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Cuantificación y cualificación sencillas, rápidas y precisas de ADN, ARN y proteínas
Cuantifique ADN, ARN y proteínas en pocos segundos con solo 1-2 µL de muestra con los espectrofotómetros Thermo Scientific NanoDrop. Puede confiar en la tecnología probada de los instrumentos NanoDrop para realizar evaluaciones precisas y rápidas de la concentración y pureza de las muestras. Y al detectar y analizar todo el espectro, el software de inteligencia de muestras Thermo Scientific Acclaro puede encontrar y corregir la contaminación en sus muestras e incluso diferenciar el ADN del ARN.
Para obtener más información sobre el funcionamiento de los espectrofotómetros NanoDrop, así como sobre su precisión y simplicidad, consulte la sección Recursos .
Inteligencia de muestras avanzada con el software Acclaro
El software Acclaro Sample Intelligence Technology (que viene de serie en los espectrofotómetros NanoDrop One, NanoDrop OneC y NanoDrop Eight) analiza la absorbancia en todo el espectro UV-Vis, no solo longitudes de onda específicas de ácidos nucleicos y proteínas. A continuación, aplica potentes algoritmos quimiométricos para encontrar y corregir la contaminación en las muestras. Obtendrá resultados más fiables en los ensayos posteriores y evitará posibles repeticiones de trabajo gracias a esta eficaz y revolucionaria función.
Cuando el software identifica un contaminante, lo notifica a los usuarios mediante un icono amarillo de contaminante junto a la muestra. Al seleccionar el icono amarillo, se puede ver la muestra original, el contaminante y los espectros de analito corregidos. Una tabla informa de la concentración corregida, para que sepa qué contaminante está presente y si puede utilizar la muestra en experimentos posteriores. Puede continuar con confianza en el resto de su análisis.
Detección e identificación de contaminantes de muestras
La identificación de contaminantes Acclaro utiliza sofisticados algoritmos matemáticos para identificar contaminantes en muestras como fenol, sales de guanidina y proteínas en ácidos nucleicos. Basándose en el espectro de absorbancia total, cuantifica la contribución del contaminante a la absorbancia total de la muestra y calcula la concentración real del analito.
Identificación de contaminantes Acclaro
El software Acclaro ha marcado esta muestra de dsADN (icono amarillo) porque está contaminada con fenol. La contribución de la absorbancia del fenol (naranja) se ha restado del resultado original (total A260, azul) para obtener la concentración de dsADN verdadera y corregida en la muestra (verde).
Las relaciones de pureza por sí solas no pueden ofrecer una imagen exacta de la contaminación de las muestras. Algunos contaminantes habituales, como el fenol, absorben a 260 nm, al igual que los ácidos nucleicos. Como se muestra en el vídeo, la contaminación por fenol puede hacer que otros instrumentos UV-Vis sobrestimen la cantidad de ácido nucleico, lo que da como resultado valores elevados de PCR Ct debido a una plantilla inadecuada. El software Acclaro permite a los instrumentos NanoDrop identificar y corregir una gran variedad de contaminantes.
Evaluación de calidad de última generación mediante el software Acclaro
Los algoritmos quimiométricos permiten a los instrumentos NanoDrop identificar y corregir contaminantes específicos, llevando la evaluación de la calidad al siguiente nivel.
La información de Acclaro alerta de problemas de indicadores y proporciona asistencia técnica a petición y resolución de problemas guiada.
El software Acclaro identifica irregularidades y ayuda a solucionar problemas
Además de identificar y corregir contaminantes, el software Acclaro puede ayudar a detectar problemas e irregularidades y proporciona un fácil acceso a la información de soporte y resolución de problemas.
La información de Acclaro alerta de problemas de indicadores y proporciona asistencia técnica a petición y resolución de problemas guiada.
Un sensor de imagen integrado, asistido por el sistema análisis de imágenes digitales Acclaro, monitoriza continuamente las burbujas intrínsecas en la columna de muestra, lo que garantiza la integridad de la medición.
Diferenciación entre ADN y ARN
La contaminación por ARN en preparaciones de ADN genómico es un problema común en los flujos de trabajo de biología molecular. Tradicionalmente, la tecnología de absorbancia UV no puede distinguir entre ADN y ARN, ya que ambos absorben la luz a 260 nm. Al medir muestras con espectrometría tradicional, el ARN copurificado inflará artificialmente la concentración de ADN, lo que provocará posibles errores en las aplicaciones posteriores.
El software Acclaro Sample Intelligence puede utilizar datos de espectro completo para separar estos ácidos nucleicos y calcular las concentraciones de ADN corregidas.
El espectrofotómetro NanoDrop One detecta y corrige la contaminación por ADN/ARN
Este vídeo muestra a los espectadores un flujo de trabajo de medición de muestras de ácidos nucleicos y, a continuación, la identificación y corrección de la contaminación por ADN/ARN con la espectrometría UV-Vis NanoDrop One.
Datos: El software Acclaro distingue con precisión entre ADN y ARN
El software Acclaro calcula con precisión la concentración de ADN real, incluso en presencia de contaminación por ARN.
