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Evalúe las opciones entre portaobjetos desechables cómodos, portaobjetos reutilizables económicos y funcional portaobjetos estándar. Un nuevo módulo de software admite el cumplimiento de registros electrónicos . Para el contador celular automatizado Countess 3 FL, los cubos de luz EVOS proporcionan una iluminación constante y brillante, mientras que los reactivos ReadyCount están optimizados para aplicaciones de recuento de fluorescencia.
Con los contadores de células automatizados Countess 3 y Countess 3 FL, puede elegir entre prácticos portaobjetos desechables y portaobjetos reutilizables, económicos y respetuosos con el medio ambiente . Ambos están diseñados específicamente para su uso con contadores de células Countess.
Cada portaobjetos tiene dos cámaras para contar una muestra en duplicados o dos muestras diferentes. Sólo se necesitan 10 µL de muestra mezclada con 10 µL de azul triptán para un recuento de campo claro. Las células se cuentan en una ubicación central de la cámara de recuento. El volumen de muestra contado es de 0,4 µl, equivalente a cuatro cuadrados de 1 mm² en un hemocitómetro estándar.
Los portaobjetos desechables de la cámara de recuento de células Countess son prácticos para procesar rápidamente muestras celulares cuando hay muchos que procesar, cuando la instalación de cultivo celular está ocupada, o para simplificar la eliminación de muestras contaminadas o peligrosas. Los portaobjetos desechables también eliminan el riesgo de contaminación de las muestras residuales y la frustración de encontrar un hemocitómetro compartido sucio. A diferencia de un hemocitómetro, no es necesario limpiar portaobjetos de cámara antes o después de su uso.
El portaobjetos reutilizable Countess es una alternativa ecológica y económica a los portaobjetos desechables. Aunque su laboratorio solo utilice unos pocos portaobjetos al día, puede reducir el coste y generar menos residuos al año con el portaobjetos reutilizable. Esta innovación hace que sea asequible para los laboratorios automatizar sus recuentos celulares. El portaobjetos reutilizable debe limpiarse y secarse de un recuento a otro, al igual que con un hemocitómetro.
El portaobjetos de cámara y el portaobjetos reutilizable tienen soportes de portaobjetos diferentes. Cuando se emplean portaobjetos de cámara, el soporte puede permanecer en el contador para que pueda insertar fácilmente cada portaobjetos directamente en él. El portaobjetos reutilizable se inserta en el soporte de portaobjetos primero y, a continuación, la combinación de portaobjetos y soporte se inserta en el Countess Automated Cell Counter 3 o 3 FL.
Utilice el portaobjetos estándar Countess 3 como referencia funcional para viabilidad y recuentos de células. Este 58 portaobjetos listo para usar contiene entre 0,5 y 1,5 x 10⁶/ml microesferas de montaje permanente 15 µm en una cámara de recuento de células. Cuando se visualiza en campo claro en el contador celular automatizado Countess 3 o FL, las microesferas imitan la apariencia de una mezcla de 1:1 células vivas y muertas teñidas con solución de azul de triptán.
Si se miran en el Countess Automated Cell Counter 3 FL, las microesferas también son fluorescentes en una mezcla 1:1, lo que proporciona aproximadamente un 50 % de detección con un cubo de luz DAPI o GFP y aproximadamente un 50 % de detección con un cubo de luz RFP, Texas Red o Cy5. Las poblaciones de fluorescencia del 50% se muestran en el recuento de fluorescencia y de canal doble .
Las microesferas montadas de forma permanente en el portaobjetos estándar Countess 3 presentarán una variabilidad mínima de un recuento a otro. Puede usar el portaobjetos como referencia funcional para recuentos de células y viabilidad entre días o entre instrumentos Countess 3. El portaobjetos está listo para su uso y es reutilizable.
La solución de software Countess SAE es un módulo de software opcional que permite un mantenimiento de registros electrónicos que cumple con la norma de firmas y registros electrónicos de la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) de EE. UU. (21 CFR Parte 11). Las capacidades del software incluyen la restricción de usuarios no autorizados, directivas de contraseñas y fechas de caducidad, permisos y funciones de usuario definidas, el seguimiento de todos los cambios de datos a través un registro de auditoría, informes de auditoría y flujos de trabajo de firma electrónica integrados. Todos los contadores de células automatizados Countess 3 y Countess 3 FL pueden ejecutarse en Modo SAE tras la adquisición de la licencia de software de Countess SAE.
Para obtener más información acerca de la solución de software Countess SAE, consulte Características.
Para utilizar la solución de software Countess SAE con el contador celular automatizado Countess 3, se puede adquirir un software licencia de forma independiente{109 110}o como parte de un paquete de instrumento Countess 3 FL y software .
