3D representation of an anion resin attracting negatively charged molecules

离子交换层析 (IEX) 是一种纯化技术,能够根据分子的表面电荷分离电子。这项工艺利用样品中带负电荷分子或正电荷分子与带相反电荷层析基质之间的相互作用。

离子交换层析是下游处理的主要技术,在去除杂质方面发挥了重要作用。赛默飞丰富的阴离子和阳离子交换填料产品已用于许多产品的商业化和后期工艺,包括:

  • 治疗用抗体
  • 疫苗
  • 基因治疗产品
  • 生物仿制药

POROS 填料显著提升了传统离子交换填料的性能,简化了离子交换层析在结合/洗脱或流通模式下的操作。

POROS IEX 填料

结合/洗脱应用

流通应用

阳离子交换

多种生物分子的精纯,例如:

  • 单克隆抗体 (mAb)
  • VLPs
  • 病毒
  • 具有碱性等位点的融合和重组蛋白

在正常的结合/洗脱 (B/E) 条件下,通过结合以下杂质对单克隆抗体进行抛光:

  • 病毒
  • HCP
  • 聚集体

阴离子交换

 

 

捕获:

  • 蛋白/单克隆抗体
  • 病毒
  • 质粒 DNA

精纯:

  • 病毒载体——分离空壳

通过结合以下杂质去除痕量杂质:

  • DNA
  • 病毒
  • HCP
  • 聚集体
  • 内毒素去除

选择合适的填料

选择合适的离子交换填料有助于确保纯化工艺的质量、生产率和有效性。生物分子的净电荷因溶液 pH 值而异。根据纯化步骤和靶分子的电荷性质选择阴离子或阳离子交换填料。

等电点 (pI)

分子或表面所带净电荷为零时溶液的 pH 值。

  1. 当 pH 值低于分子的等电点时,蛋白带有净正电荷,将与阳离子交换填料结合。
  2. 当 pH 值高于分子的等电点时,蛋白带有净负电荷,将与阴离子交换填料结合。
     
Line graph showing how pH changes affects a proteins binding profile

POROS 层析填料

POROS 填料具有较高的结合能力、分离度和耐盐性,能够提供出色的分离性能并满足日益增长的工艺增强需求。POROS 等高性能填料能够简化开发过程,平衡各项纯化要求,有助于开发更高效、更具成本效益的下游工艺。

three-panels describing POROS bead features—high capacity, high throughput, and superior resolution

层析填料的特点

  • 主要成分为聚(苯乙烯-二乙烯基苯)——提高线性和可放大性。磁珠质地坚硬,机械强度高,能够轻松、可再现地实现工艺放大。主要成分为聚合物,化学稳定性高,必要时可进行严格的清洗。
  • 大通孔——传质阻力小于其他填料。在较宽的线速度范围内保持高结合能力和高分离度,从而提高纯化工艺的效率。
  • 50 μm 颗粒——提供卓越的分离度。由于粒径缩小,层析峰更紧密,洗脱体积减小,有助于突破后续生产步骤中的体积限制。
     

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