分裂阻滞细胞系
  • 使用冷冻细胞作为普通的，经济高效的检测试剂进行筛选
  • 使您的筛选流程摆脱费力且耗时的活细胞生产
  • 获得类似于在生长细胞中观察到的药理学特征
  • 避免与细胞分裂相关的变异性；获得更一致的结果
GeneBLAzer Cellular Assay
Invitrogen 针对 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 的分裂停滞技术 (1-4) 提供铺板的冷冻细胞，从而可便利、经济高效地进行筛选（图1）。GeneBLAzer® 分裂阻滞(DA) 细胞表现出与 GeneBLAzer® 分裂细胞相似的响应曲线（图2），所收集的药理学数据值得您信赖。使用 GeneBLAzer® DA 细胞，可在解冻后 24 小时内进行检测并且可在长达五天内保持检测的一致性。分裂阻滞细胞的细胞数量在铺板后仅略微增加，因而消除了检测过程中由细胞分裂引起的变异性，并且提供了更一致的结果（图3）。
Validated GPCR Cell Lines
图1 - 经济高效地获得高质量、经校验的 GPCR 细胞系
图2 - VPAC1 CHO-K1 非分裂停滞细胞和分裂停滞细胞对 VIP 的剂量反应。在检测前一天以分裂停滞和非分裂停滞形式将 VPAC1 CHO-K1 细胞接种到384孔板（10,000个细胞/孔）中。测定当天，在存在 0.5% DMSO 的情况下，用指定浓度范围内的 VIP 刺激细胞，持续3小时。然后在细胞中上样 LiveBLAzer™-FRET B/G 底物（最终浓度为 2 μM 的 CCF4-AM + 1 mM 溶液 D），持续2小时。使用标准荧光板读数仪获得 460 nm 和 530 nm 处的荧光发射值，并将响应比率相对于指定的 VIP 浓度作图（每个数据点 n = 6）。
Division Arrested Cells
图 3 - 分裂停滞细胞提高了检测一致性。三组分裂停滞 (DA) 细胞和生长 (GR) 细胞进同时接种，但在三个不同的时间点进行检测。在分裂停滞细胞中观察到的 CV 和 Z'-因子值（CV 7.5%，Z'-因子 0.76）优于生长细胞中的相应值（CV 20.1%，Z'-因子 0.38）。

GeneBLAzer® GPCR DA 细胞是稳定的细胞系，源于经过我们充分验证的 GeneBLAzer® 分裂细胞，这些分裂细胞已经过低剂量丝裂霉素 C 处理。这种专有处理方法不会导致明显毒性或细胞信号转导变化。根据 GeneBLAzer® β-内酰胺酶读数对 GPCR DA 细胞进行了功能验证，以使用主要激动剂测定 Z' 因子和 EC50 浓度（可应要求提供数据）。还使用钙指示剂 fluo-4 NW 对许多细胞系进行了检测。

查看我们的 GeneBLAzer® GPCR 分裂停滞细胞和分裂细胞检测的完整列表。

Invitrogen 通过收购 Sentigen Holding Corp 获得了分裂阻滞技术。作为 Sentigen 交易的一部分，Invitrogen 获得了同族专利，其中包括美国专利号 7,045,281 和澳大利亚专利号 2003270073。目前正在美国和其他一些国家/地区针对该系列申请专利。

仅供科研使用，不可用于诊断目的。

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