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Fluo-4 Direct 钙含量测定试剂盒旨在通过抑制培养基产生的背景荧光达到较大的测定窗,对细胞荧光几乎没有影响。 这种先进的配方允许在含血清的培养基存在下,以简单的“仅添加”形式即可进行测定。
我们的 Fluo-4 Direct 测定还可与我们一系列经验证的 GPCR 细胞系配合使用,为单个细胞系提供多种读取选项。Tango™ TBXA2R-bla U2OS 细胞系用于多重β-抑制蛋白募集反应(与 β-内酰胺酶报告基因一起读取),使用 Fluo-4 Direct 测定直接测量钙调动(图 1)。
图1.Fluo-4 直接钙含量测定可用于获得钙调动数据,以补充 Tango offering 中 Gq 偶联受体的β-抑制蛋白募集数据。
我们的 Fluo-4 Direct 测定可用于获得激动剂(图2)和拮抗剂(图3)两种模式下化合物的适当药理学特征。
图2.对毒蕈碱1(M1)受体激动剂的剂量依赖性钙反应。将 CHO M1 细胞接种在多聚-d-赖氨酸包被的384孔板中,并孵育过夜。第二天,使用 Fluo-4 Direct 测定试剂盒来测定细胞对卡巴胆碱的钙反应。用激动剂卡巴胆碱、MCN-A-343、贝胆碱、氧化震颤素和毛果芸香碱刺激细胞。测量值以相对荧光单位表示,即最大响应值减去最小响应值再除以最小响应值。激动剂效力的排序与已发表的结果一致。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。