Recursos para el espectrofotómetro NanoDrop

Materiales en línea y descargables para los espectrofotómetros NanoDrop

Los manuales, folletos, notas técnicas y de aplicación, vídeos, seminarios web y otros recursos de esta sección le ayudarán a sacar el máximo provecho a su espectrofotómetro Thermo Scientific NanoDrop One/OneC, Eight o Lite Plus, o a su fluoroespectrómetro 3300.

 

Para obtener materiales similares para los espectrofotómetros NanoDrop 2000/2000c, 8000, Lite y 1000, consulte Recursos para los instrumentos NanoDrop descatalogado en la parte inferior de esta página.

Recursos destacados para el espectrofotómetro NanoDrop

Guía para la selección de productos NanoDrop

Con la confianza de científicos de todo el mundo, los instrumentos Thermo Scientific NanoDrop establecen el estándar en el análisis de microvolúmenes, lo que proporciona una concentración precisa de muestras de proteínas y ácidos nucleicos, así como información sobre la pureza de las muestras.

Uso de NanoDrop One para cuantificar preparaciones de péptidos y proteínas a 205 nm

Los biólogos pueden cuantificar muestras de péptidos y proteínas en el espectrofotómetro UV-Vis de microvolumen Thermo Scientific NanoDrop One/Oneᶜ mediante la aplicación de absorbancia directa preprogramada A205.

Preguntas frecuentes: Identificación de contaminantes de muestras de NanoDrop One

El espectrofotómetro UV-Vis de microvolumen Thermo Scientific NanoDrop One está diseñado para ayudar a los investigadores científicos a lograr el éxito en aplicaciones posteriores mediante la cuantificación precisa de muestras de ADN, ARN y proteínas utilizando solo 1-2 µL.

Soluciones UV-Vis para el sector biofarmacéutico y biocientífico

Conozca las últimas aplicaciones y avances de la espectrofotometría UV-Vis en la investigación biofarmacéutica y biocientífica. El registro gratuito le permite acceder a las cinco sesiones.

Aspectos destacados de la investigación: Espectrofotómetros NanoDrop en la investigación del SARS-CoV-2

El SARS-CoV-2, el virus responsable del COVID-19, es un virus y β-coronavirus de ARN (+ssARN) monocatenario, no segmentado, con envoltura y de sentido positivo. Aún no se ha resuelto el ciclo de vida viral del SARS-CoV-2, un paso fundamental para estudiar la progresión de la infección.

 

Los espectrofotómetros NanoDrop, una de las muchas herramientas de Thermo Fisher Scientific para la investigación del SARS-CoV-2, desempeñan un papel vital en investigación de las las enfermedades infecciosas, ya que la cuantificación del ARN/ADN vírico y la identificación de contaminantes son pasos necesarios para garantizar la precisión de los resultados posteriores.

Cuantificación sencilla, fácil y rápida de ácidos nucleicos y proteínas

Quizás la característica más llamativa de la cuantificación de NanoDrop es lo sencillo y fácil que es de utilizar. El innovador sistema de pedestal de NanoDrop ayuda a minimizar el volumen de la muestra y simplifica el funcionamiento. Basta con pipetear una gota de su muestra de ADN, ARN o proteínas —tan solo 1 o 2 µL— en el pedestal y bajar el brazo. No se necesitan cubetas ni capilares y los resultados aparecen en segundos.

1. Abra el brazo y pipetee la muestra directamente sobre el pedestal.

2. Cierre el brazo. Se forma una columna de muestra.

3. El pedestal se mueve para ajustarse automáticamente y obtener una longitud de trayectoria óptima.

4. Una vez finalizada la medición, limpie las superficies con un paño de laboratorio que no suelte pelusa antes de continuar con la siguiente muestra.

Cuantificación precisa de ácidos nucleicos y proteínas mediante absorbancia UV

Los espectrofotómetros NanoDrop funcionan según el principio de absorbancia del espectro ultravioleta visible (UV-Vis). Los ácidos nucleicos absorben la luz con un pico a 260 nm. Las proteínas purificadas absorben la luz a un pico de 280 nm, mientras que los péptidos y las proteínas que carecen de residuos de triptófano y tirosina absorben a un pico de 205 nm. Muchos contaminantes que permancen después del uso de protocolos de extracción absorben a 280 nm o a 230 nm.

