配体内化和受体内化

特异性受体介导的内吞途径可通过荧光配体——包括靶向 EGF、LDL 和转铁蛋白等常见受体的 pHrodo™ 染料标记物进行检测。

采用 pHrodo™ Red 或 pHrodo™ Green 染料，可区分从早期内体到溶酶体形成的内化途径阶段，且无需淬灭和洗涤步骤，极为方便。

pHrodo™ 染料在中性 pH 值时几乎不发荧光，随着 pH 降低，Red（红色）或 Green（绿色）荧光信号逐渐增强。而荧光信号的增强则可用于检测内吞途径的过程。

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小鼠单核细胞/巨噬细胞（MMM 细胞，ATCC）在活细胞成像溶液中采用pHrodo™ Red 偶联的转铁蛋白处理，并使用 >NucBlue Live ReadyProbes™ 试剂进行核复染。标记转铁蛋白的内化的位置可见红色点状光斑。

特异性受体介导的内吞途径可通过包括靶向 EGF、LDL 和转铁蛋白等常见受体的各种荧光配体进行检测。

Alexa Fluor 染料可与一系列配体结合，为每种配体提供多种波长和单次激发检测选择。检测需要一个洗涤步骤去除细胞表面未结合的偶联物，或者淬灭掉胞外信号。

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A431 细胞中的转铁蛋白和转铁蛋白受体成像。

A431 细胞与绿色荧光lexa Fluor 488 transferrin一起孵育，然后固定和透化。采用抗转铁蛋白受体、小鼠 IgG1 单克隆抗体标记转铁蛋白受体，然后采用红色荧光 Alexa Fluor 555 山羊抗小鼠 IgG 抗体进行成像。黄色荧光指示的为共定位区域。采用 DAPI 染色细胞核。