사용했습니다. 용해물당 로컬 백그라운드 보정된 부피를 각 레인에 대해 그래프로 표시했습니다. 참고: GAM = goat anti-mouse, HRP = horse radish peroxidase, TBST = tris-buffered saline with Tween™ (solution), GAR = goat anti-rabbit.

일관되고 재현성 있는 결과

사전 조립된 일회용 소모품과 초고속 트랜스퍼 방식으로 변동성이 제거되어 기존 방법에 비해 일관되고 재현성 있는 결과를 보장할 수 있습니다. 또한 내장형 냉각 기능이 포함된 완전히 새로운 견고한 설계로 열 축적이 감소하고 실행 간 일관성이 향상됩니다.

iBlot 3 장치는 일관된 결과를 제공합니다. Thermo Scientific HEK293 용해물(Thermo Scientific RIPA 버퍼에서 용해됨)의 연속 희석액을 4개의 Invitrogen Bolt 4–12% Bis Tris Plus 젤에 로드했습니다. 레인 1-11의 단백질 로드(μg 단위)는 왼쪽에서 오른쪽 순으로 10, 5, 2.5, 1.25, 0.625, 0.312, 0.156, 0.078, 0.039, 0.020, 0.010이었습니다. Invitrogen iBright Prestained Protein Ladder(2 μL)는 레인 12에 로드했습니다. MES SDS 러닝(running) 버퍼를 젤 전기영동에 사용했습니다. 단백질은 광범위한(30–250 kDa) 사전 프로그래밍된 트랜스퍼 방법(25V, 6분, 저냉각)을 사용하는 iBlot 3 웨스턴 블랏 트랜스퍼 장치 및 iBlot 3 트랜스퍼 스택, 미디(Midi), NC를 사용하여 트랜스퍼되었습니다. 그런 다음 Thermo Scientific Pierce Clear Milk Blocking Buffer(카탈로그 번호 37587)을 사용하여 블로킹한 다음 12시간 동안 맑은 우유에서 EGFR, calreticulin 및 p23(각각 카탈로그 번호 PA1-1110, PA1-903 및 MA3-414)에 대해 생성된 1차 항체를 사용하여 프로빙했습니다. 2차 항체(AFP-GAR-800(카탈로그 번호 A32735), AFP-GAM-488(카탈로그 번호 A32723), AF-GAChk-546(카탈로그 번호 A11040)는 TBST에서 전처리한 다음 2시간 동안 블랏에 추가했습니다. Invitrogen Bandmate Automated Western Blot Processor에서 이뮤노프로세싱을 완료했습니다. 이미징은 Invitrogen iBright FL1500 이미징 시스템에서 완료했습니다.

업그레이드 프로그램

오리지널 iBlot 또는 iBlot 2 장치를 사용하고 계십니까? iBlot 3 장치로 업그레이드하기 위한 인센티브 프로그램에 대해 자세히 알아보십시오.