Generación de señal óptica

La medición fotométrica de los ácidos nucleicos (ADN y ARN) y las proteínas se basa en sus propiedades absorbentes intrínsecas. Cuando se mide un espectro de absorción, los ácidos nucleicos absorben la luz con un pico característico a 260 nm.

Cuantificación de muestras de ácidos nucleicos y proteínas

Las concentraciones de ácidos nucleicos y proteínas se calculan automáticamente a partir de sus valores de absorbancia medidos a la longitud de onda deseada mediante la ecuación de Beer-Lambert, donde:

  • c = concentración en molar (M)
  • A = absorbancia UV en unidades de absorbancia (AU)
  • e = coeficiente de absorbancia molar dependiente de la longitud de onda (o coeficiente de extinción) en M-1cm-1
  • L = longitud de trayectoria de luz en cm

Una de las implicaciones de la ecuación de Beer-Lambert es que, para muestras de baja concentración, una mayor longitud de trayectoria se traduce en una mayor precisión y relación señal-ruido. Los instrumentos NanoDrop optimizan automáticamente la longitud de la columna líquida para obtener la máxima precisión en un amplio intervalo de concentración.

Precisión de la cuantificación de dsADN de NanoDrop One validada frente a un instrumento de referencia. Se prepararon una serie de diluciones de dsADN que oscilaban entre los 3 y los 28 000 ng/µL y se cuantificaron espectrofotométricamente a 260 nm en los espectrofotómetros NanoDrop One y Evolution 300. (A) Se trazó una comparación de linealidad en todo el intervalo de concentración del instrumento. La línea de regresión demuestra que los resultados de concentración de dsADN de NanoDrop One estaban bien alineados (R2 = 0,9991) con los valores obtenidos en el espectrofotómetro Thermo Scientific Evolution 300 de referencia. (B) También se trazó un análisis más detallado de las comparaciones de linealidad en el intervalo de concentración bajo (de 3 a 495 ng/μL). La línea de regresión muestra una estrecha correlación (R2 = 1) con los resultados de Evolution 300 y una linealidad excelente en el extremo inferior del intervalo de detección. Para obtener información más detallada sobre el método y los datos, consulte la nota técnica sobre el ácido nucleico NanoDrop One.

Análisis de pureza para muestras de ácido nucleico y proteínas

La pureza de una muestra se puede evaluar utilizando relaciones de absorbancia de una longitud de onda a otra. La contaminación de las muestras puede provocar una sobreestimación de la concentración de ácido nucleico o imprecisiones en procesos o mediciones posteriores.

 

Principales relaciones de pureza para la absorbancia UV

Índice

Analito

 Considerado «puro»

Factores que pueden provocar índices anormales

A260/A230

Ácidos nucleicos

ADN: ~1,8
ARN: ~2,0

Contaminantes indicados por índices bajos:

·    Proteínas

·    Fenol residual u otros reactivos utilizados en el protocolo de extracción

A260/A230

Ácidos nucleicos

ADN/ARN: ~2,0-2,2

Contaminantes indicados por índices bajos:

·    Proteínas

·    Remanente de carbohidratos (a menudo un problema con las plantas)

·    Fenol residual de la extracción de ácido nucleico

·    Guanidina residual (a menudo se utiliza en kits basados en columnas)

·    Glicógeno utilizado para la precipitación

Factores indicados por índices altos:

·    Problemas con la medición del blanco

A260/A230

Proteínas

~0,6

Contaminantes indicados por índices altos:

·    Ácidos nucleicos

Más allá de los índices de pureza, las impurezas pueden alterar los perfiles espectrales, desplazando los picos y las depresiones, como se muestra en la figura.

Los contaminantes provocan cambios en los perfiles espectrales

Espectros de ADN purificado sin contaminación (A, rojo) y de la misma muestra contaminada con guanidina (B, verde) y fenol (C, marrón).

Los instrumentos NanoDrop que ejecutan el software Acclaro Sample Intelligence pueden utilizar este tipo de datos de espectro completo para identificar contaminantes, como se describe en Características.

