MBP20571a

满足您在所有阶段的灌流培养基需求

Gibco 高密度灌流 (HIP) CHO 培养基是一种创新型、化学成分确定的非动物源性 (AOF) 培养基。这种灌流培养基适用于各种类型的灌流工艺,不仅易于使用,更可以使大量CHO 细胞由始至终保持高产量,同时减少培养基的使用。本产品由强大的生产网络稳定供货,同时保证批次间一致性和提供各地可达的支持,使您可以专注于将产品推向市场。

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  • CHO-S、CHO-GS、CHO-K1 和 CHO-DG44 测试
  • 强化流加培养、浓缩流加培养、N-1 和连续灌流测试
  • 高级颗粒技术 (AGT) 的干粉配方能够实现简单且大批量的使用-只需加水即可完成溶解

N-1 强化灌流通常用于提高和浓缩细胞密度。 可以跳过种子培养阶段,同时在生产反应器中实现更高的播种密度。

N-1 perfusion with two different clones
图1.在1 VVD 培养基交换率下,向两个不同的细胞株中施加 N-1 灌流,加快细胞生长率。

在这些工艺中,灌流用于提高细胞密度,同时维持对数生长。 这是一种短期培养方法(通常为 4-7 天),用于减少种子培养中所需的容器数量,提高反应器的播种密度,或产生高密度的种子库。 设定这种培养基交换率的目的是维持细胞处于对数生长状态;通常不考虑生产效率。

在浓缩流加培养中,使用小孔径过滤器来保留最终产物。这类灌流技术类似于有同等产品质量问题风险的流加培养。

Comparison of simple fed batch with a fed batch process
图 2.通过流加培养工艺和浓缩灌注流加培养工艺来增强传统简单流加培养(葡萄糖)的并行应用。浓缩流加培养的最大 VVD 为 1.2。

进行浓缩流加培养时,过滤必须作为产物保留方法,因为在整个运行过程中细胞和产物将回到反应器中。因此,产物可以浓缩在容器中,提高后期的滴度。这种方法非常适合批量工艺或流加培养工艺中生产率低的稳定产物;后期的浓缩滴度能够提高下游批量加工的生产率。运行时间通常为 14~20 天,确定培养基交换率的目标是为下游加工产生足够的滴度。

强化流加培养的运行时间中等(16~22 天),VCD(活细胞密度)和生产率高于正常值。

除了在整个运行过程中将产物从反应器中移除外,强化流加培养与浓缩流加培养类似,因此更适合处理稳定性较差的产物。 培养基交换可以提高滴度产量,由于停留时间较短,因此其质量控制优于批量操作。持续清除产物还可以使下游进行半连续的净化,只需在两次运行间暂停即可。该工艺运行时间一般略长于标准流加培养的运行时间(16-25 天),培养基交换的目的是可尽量发挥每滴度的成本,打破设备限制。

连续灌流的生产运行时间为 30-90 天,能够微调培养过程和产品质量。这类灌流可实现对下游功能的最大优化。

Continuous perfusion
图3.在 1 VVD 培养基交换率下的连续灌流。

连续灌流保持稳态,其中生产率和产品质量可长期保持,且变化较小。这些工艺可从60天延长到90天,并利用主动泄流保持目标存活率百分比或 VCD。 理想情况下,可尽量减少这种泄漏以限制产品损失和大幅度提高工艺的净产量。 与强化流加培养相似,培养基交换率需要经过优化,以尽量提高利润。 这是对技术要求较严格的灌流类型。该工艺还要求细胞系具有高稳定性。尽管目前存在技术难题,连续灌流仍具有吸引力,因为它能够为下游的长期连续生物加工提供途径。

N-1 强化灌流通常用于提高和浓缩细胞密度。 可以跳过种子培养阶段,同时在生产反应器中实现更高的播种密度。

N-1 perfusion with two different clones
图1.在1 VVD 培养基交换率下,向两个不同的细胞株中施加 N-1 灌流,加快细胞生长率。

在这些工艺中,灌流用于提高细胞密度,同时维持对数生长。 这是一种短期培养方法(通常为 4-7 天),用于减少种子培养中所需的容器数量,提高反应器的播种密度,或产生高密度的种子库。 设定这种培养基交换率的目的是维持细胞处于对数生长状态;通常不考虑生产效率。

在浓缩流加培养中,使用小孔径过滤器来保留最终产物。这类灌流技术类似于有同等产品质量问题风险的流加培养。

Comparison of simple fed batch with a fed batch process
图 2.通过流加培养工艺和浓缩灌注流加培养工艺来增强传统简单流加培养(葡萄糖)的并行应用。浓缩流加培养的最大 VVD 为 1.2。

进行浓缩流加培养时,过滤必须作为产物保留方法,因为在整个运行过程中细胞和产物将回到反应器中。因此,产物可以浓缩在容器中,提高后期的滴度。这种方法非常适合批量工艺或流加培养工艺中生产率低的稳定产物;后期的浓缩滴度能够提高下游批量加工的生产率。运行时间通常为 14~20 天,确定培养基交换率的目标是为下游加工产生足够的滴度。

强化流加培养的运行时间中等(16~22 天),VCD(活细胞密度)和生产率高于正常值。

除了在整个运行过程中将产物从反应器中移除外,强化流加培养与浓缩流加培养类似,因此更适合处理稳定性较差的产物。 培养基交换可以提高滴度产量,由于停留时间较短,因此其质量控制优于批量操作。持续清除产物还可以使下游进行半连续的净化,只需在两次运行间暂停即可。该工艺运行时间一般略长于标准流加培养的运行时间(16-25 天),培养基交换的目的是可尽量发挥每滴度的成本,打破设备限制。

连续灌流的生产运行时间为 30-90 天,能够微调培养过程和产品质量。这类灌流可实现对下游功能的最大优化。

Continuous perfusion
图3.在 1 VVD 培养基交换率下的连续灌流。

连续灌流保持稳态,其中生产率和产品质量可长期保持,且变化较小。这些工艺可从60天延长到90天,并利用主动泄流保持目标存活率百分比或 VCD。 理想情况下,可尽量减少这种泄漏以限制产品损失和大幅度提高工艺的净产量。 与强化流加培养相似,培养基交换率需要经过优化,以尽量提高利润。 这是对技术要求较严格的灌流类型。该工艺还要求细胞系具有高稳定性。尽管目前存在技术难题,连续灌流仍具有吸引力,因为它能够为下游的长期连续生物加工提供途径。

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