Indo-1 钙指示剂

• 荧光 Ca²⁺ 指示剂可以准确测量细胞内钙浓度
• 比率式读数能够最大限度减少混合细胞群中光漂白、渗漏、上样不均匀以及细胞厚度不同的影响，从而获得更稳定且可重现的结果
• 特别适合 FAC 和多色荧光应用
• 已在文献中获得广泛认可，在众多细胞系中多次引用
   

Indo-1 是一种比率式灵敏指示剂染料，用于测量细胞内钙。自1985年推出以来，已有数千份文献引用 indo-1，这些文献描述了 indo-1 在多种细胞中的应用。这些重要的 Ca²⁺ 指示剂由 Roger Tsien 和合作者开发，为促进了解钙在细胞调控中的作用做出了重大贡献。

使用 indo-1 及其衍生物能够进行比率式测量是这些探针的一项重要特性。在指示剂的低浓度水平下，根据 indo-1 的 405/485 nm 发射比可以准确测量细胞内 Ca²⁺ 浓度。通过比率分析测量可显著降低染料上样不均匀、染料泄漏和光漂白的影响以及在厚度不均等的细胞中测量 Ca²+ 的相关问题。通常，可在一小时内测量 indo-1 荧光而不会因泄漏或漂白而产生明显的荧光损失。此外，indo-1 足够明亮，因此可在不太可能导致显著 Ca²⁺ 缓冲或 Ca²⁺ 瞬态衰减的细胞内染料浓度下进行测量。

与结合 Ca²⁺ 时吸收发生较大变化的 fura 指示剂相比，在大约 350 nm 处激发时，indo-1 的发射从大约 475 nm（无 Ca²⁺）变为大约 400 nm（有 Ca²⁺）（图1）。 Indo-1 尤其适用于流式细胞仪，从中更易于使用单个激发源（通常是流式细胞仪中氩离子激光的紫外光系列）更换发射滤光片并且特别适用于多色荧光应用。可使用与 indo-1 相同的仪器配置执行 indo-5F 测量。