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T 细胞是一种被称为淋巴细胞的白细胞,它能主动抵御和消灭受感染的细胞。作为免疫应答系统的一部分, T 细胞向其他免疫细胞传递信号,告诉它们有外来颗粒存在。为了充分了解 T 细胞所发挥的作用,免疫肿瘤学研究人员已开始研究不同免疫细胞群的特征,包括 T 细胞及其亚群。
T 细胞活化与扩增试剂盒和试剂有助于分离、活化和扩增 T 细胞,同时保持分离 T 细胞的活力,以便进行下游免疫肿瘤学分析。
克隆 T 细胞扩增是 T 细胞激活和增殖的过程,当人体积极对抗感染或免疫系统攻击时,T 细胞会在体内自然发生。在体外,当naïve T细胞识别并与特定抗原结合,激活T细胞快速增殖或扩增时,就会发生T细胞克隆扩增(图1)。
图 1.体内的克隆 T 细胞扩增刺激与实验室中使用 Dynabeads 磁珠的刺激。
在体内,抗原呈递细胞(如树突状细胞)向naïve T细胞发出两种信号,使其成为活化的T细胞。在体外, Dynabeads 磁珠会向 naïve T 细胞发出两种信号,从而活化 T 细胞。
Dynabeads T 细胞活化和扩增产品可模拟体内抗原呈递细胞(APCs)的 T 细胞活化。Dynabeads T 细胞活化和扩增试剂盒的主要优点包括:
用于人和小鼠的Dynabeads T-Activator CD3/CD28产品是短时间刺激研究和多克隆T细胞(如从全血、单核细胞或组织消化液中分离的T细胞亚群)扩增的理想选择。
Dynabeads 磁珠表面的 CD3 和 CD28 抗体可同时与靶细胞上的 CD3 和 CD28 抗原结合,从而启动信号通路。CD28 信号通过提高 T 细胞对抗原受体参与的灵敏度,使 naive CD4 T 细胞初步活化,从而诱导 T 细胞扩增。
抗体被偶联到 4.5 μm 大小的珠子上(几乎和 APC 一样大),由此产生的三维结构使活化过程与人体生理活化过程非常相似(图 2)。与有丝分裂原或可溶性抗体等更原始的替代品相比,优化的抗体量和产品的可重复性可持续提高活化水平。
这些方案简单明了、高度一致,不需要额外的因素,如自体 APC、有丝分裂原、抗原或饲养细胞。Dynabeads T 细胞扩增试剂盒在通用激活方面优于传统的自制方法。此外,从小鼠或人体研究过渡到临床研究时,也可以使用相同的技术平台。
“我在增殖实验中使用了 CD3/CD28 Dynabeads(试剂盒),实验效果非常好!几个月来,我一直在尝试使用可溶性 CD28/CD3 来工作,但就是没有成功。Dynabeads[磁珠]无疑是我的福音!”
Lisa S. Thomas,IV级助理研究员,希德斯-西奈医疗中心
Dynabeads T 细胞活化和扩增产品的另一个应用领域是从细胞系、细胞克隆或新鲜分离和富集的抗原特异性(Ag 特异性)T 细胞中重新刺激和扩增 T 细胞。
为了扩增 人抗原特异性 T 细胞,磁珠与抗 CD3、抗 CD28 和抗 CD137 抗体结合(图 3)。CD137(4-1BB)是肿瘤坏死因子家族的成员,激动型抗 CD137 抗体是一种活化共刺激分子,对效应/记忆 T 细胞尤为重要,可促进 T 淋巴细胞的存活和增殖。
这项技术可以激活和/或扩增来自小鼠 和人体样本的naïve T细胞、记忆T细胞、T细胞克隆、调节性T细胞、自然杀伤T(NKT)细胞和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。