El ADN y el ARN se prepararon a partir de células HeLa y se mezclaron en concentraciones diversas y conocidas. Las muestras se leyeron en triplicado en un espectrofotómetro NanoDrop One que ejecuta el software Acclaro Sample Intelligence y en un fluorímetro que utiliza un kit de ensayo de dsADN de amplio rango con un tinte fluorescente que une específicamente dsADN. Resultados: Aunque las lecturas directas A260 (barras azules) difirieron drásticamente de las concentraciones reales de ADN (barras rojas), las concentraciones de ADN corregidas por Acclaro (barras verdes) estaban muy cerca de los valores reales. De hecho, en la mayoría de los casos, los valores corregidos estaban más cerca que las lecturas del fluorímetro (barras moradas).
Resultados rápidos
Un atributo destacable de la cuantificación NanoDrop es la rapidez con la que aparecen los resultados: a los pocos segundos tras iniciar una medición en cualquier espectrofotómetro NanoDrop. Además, con el espectrofotómetro NanoDrop Eight, puede cuantificar hasta ocho muestras en menos de 20 segundos y una placa de 96 pocillos en menos de 6 minutos.
Además, los espectrofotómetros NanoDrop One y Eight ofrecen funciones de blanco y medición automáticos, con lo cual se puede agilizar aún más el flujo de trabajo. Estas opciones hacen innecesario seleccionar manualmente blanco o medir de forma repetida para lotes grandes de muestras.
- Elblanco se refiere a la medición de la absorbancia espectral y al ajuste de los resultados de la muestra para el tampón que contiene las muestras. Si el blanco automático está activado, se hará un blanco cuando baje el brazo del instrumento.
- Si la medición automática está activada, se hará una medición de la muestra cuando baje el brazo del instrumento.
Cumplimiento de la normativa de la FDA
Garantizar la integridad de los datos científicos es un requisito para muchos laboratorios, empresas farmacéuticas y biotecnológicas y biobancos y académicos que trabajan en ensayos clínicos. Las herramientas de seguridad opcionales para los espectrofotómetros de microvolumen NanoDrop One, OneC y Eight ayudan a su laboratorio a cumplir con las normativas de datos en cada paso del proceso.
Cumplimiento de la norma 21 CFR parte 11 de la FDA de EE.UU.
Controle el acceso a las cuentas de usuario, utilice firmas digitales y revise los registros de auditoría como se muestra en la siguiente figura.
Valide sus sistemas
Hay documentos y servicios de cualificación de la instalación y cualificación operativa (IQ/OQ) disponibles para confirmar que el instrumento se utiliza de acuerdo con las especificaciones del fabricante.
Red de varios instrumentos
Instale el software Security Suite o SciVault en un ordenador central para controlar los permisos y ver los registros de auditoría de varios instrumentos en diferentes laboratorios.
Optimice la gestión
El software SciVault se integra en la interfaz de usuario NanoDrop Eight.
El software de seguridad opcional facilita el cumplimiento de la norma 21 CFR parte 11
El control de acceso le ayuda a limitar el acceso al sistema a los usuarios autorizados. El software también incluye registros electrónicos firmados y registros de auditoría seguros, generados por ordenador y con sello de tiempo.
Su compañero de laboratorio fiable desde hace más de 20 años
En los «viejos malos tiempos» (antes de los espectrofotómetros NanoDrop), la cuantificación de muestras de ácidos nucleicos era un proceso lento y laborioso. Las muestras altamente concentradas tenían que diluirse y pipetearse en cubetas para poder medirlas. Los protocolos requerían tiempo, conocimientos expertos, diluciones tediosas y flujos de trabajo complicados, y era habitual cometer errores y tener que repetir el trabajo.
En 2001, el espectrofotómetro NanoDrop 1000 revolucionó el análisis UV-Vis, lo que permitió una cuantificación precisa con solo 1-2 µL de muestra, sin cubetas ni capilares. Los científicos solo tenían que pipetear las muestras directamente sobre la superficie de medición de fibra óptica del instrumento, donde el líquido se fijaba a través de la tensión superficial. Este proceso no solo era rápido y sencillo, sino que también reducía las diluciones manuales, que solían propiciar errores.
Con los años, los espectrofotómetros NanoDrop se han vuelto indispensables en muchos laboratorios y han acumulado más de 55 000 citas científicas. Basándonos en sus opiniones, hemos seguido innovando y desarrollando esta tecnología para satisfacer las cambiantes necesidades de científicos como usted. Por ejemplo, el software Acclaro Sample Intelligence de los modelos actuales permite a los usuarios no solo detectar, sino también identificar y corregir contaminantes y diferenciar el ADN del ARN. Este software también ayuda a los laboratorios a implementar los procedimientos de seguridad de cuentas y firma electrónica necesarios para cumplir con los requisitos de la normativa 21 CFR parte 11 de la FDA.
Gracias por contribuir a hacer que los espectrofotómetros NanoDrop sean esenciales para simplificar la rutina diaria en tantos laboratorios.
Lea una entrevista con el especialista en marketing de productos Patrick Brow sobre el pasado, el presente y el futuro de la tecnología NanoDrop.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.