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Soluções RNAlater para estabilização e armazenamento de RNA
Armazene e estabilize amostras de RNA com RNAlater
A solução de estabilização RNAlater da Invitrogen é um reagente de armazenamento e estabilização de RNA de tecido aquoso e não tóxico que permeia rapidamente os tecidos para estabilizar e proteger o RNA celular. A solução RNAlater minimiza a necessidade de processar imediatamente amostras de tecido ou congelar amostras em nitrogênio líquido para processamento posterior. As amostras de tecido podem ser coletadas e submersas em solução RNAlater para armazenamento, sem comprometer a qualidade ou a quantidade de RNA obtido após o posterior isolamento de RNA.
Dez principais maneiras de melhorar o isolamento de RNA
Faça download do guia de referência de RNA
Estabilidade do tecido ao longo do tempo com o uso de solução de armazenamento e estabilização RNAlater
Benefícios do RNAlater
- Inativação imediata de RNase
- Livre de nitrogênio líquido e de freezers
- Minimiza o congelamento
- Ideal para coleta em campo
- Armazenamento flexível de tecido
- Compatível com a maioria dos procedimentos de isolamento de RNA, incluindo todos os kits de isolamento de RNA Ambion da Invitrogen
- Compatível com dados de expressão gênica e perfil genético
- Arquivamento confiável de tecido sem degradação de RNA
Guia para seleção de produtos
| Função | Produto | Descrição |
|---|---|---|
Invitrogen | Coleta de tecido de RNAlater : Solução de estabilização de RNA | Reagente de armazenamento de tecido aquoso e não tóxico que permeia rapidamente o tecido para estabilizar e proteger a integridade do RNA em amostras de tecido não congeladas, minimizando a necessidade de processar ou congelar imediatamente amostras de tecido em nitrogênio líquido. |
| Invitrogen Solução de transição de tecido congelado RNAlater-ICE | Evita a degradação de RNA durante o descongelamento do tecido e minimiza a moagem trabalhosa do tecido congelado, enquanto protege o RNA |
Vídeo: Como estabilizar RNA em amostras frescas
Saiba como estabilizar e proteger de forma rápida e fácil o RNA em amostras frescas. A solução de estabilização RNAlater elimina a necessidade de processar imediatamente as amostras, congelá-las em nitrogênio líquido ou levá-las ao freezer.
Perguntas frequentes (FAQ) sobre RNAlater
Recorte o tecido para ter menos de 0,5 cm em pelo menos uma dimensão e simplesmente mergulhe-o em 5 volumes de solução de RNAlater (por exemplo, uma amostra de 0,5 g requer cerca de 2,5 ml de solução RNAlater). Órgãos pequenos, como rim, fígado e baço de rato, podem ser armazenados inteiros na solução RNAlater. Suspenda novamente as células peletizadas em uma pequena quantidade de PBS, antes de adicionar 5 a 10 volumes de solução RNAlater. As amostras podem ser armazenadas a 4ºC por um mês, a 25ºC por uma semana ou a –20ºC indefinidamente. Arquive tecidos tratados com solução RNAlater a –20ºC.
Para o isolamento de RNA, basta remover o tecido da solução RNAlater e tratá-lo como se tivesse acabado de ser coletado. A maioria dos tecidos pode ser homogeneizada diretamente na solução tampão de lise, embora tecidos mais rígidos, como osso, possam necessitar de congelamento em nitrogênio líquido e moagem.
Fluxo de trabalho de armazenamento de RNAlater para células e tecidos frescos
A solução RNAlater é compatível com meu sistema?
A solução RNAlater foi testada em uma variedade de tecidos de mamíferos, plantas, E. coli, Xenopus, peixes e Drosophila. Foi usada com sucesso com todos os nossos kits de isolamento de RNA Ambion (Figura 1), incluindo kits de RNAqueous, ToTALLY RNA, RNA WIZ e Poly(A)Purist, bem como os produtos de reagente TRI (MRC). Outros kits comerciais de isolamento de RNA e protocolos padrão de isolamento de RNA também são compatíveis com a solução RNAlater.
Figura 1. Compatibilidade de vários métodos de isolamento de RNA com solução RNAlater.
O fígado e o coração de camundongo recentemente dissecados foram colocados na solução RNAlater e armazenados a 4 ºC por três dias. O RNA foi isolado de quantidades iguais de massa de cada tecido usando os kits ToTALLY RNA, RNAqueous ou Poly(A)Purist da Ambion.
