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细胞表面受体与其特异性抗体结合时,可诱导发生受体介导的内吞作用。它们通常被作为靶向传递治疗用药物、毒素、酶或DNA的载体进行研究。
我们可提供多种抗体标记染料,用于基于洗涤或淬灭的检测,对抗体内化进行检测。
pHrodo Green iFL | pHrodo Red iFL | pHrodo Deep Red | |
---|---|---|---|
检测范围 | 早期内体到溶酶体 | 晚期内体和溶酶体 | |
常用滤光片组 | FITC/GFP | TRITC/RFP | Cy5 |
激发/发射波长 (nm) | 509/533 | 560/585 | 640/655 |
信噪比 | ![]() | ![]() | ![]() |
光稳定性 | ![]() | ![]() | ![]() |
亮度 | ![]() | ![]() | ![]() |
pKa* | 6.5 | 6.5 | 5 |
多色标记 | 是 | ||
活细胞 | 是 | ||
固定细胞 | 否 | ||
检测平台 | 成像系统、高内涵分析、流式细胞仪 | ||
Zenon Fab 片段 | Z25609 (小鼠) Z25611 (人) Z25613 (人,5x包装) | Z25610 (小鼠) Z25612 (人) Z25614 (人,5x包装) | Z25622(小鼠) Z25618 (人) |
SiteClick 位点特异性 | - | C20034 | S10914 |
胺反应性标记试剂盒 | P36015 (20 μg) P36022 (100 μg) P36023 (1mg) | P36014 (20 μg) P36020 (100 μg) P36021 (1mg) | P35355 (100 μg) P35356 (1mg) |
胺反应性试剂 | P36013 | P36011 | P35359 |
*信号出现在环境 pH 达到 pKa 之前。
pHrodo Green iFL | pHrodo Red iFL | pHrodo Deep Red | |
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检测范围 | 早期内体到溶酶体 | 晚期内体和溶酶体 | |
常用滤光片组 | FITC/GFP | TRITC/RFP | Cy5 |
激发/发射波长 (nm) | 509/533 | 560/585 | 640/655 |
信噪比 | ![]() | ![]() | ![]() |
光稳定性 | ![]() | ![]() | ![]() |
亮度 | ![]() | ![]() | ![]() |
pKa* | 6.5 | 6.5 | 5 |
多色标记 | 是 | ||
活细胞 | 是 | ||
固定细胞 | 否 | ||
检测平台 | 成像系统、高内涵分析、流式细胞仪 | ||
Zenon Fab 片段 | Z25609 (小鼠) Z25611 (人) Z25613 (人,5x包装) | Z25610 (小鼠) Z25612 (人) Z25614 (人,5x包装) | Z25622(小鼠) Z25618 (人) |
SiteClick 位点特异性 | - | C20034 | S10914 |
胺反应性标记试剂盒 | P36015 (20 μg) P36022 (100 μg) P36023 (1mg) | P36014 (20 μg) P36020 (100 μg) P36021 (1mg) | P35355 (100 μg) P35356 (1mg) |
胺反应性试剂 | P36013 | P36011 | P35359 |
*信号出现在环境 pH 达到 pKa 之前。
Invitrogen LysoLight 抗体标记试剂盒和活性染料是监测抗体、蛋白质抗体药物偶联物 (ADC) 在溶酶体分解代谢的强大工具。 与pH依赖的 pHrodo 技术不同,LysoLight 染料偶联的抗体或蛋白质即使在晚期内体中也不会发出荧光。 一旦到达富含蛋白酶的溶酶体环境,LysoLight 染料就会发出特异的荧光,表征蛋白发生了水解(见图)。
LysoLight的独特设计为研究蛋白和 ADC 的内化和运输提供了卓越的灵敏度和特异性。使用 LysoLight 技术,研究人员还可以评估目标蛋白降解剂候选分子对分解代谢或回收途径的倾向。 这可以帮助靶向蛋白质降解领域的研究人员进行候选分子的微调,以获得更大的治疗潜力。
LysoLight 染料的作用机制。 与 LysoLight 染料偶联的抗体、蛋白或 ADC 在到达溶酶体前保持非荧光状态,linker部分被溶酶体酶组织蛋白酶 B 裂解。荧光值增加表明偶联物在溶酶体被讲解降解,荧光值无变化表明偶联物走了内体再循环的回收途径。
一些荧光强度不受环境影响的荧光基团(如Invitrogen Alexa Fluor染料),用于抗体内化研究时需要使用淬灭剂。而pHrodo iFL 染料在中性pH条件下不发出荧光,内化后在酸性pH环境下可发出明亮的荧光,且无需使用淬灭剂(如图),是一类便捷高效的抗体内化检测工具。
pHrodo iFL 系列和pHrodo深红色染料在中性pH下几乎不发出荧光,随着染料被内化且pH降低,远红、红色或绿色荧光信号会逐渐增强,而荧光信号的增强可用于检测胞吞途径的过程。区别于pHrodo iFL 绿色和红色染料,pHrodo深红染料的pKa更低,直到晚期内化阶段才会发出荧光。
低 pKa 的 pHrodo Deep Red 经过优化,用于晚期内体和溶酶体检测。使用 pHrodo Deep Red 标记赫赛汀(用于治疗乳腺癌和胃癌的单克隆抗体)。使用由 pHrodo Deep Red 标记的赫赛汀和 CellLight 早期内体-RFP(左)、CellLight 晚期内体-RFP(中)和 CellLight 溶酶体-RFP(右)处理 SKBR3 细胞。过夜孵育后,在 37℃ 下使用 NucBlue Live 核染料将样本染色 30 分钟。使用 EVOS M7000 细胞成像系统获得荧光图像并叠加。重叠的荧光信号(白色)表明,用 pHrodo Deep Red(洋红色)标记的内化赫赛汀抗体在晚期内体和溶酶体中发出荧光,但在早期内体中不发出荧光。这些数据表明,晚期内体和溶酶体中的酸性 pH(5.5–6.0)环境,可以激活 pHrodo Deep Red 从无荧光变为深红色荧光。