Con las capacidades de fluorescencia del Countess Automated Cell Counter 3 FL, puede visualizar fácilmente proteínas fluorescentes y realizar ensayos de apoptosis o proliferación en la sala de cultivo celular.
Los cubos de Luz LED Invitrogen EVOS que alimentan estas aplicaciones de fluorescencia en el Countess 3 FL proporcionan más de 50.000 horas de iluminación brillante (pero ajustable) que permanece constante con una degradación mínima a lo largo del tiempo. Los cubos de luz LED EVOS, económicos, respetuosos con el medio ambiente y optimizados espectralmente, están diseñados para un control preciso, un mantenimiento mínimo y una fiabilidad excepcional.
Cada cubo contiene un LED, óptica de iluminación y filtros. Los cubos de luz los puede intercambiar el usuario y los detecta automáticamente el sistema Countess 3 FL para facilitar la conexión plug-and-play.
Consejo: Los cubos de luz no se incluyen con el contador de células Countess 3 FL para permitir la personalización basada en los tintes y proteínas fluorescentes utilizadas.
Elija cubos de luz con espectros que coincidan con los tintes y la aplicación de recuento que desee utilizar. Los cubos de luz son sencillos de intercambiar y se pueden comprar en cualquier momento para cumplir con los nuevos requisitos de aplicación. Son compatibles con una amplia gama de tintes.
Aunque muchos investigadores eligen GFP y RFP para la detección de proteínas fluorescentes, hay 14 opciones diferentes de cubos de luz LED EVOS. DAPI es un tinte nuclear usado tradicionalmente. La tabla muestra los tintes más habituales detectados por siete cubos de luz reconocidos.
N.º de cat. | Cubo de luz | Excitación (nm) | Emisión (nm) | Tintes/proteínas fluorescentes compatibles habituales |
AMEP4950 | DAPI 2.0 | 357/44 | 447/60 | DAPI, Hoechst, NucBlue, Alexa Fluor 350, BFP |
AMEP4951 | GFP 2.0 | 470/22 | 525/50 | GFP, Alexa Fluor 488, SYBR Green, FITC, Calcein, Fluo-4, MitoTracker Green, pHrodo Green |
AMEP4954 | YFP 2.0 | 500/24 | 542/27 | EYFP, naranja de acridina (+ADN) |
AMEP4952 | RFP 2.0 | 531/40 | 593/40 | RFP, Alexa Fluor 546, Alexa Fluor 555, Cy3, PE, dTomato, MitoTracker Orange, Rhodamine Red, SYTOX Orange |
AMEP4955 | Texas Red 2.0 | 585/29 | 628/32 | Texas Red, Alex Fluor 568, Alexa Fluor 594, MitoTracker CMXRos, mCherry, pHrodo Red, Cy3.5, CellTracker Red CMTPX |
AMEP4956 | Cy5 2.0 | 628/40 | 692/40 | Cy5, Alexa Fluor 647, Alexa Fluor660, DRAQ5 |
AMEP4667 | Cy7 | 710/40 | 809/81 | Cy7, IRDye™ 800CW, DyLight 750 |
La tinción de fluorescencia puede proporcionar datos abundantes sobre células, especialmente en muestras heterogéneas, pero las tinciones comerciales pueden ser difíciles de mezclar, titular y aplicar para un rendimiento óptimo. Los reactivos Invitrogen ReadyCount son tinciones fluorescentes estables de sobremesa, que están preoptimizadas para su uso con el Countess Automated Cell Counter 3 FL.
Los reactivos ReadyCount se pueden utilizar para la tinción de células nucleadas específicas dentro de poblaciones mixtas, lo que reduce la complejidad y mejora la reproducibilidad entre recuentos y entre muestras cuando se utilizan junto con el cubo de luz EVOS adecuado. Solo hay que mezclar 10 µl de muestra celular con 10 µl de tinción, pipetear la solución en una cámara Countess o un portaobjetos reutilizable e insertar el portaobjetos en el instrumento.
La tinción de viabilidad celular ReadyCount Green/Red es una mezcla AO/PI optimizada que tiñe las células nucleadas de verde y las células muertas de rojo, y fluoresce y se cuenta cuando se usa con cubos de luz EVOS GFP y RFP o Texas Red . Las células se muestran con una ampliación (izquierda) de 1,0 x y con una ampliación (derecha) de 4,0 x.
Por ejemplo, la tinción de viabilidad celular ReadyCount Green/Red es una mezcla optimizada de naranja de acridina y yoduro de propidio (AO/PI), que son tinciones estándar para células nucleadas y viabilidad, respectivamente. Incluso en muestras de células mononucleares de sangre periférica (CMSP), que son notablemente difíciles de contar con el uso de azul de tripano, las tinciones AO/PI permiten la discriminación de glóbulos rojos (RBC), plaquetas y residuos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.