O fígado e o coração de camundongo recentemente dissecados foram colocados na solução RNAlater e armazenados a 4 ºC por três dias. O RNA foi isolado de quantidades iguais de massa de cada tecido usando os kits ToTALLY RNA, RNAqueous ou Poly(A)Purist da Ambion.
A solução RNALater preserva a histologia dos tecidos?
Pesquisa recente dos drs. Scott Florell e Sancy Leachman no Instituto do câncer Huntsman [Mod Pathol 14:116 (2001)] demonstra que a solução RNAlater preserva a histologia dos tecidos. Um estudo cego foi realizado no qual dois patologistas compararam cortes de tecido humano que foram imediatamente processados para histologia (fixados em formalina e embebidos em parafina ou congelados) com amostras armazenadas em solução RNAlater, enxaguadas e depois processadas para histologia. Seus resultados indicam que os detalhes morfológicos e as características de coloração eram idênticos para os dois grupos de amostras. Um exemplo de suas descobertas é apresentado na Figura 2. Além da excelente coloração e preservação de detalhes morfológicos, muitas colorações imuno-histológicas tiveram um desempenho igualmente bom nas amostras preservadas em solução RNAlater, sugerindo que a preservação em solução RNAlater não causou danos aos epítopos celulares.
Comparação das amostras de tecido armazenadas
Figura 2. Histologia do tecido preservado em solução RNAlater. As amostras preservadas em solução RNAlater são adequadas para histologia e fornecem excelentes detalhes morfológicos. Os cortes feitos de material preservado em RNAlater eram indistinguíveis de cortes feitos de amostras não tratadas, quando examinadas para critérios histológicos padrão. (A). Seção congelada e corada de H&E de pele humana preservada por uma semana em solução RNAlater antes do processamento. (B). Seção embebida em parafina, corada como acima, mas fixada em formalina de pele humana preservada por uma semana em solução RNAlater antes do processamento.
Qual é a prática solução RNAlater?
Este produto conveniente e barato preserva a integridade de seu precioso RNA e economiza o tempo e o trabalho de moagem de tecido congelado em nitrogênio líquido. A solução RNAlater é econômica e pode ser armazenada em temperatura ambiente.
Recursos técnicos da solução RNAlater
Artigos de notas técnicas
- O RNA permanece estável durante o armazenamento de tecido de longo prazo em RNAlater - Notas técnicas 12(4): Tecidos armazenados em RNAlater ou congelados instantaneamente e armazenados a -80°C... Como o RNA se compara após 2,5 anos?
- Perguntas frequentes de RNAlater - Preservação de RNA antes do isolamento
- RNAlater para estabilização de RNA e proteína
- Faça o tempo ficar parado com RNAlater - Notas técnicas 10(1): A coleta de tecido de RNAlater Ambion: A solução de estabilização de RNA possibilita que os pesquisadores adiem o isolamento de RNA por dias, semanas ou até mesmo meses, após a coleta de tecido, sem sacrificar a integridade do RNA.
- Preservar RNA no tecido antes do isolamento de RNA - Notas técnicas 8(2): A solução RNAlater preserva o RNA nos tecidos a serem usados para histologia.
- RNAlater para estabilização de RNA e proteína - Notas técnicas 11(3): A proteína intacta pode ser recuperada a partir de amostras estabilizadas em solução RNAlater para uso em aplicações em downstream, como análise em gel 2D ou Western blotting.
- RNAlater preserva perfis de expressão gênica bacteriana para análise de array - Notas técnicas 9(5): Padrões notáveis de expressão gênica durante o processamento da amostra
- Solução RNAlater em todo o mundo: Perfis de expressão de estabilização - Notas técnicas 14(2): Aqui descrevemos como três grupos de pesquisa diferentes usaram a solução RNAlater para preservar amostras para estudos de microarray e RT-PCR.
- Descongelar tecidos congelados sem danificar o RNA - Notas técnicas 10(2): RNALater-ICE é uma solução única de estabilização de RNA – basta colocar tecidos congelados em RNAlater-ICE e ir embora! Os tecidos descongelam sem risco de degradação do RNA. Depois de descongelados, os tecidos podem ser processados como tecidos frescos.
Protocolos e manuais
Protocolos complementares
Pôsteres
- RNAlater preserva os perfis de expressão gênica bacteriana para análise de array
Aqui, mostramos que a solução RNAlater estabiliza imediatamente os perfis de expressão de RNA nas amostras gram-positivas e gram-negativas. O RNA foi isolado das bactérias com e sem tratamento em solução RNAlater, e a integridade do RNA foi avaliada no bioanalisador Agilent 2100 e por análise de array baseada em filtro de membrana.