pHrodo iFL Green和pHrodo iFL Red活性染料是在pHrodo染料(用于吞噬、内吞、和内化过程的指示剂)基础上进行升级改进而来的。pHrodo iFL染料的溶解性进行了优化,提高了与标记抗体的结合,避免可能会在结合过程中发生沉淀。荧光染料可采用三种不同的抗体标记技术进行了标记结合,以满足您检测抗体内化的需要。
SiteClick抗体标记系统可以简单且位点特异地将化合物(包括荧光染料或毒素等)连接至几乎所有IgG抗体只有在重链才存在的N端多糖位置,远离抗原结合结构域,实现每一次标记之间和不同抗体之间(无论哪种构型和宿主种属)的出色可重复性。抗体可以通过在糖残基上插入叠氮基团进行酶修饰,而使其可以发生点击化学反应,然后与一系列Click-iT sDIBO Alkynes(可标有Alexa Fluor染料、生物素或其他所需连接分子的活性形式)通过Click化学反应进行标记物连接。
Zenon抗体标记产品提供了一种非常快速(约十分钟内)标记IgG抗体的方法,从而成为抗体内化筛选的一种非常高效有用的工具。Zenon标记方法采用了与pH敏感的pHrodo iFL染料或经典的Alexa Fluor染料偶联结合的Fab片段。这些Fab片段可直接结合至IgG抗体的Fc区,且不影响目标抗体的抗原识别位点,同时也具有很好可靠的标记恒定度。Zenon技术可标记低至1 μg 的抗体,与传统的使用氨基或巯基反应性标记方法不同,Zenon抗体标记可兼容BSA以及其他的稳定蛋白。
pHrodo iFL染料可通过抗体上的赖氨酸用于传统的抗体标记。这些氨基反应性的pHrodo iFL STP酯具有绿色和红色两种版本,可作为单独包装或微量蛋白标记试剂盒提供,后者包含标记及纯化蛋白或抗体所需的全部试剂。
pHrodo iFL Red & Green STP 酯染料是经典版 pHrodo Red & Green 染料的升级版本,标记产物的溶解性大有优化。因此新版染料在抗体标记中表现更突出,规避了抗体在偶联过程中从溶液中析出的现象。
产品名称 | 标记规格 | SKU |
---|---|---|
SiteClick Antibody 叠氮修饰试剂盒(单独订购时不包含 sDIBO 标签) | 100-250 µg | S20026 |
Click-iT pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃,用于抗体标记 | 100-250 µg | C20034 |
SiteClick pHrodo Deep Red sDIBO 炔烃 | 250 μg | S10914 |
SiteClick pHrodo Deep Red sDIBO 炔烃 | 1 mg | S10915 |
SiteClick pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃 | 1 mg | S10903 |
SiteClick pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃 | 5 mg | S10908 |
产品名称 | 标记规格 | SKU |
---|---|---|
Zenon pHrodo iFL Green Mouse IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25609 |
Zenon pHrodo iFL Red Mouse IgG标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25610 |
Zenon pHrodo iFL Green Human IgG标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25611 |
Zenon pHrodo iFL Red Human IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25612 |
Zenon pHrodo iFL Green Human IgG标记试剂盒5x大包装 | Up to twenty 96 well plates | Z25613 |
Zenon pHrodo iFL Red Human IgG 标记试剂盒5x大包装 | Up to twenty 96 well plates | Z25614 |
Zenon pHrodo iFL Deep Red Mouse IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25622 |
Zenon pHrodo iFL Deep Red Human IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25618 |
产品名称 | 标记规格 | SKU |
---|---|---|
pHrodo Deep Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P35355 |
pHrodo Deep Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P35356 |
pHrodo iFL Red 微量蛋白标记试剂盒 | 3 x 20 µg | P36014 |
pHrodo iFL Green 微量蛋白标记试剂盒 | 3 x 20 µg | P36015 |
pHrodo iFL Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P36020 |
pHrodo iFL Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P36021 |
