• 组合效率 - 在成像和高通量筛选 (HTS) 应用中以较少的工作量实现较大的染料加载量，并增加染料保留量（图1）
  • 易于加载 - 混合染料和 PowerLoad 并直接添加到细胞中
  • 可靠 - 传感器和染料中的细胞加载效率更高，结果更可靠
  • 制备方便 - 丙磺舒可快速且简单地溶于 水中，而不是丙磺舒游离酸形式常规所需的 NaOH

许多荧光染料难溶于水，难以加载到细胞中。 此外，位于细胞膜中的有机阴离子转运蛋白会挤出染料和指示剂，导致染料保留较差。这些特征导致性能较差，背景荧光较高，信噪比水平较低。

染料加载和保留机制

图1：染料加载和保留机制。 在添加 PowerLoad 浓缩液前先使其与染料混合，可增强细胞对荧光染料的摄取。 荧光染料转运至细胞后，细胞酯酶可除去染料的 AM 酯部分。 染料可通过膜中的阴离子转运蛋白排出细胞。 丙磺舒可阻断这种胞外转运，从而将染料保留在细胞中。

为改善染料加载量，Invitrogen 开发了 PowerLoad 浓缩液，这是一种优化的非离子型、普朗尼克表面活性剂多元醇配方，旨在帮助水不溶性染料和其他材料溶于生理介质 （图 2）。

无细胞加载试剂的 Fluo-4 AM 钙调动信号窗的比较

图2： 使用普朗尼克 F-127 和 PowerLoad 对卡巴胆碱刺激的 CHO M1 细胞进行无细胞加载试剂的 Fluo-4 AM 钙调动信号窗的比较(对照)。

对于染料保留问题，使用丙磺舒抑制荧光染料的外排是减少基线荧光的有利方法。 为提高此化合物的利用率，我们开发了一种 水溶性丙磺舒配方 （图3）。

使用 2.5 mM 丙磺舒抑制染料挤出

图3： 使用 2.5 mM 丙磺舒抑制染料挤出。在 37℃ 下将 CHO M1 细胞在染料加载溶液中孵育60分钟，这可增强丙磺舒的作用。使用 20 nM 卡巴胆碱在 CHO M1 细胞中触发钙释放。对 Fluo-4 NW 测定中 4 次量测（不扣除基线）的平均值作图。

配合使用时，PowerLoad 浓缩液和水溶性丙磺舒可在通过阴离子泵主动挤出乙酰化形式的细胞中帮助加载和保留 AM 酯染料 在成像和高通量筛选 (HTS) 应用中，这些试剂的结合使您可以较少的工作量实现较大的染料加载量。应进行适当的控制，以确保 PowerLoad 浓缩液不会改变细胞的膜特性。

仅供科研使用，不可用于诊断目的。

CMD SchemaApp code