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RNA later 保存液是一种水溶性、无毒性组织储存试剂,其可迅速渗透到组织内以稳定和保护细胞的RNA。 使用RNA later 保存液便不再需要立即处理组织样本,亦无须将样本在液氮中冷冻待随后处理。 收集组织块并浸没于RNA later 溶液中保存,这样就不会破坏后续RNA提取过程中获得的RNA的品质和数量。
功能 | 产品 | 描述 |
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RNAlater高稳定性产品 | RNAlater组织收集: RNA稳定性解决方案 | 水溶性、无毒性组织储存试剂,可迅速渗透到组织内以稳定和保护未冷冻组织样本中RNA的完整性,亦无须立即处理组织样本或将其冷冻于液氮中。 |
RNAlater-ICE冻存组织转染溶液 | 防止组织冷冻过程中出现RNA降解,尽可能避免费力地研磨冷冻组织,保护RNA |
将组织切成任一方向小于0.5 cm的薄片,并浸没于约5体积的RNA later 保存液中 (如0.5 g样本需要约2.5 mL的RNA later 保存液)。 小的器官如大鼠肾、肝以及脾可整个保存在RNA later 保存液中。 在少量PBS中重悬细胞沉淀,然后加入5–10体积的RNA later 保存液。 样品在4°C下可保存1个月,25°C下可保存一周,在-20°C下可无限期保存。 记录在–20°C下用RNA later 保存液处理的组织。
用于RNA提取时,只需将组织从RNA later 保存液中取出,即可按刚收集的组织进行处理。 大多数组织可在裂解缓冲液中直接匀浆处理,但较硬的组织 (如骨骼) 则需要在液氮中冷冻保存并研磨。
RNA later 保存液已经过各种哺乳动物组织、植物、 大肠杆菌 、 非洲爪蟾 、鱼和 果蝇 测试。 它已成功应用于我们所有的Ambion RNA分离试剂盒 (图1),包括RNAqueous、ToTALLY RNA™、RNA WIZ和Poly(A)Purist™试剂盒及TRI Reagent产品 (MRC)。 其它商品化RNA分离试剂盒和标准RNA分离实验方案亦可与RNA later保存液配合使用。
图 1. RNAlater 保存液可适用于各种RNA提取方法。 将新鲜切片的小鼠整个肝脏和心脏放入RNAlater溶液中,置于4°C下保存三天。 采用Ambion的ToTALLY™ RNA、RNAqueous™或Poly(A)Purist™试剂盒从同等质量的不同组织中提取RNA。 |
Huntsman癌症研究所的Scott Florell和Sancy Leachman博士近期的研究 [Mod Pathol 14:116 (2001)] 显示,RNAlater溶液确实能够保持组织的组织学特征。 在一项盲法研究中,两位病理学家比较了立即进行组织学处理 (福尔马林固定石蜡包埋) 与采用RNAlater溶液保存、冲洗后进行组织学处理的人组织切片。 其结果表示两组样本的形态学特点和染色特性相同。 其研究结果示例请见图2。 RNAlater 保存液除可提供极佳的染色性能并保护形态学信息外,许多免疫组化染料亦可在采用该溶液保存的样本中获得出色的性能,说明采用RNAlater溶液保存样本不会损伤细胞表位。
图2. RNAlater保存的组织的结构。
RNA later 保存液保存的样本适用于组织学,并可提供极佳的形态学详情 在检查标准的组织学标准时,RNA later 保存的材料切片与未处理样本切片无差异。 (A). H&E染色的人皮肤冷冻切片置于RNA later 溶液中保存一周然后处理。 (B). 采用上述方法染色并以福尔马林固定石蜡包埋的人皮肤冷冻切片置于RNA later 溶液中保存一周然后处理。
这款方便且价格低廉的产品可以稳定保存您的珍贵RNA的完整性,无需研磨液氮中冻存的组织,节省了您的时间和精力。 RNA later 保存液经济实惠,并且可于室温储存。
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