使用 FastDigest 限制性内切酶和 FastAP 碱性磷酸酶进行去磷酸化

多年来，我们熟知 FastAP 碱性磷酸酶在 FastDigest 缓冲液（绿色和无色两种版本）中具有完全活性。然而，最近对酶进行的彻底检查表明，去磷酸化效率高度依赖于酶切步骤中所用限制性内切酶的性质。

对于一些内切酶，可同时进行限制性酶切和去磷酸化反应。其他酶可能需要在限制性内切酶酶切后以及添加 FastAP 碱性磷酸酶之前进行热灭活或柱纯化。

因此，所有 FastDigest 限制性内切酶均经过测试，以确定使用 FastAP 碱性磷酸酶进行完全去磷酸化的最佳实验方法。在下表中列出了这些建议。