pHrodo iFL Green 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P36022 |
pHrodo iFL Green 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P36023 |
产品名称 | 标记规格 | SKU |
---|---|---|
pHrodo Deep Red TFP 酯(氨基反应性) | 3 x 100 µg | P35358 |
pHrodo Deep Red TFP酯(氨基反应性) | 1 mg | P35359 |
pHrodo iFL Red STP 酯(氨基反应性) | 3 x 100 µg | P36011 |
pHrodo iFL Red STP 酯(氨基反应性) | 1 mg | P36010 |
pHrodo iFL Green STP 酯(氨基反应性) | 3 x 100 µg | P36013 |
pHrodo iFL Green STP 酯(氨基反应性) | 1 mg | P36012 |
产品名称 | 标记规格 | SKU |
---|---|---|
SiteClick Antibody 叠氮修饰试剂盒(单独订购时不包含 sDIBO 标签) | 100-250 µg | S20026 |
Click-iT pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃,用于抗体标记 | 100-250 µg | C20034 |
SiteClick pHrodo Deep Red sDIBO 炔烃 | 250 μg | S10914 |
SiteClick pHrodo Deep Red sDIBO 炔烃 | 1 mg | S10915 |
SiteClick pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃 | 1 mg | S10903 |
SiteClick pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃 | 5 mg | S10908 |
产品名称 | 标记规格 | SKU |
---|---|---|
Zenon pHrodo iFL Green Mouse IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25609 |
Zenon pHrodo iFL Red Mouse IgG标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25610 |
Zenon pHrodo iFL Green Human IgG标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25611 |
Zenon pHrodo iFL Red Human IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25612 |
Zenon pHrodo iFL Green Human IgG标记试剂盒5x大包装 | Up to twenty 96 well plates | Z25613 |
Zenon pHrodo iFL Red Human IgG 标记试剂盒5x大包装 | Up to twenty 96 well plates | Z25614 |
Zenon pHrodo iFL Deep Red Mouse IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25622 |
Zenon pHrodo iFL Deep Red Human IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25618 |
产品名称 | 标记规格 | SKU |
---|---|---|
pHrodo Deep Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P35355 |
pHrodo Deep Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P35356 |
pHrodo iFL Red 微量蛋白标记试剂盒 | 3 x 20 µg | P36014 |
pHrodo iFL Green 微量蛋白标记试剂盒 | 3 x 20 µg | P36015 |
pHrodo iFL Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P36020 |
pHrodo iFL Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P36021 |
pHrodo iFL Green 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P36022 |
pHrodo iFL Green 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P36023 |
产品名称 | 标记规格 | SKU |
---|---|---|
pHrodo Deep Red TFP 酯(氨基反应性) | 3 x 100 µg | P35358 |
pHrodo Deep Red TFP酯(氨基反应性) | 1 mg | P35359 |
pHrodo iFL Red STP 酯(氨基反应性) | 3 x 100 µg | P36011 |
pHrodo iFL Red STP 酯(氨基反应性) | 1 mg | P36010 |
pHrodo iFL Green STP 酯(氨基反应性) | 3 x 100 µg | P36013 |
pHrodo iFL Green STP 酯(氨基反应性) | 1 mg | P36012 |
仅供科研使用,不可用于诊断目的。