Documentos para el espectrofotómetro NanoDrop One/Oneᶜ

Vídeos del espectrofotómetro NanoDrop

Seminarios web sobre el espectrofotómetro NanoDrop

Seminario web: Evaluación de muestras de proteínas mediante el espectrofotómetro UV-Vis NanoDrop One

La evaluación de muestras de proteínas es un paso importante en muchos flujos de trabajo de proteínas. Este seminario web explica cómo los instrumentos NanoDrop simplifican el proceso, comparan los diferentes ensayos de proteínas disponibles y revisa las mejores prácticas para una cuantificación precisa de proteínas.

Seminario web: Vacunas de ARNm: desarrollo, fabricación y cómo NanoDrop Eight puede ayudar

Este seminario web analiza brevemente el historial y los flujos de trabajo de las vacunas de ARNm y examina cómo los espectrofotómetros NanoDrop pueden ayudar a los investigadores e ingenieros de producción a evaluar la concentración y pureza de los ácidos nucleicos al cumplir las normativas 21 CFR parte 11.

Seminario web: Cumplimiento de la normativa en laboratorios farmacéuticos de garantía y control de calidad

Descubra cómo las nuevas herramientas de software permiten a las empresas farmacéuticas realizar pruebas de garantía de calidad muy precisas, al tiempo que garantizan la integridad de los datos durante todo el proceso de desarrollo de fármacos.

Seminario web: Innovaciones de NanoDrop y el aula: Inspirando a la próxima generación de científicos

El acceso a las últimas tecnologías puede marcar un mundo de diferencia en la educación actual. Los maestros cuentan que están integrando los instrumentos NanoDrop en sus aulas y laboratorios, ofreciendo a los estudiantes la oportunidad de aprender sobre esta tecnología líder en el sector.

Seminario web: Cuantificación de extractos de ADN de soja para la detección posterior de OMG

Este seminario web ofrecerá una visión general de la detección de OMG a través de qPCR y destacará el uso del espectrofotómetro NanoDrop Eight para garantizar el éxito de la reacción.

Asistencia y recursos educativos para espectrofotómetros NanoDrop

Para obtener asistencia técnica en Estados Unidos y Canadá, llame al 877-724-7690, opción 4, o envíe un correo electrónico al servicio técnico de NanoDrop a nanodrop@thermofisher.com. Para obtener asistencia internacional, envíe un correo electrónico a nanodrop@thermofisher.com o póngase en contacto con su distribuidor local de NanoDrop.

 

Muchas cuestiones técnicas se pueden resolver consultando la documentación, la bibliografía, los vídeos y los seminarios web mencionados. Además, nuestros materiales educativos gratuitos en línea incluyen estos centros de aprendizaje y páginas sobre espectroscopía, biología de proteínas y cuantificación de ácidos nucleicos.

 

Centro de aprendizaje de espectroscopía y análisis elemental y de isótopos

Conozca mejor las tecnologías que ofrecen análisis cualitativos y cuantitativos rápidos y eficientes para una gran variedad de mercados industriales, educativos, medioambientales y sanitarios. Entre los temas relevantes para la cuantificación de ácidos nucleicos y proteínas se incluyen las animaciones educativas NanoDrop One y las soluciones espectroscópicas, reológicas, de extrusión y de rayos X para productos farmacéuticos.

Centro de aprendizaje de biología de proteínas

Nuestra presentación gratuita sobre los métodos y tecnologías de análisis de proteínas contiene artículos, vídeos y aprendizaje guiado, además de otros recursos sobre proteínas y las formas de estudiarlas. La descripción general de los métodos de ensayo de proteínas puede ser un buen punto de partida.

Página sobre cuantificación de ARN/ADN

Nuestra página sobre cuantificación de ARN/ADN contrasta la fotometría UV-Vis con la fluorescencia como métodos para cuantificar ácidos nucleicos, y compara los instrumentos NanoDrop y Qubit y los lectores de placas para realizar ambos tipos de mediciones.

Recursos para instrumentos NanoDrop descatalogados

Encuentre manuales, folletos, notas técnicas y de aplicación, vídeos y otros recursos que le ayudarán a sacar el máximo provecho a su espectrofotómetro NanoDrop 2000/2000c, 8000, Lite o 1000.

Recursos para el espectrofotómetro NanoDrop 1000

Recursos para el espectrofotómetro NanoDrop 2000/2000c

Recursos para el espectrofotómetro NanoDrop 3300

Recursos para el espectrofotómetro NanoDrop 8000

Recursos para el espectrofotómetro NanoDrop Lite

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.